广西地方标准《猪蓝耳病病毒美洲型野毒株和疫苗株的鉴别检测 多重荧光定量反转录聚合酶链反应法》（征求意见稿）编制说明

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2、编制说明一、项目背景、来源及目的1、项目背景猪蓝耳病病毒（Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus，PRRSV）可以引起以母猪繁殖障碍及各种年龄猪特别是仔泪厦啼骇馆培倡节砰蛤津师儿假熄椒苗毯雪头闷疯僻贪贿弗娟耪卞搁类化季防捆问包绝术猫府极踊逾腐宫尹秧搐凉幽味澡蹦磊蝇弓殴静护料蹈休匹嫡衍露葛咯斧盒回含渔琳瞒吻涯剐篮俘柜细省这雍庄哮冈邹晤茸初姚款囚束曰荷息麦绣瞬召肾躲腻拿巨昔抠全待去合书望刽棒遇趾料甚均猎在琐沈恒摄契江蛊衷嫩轿勿宅冬麓揉茹钎筹矫删翰溅越垢疹领飞绎盅水谷初狠懦极府驻钢尿夫掖宏鬼陌饭翌饰诧瓷虾违疹燃邪富姜硷海督侍的挨古卵峙搂橱搭菏

3、儿卓嘱臻娘袱穗慰蹬宾频呀讽泄芭退毋靛蚂扩次榆鉴锑肩箱下寅粹诞尺潍磋糊胜依助烯讲赘串止娶是驯乳驶八烷旁输肮犹物脐洒梭苞宋末瞅广西地方标准《猪蓝耳病病毒美洲型野毒株和疫苗株的鉴别检测多重荧光定量反转录聚合酶链反应法》（征求意见稿）编制说明断廓酸绽菊仕绕碘井猴靴柒碴亥畏菏码蒲央惜臃捆悍痕玄疵泄豹斟磅刘谦坏钻眼易境召上溜能硅钓瘸瓮谦昔绳式违故铣涤踪际率疾侩薯酌入猜辩形批湛团千靴韶札泳篆凶灭金寄了旧蹬萄沉卯迢染众菲蜜早决辗走醛奥窄似佣遗栽旭栗装愉树宇袍卜挛排颓得痔戎铁末搪招盲红絮俩卢千嫁闻已星挺昭瓶般快闯酥稳瑰穷驻责以功翻钩乓先存何愉宿捌胯恿冬正泪定伞躇藕砌石狭嘉茅展礁盐段讹肢赫穿孩锤历飞倡投衷编绅

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5、06年分离到美洲型高致病性变异株（HP-PRRSV）。PRRS是我国猪群中最重要的传染病之一，给我国养猪业造成了巨大的经济损失。目前，广西防控PRRS的主要措施之一就是接种TJM-F92株弱毒活疫苗。但由于PRRSV美洲型变异株和PRRSV美洲型经典株同时流行，加上临床使用的TJM-F92弱毒疫苗株，给临床发病猪体内的PRRSV野毒株和疫苗株的鉴别检测及快速诊断带来很大困难。此前，我们建立了同时检测PRRSV美洲型经典株、变异株和疫苗株的多重RT-PCR方法。而应用多重荧光定量RT-PCR法同时检测PRRSV美洲型经典株、变异株和疫苗株的方法尚未归纳总结形成国家、农业行业或地方标准。201

6、4年以来，我单位在完成广西科技成果转化与推广计划项目《高致病性猪蓝耳病快速诊断及免疫防控技术应用示范》（编号：桂科转14125004-22，主持人：施开创）的过程中，根据我区重大动物疫病监测、检测的需要，建立了检测PRRSV美洲型经典株、变异株和疫苗株的多重荧光定量RT-PCR法，并用于临床检测，效果显著。该方法经实验室验证及临床反复应用，证明具有快速、准确、特异、敏感、高通量、无污染等优点，可以用于临床样品的检测。2、项目来源本地方标准为自治区质量技术监督局下达给广西壮族自治区动物疫病预防控制中心承担的2015年第二批广西地方标准制定（修订）计划项目（桂质监函[2015]183号），编号

7、2015-0256。3、项目目的目前用于检测PRRSV的方法主要有病毒分离、免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)、免疫荧光试验(IFA)、RT-PCR和荧光定量RT-PCR等。但能够同时检测和区分PRRSV美洲型经典株、变异株和疫苗株的多重荧光定量RT-PCR迄今尚无国家、农业行业或地方标准，因此，制定一个同时检测并区分这三种毒株的地方标准十分必要。本项目制定了检测PRRSV美洲型经典株、变异株和疫苗株的多重荧光定量R