高效液相色谱法测定兔血浆中黄芩苷的含量.doc

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1、高效液相色谱法测定兔血浆中黄芩苷的含量作者:蒋晪,王鹏娇,张敏,高秀丽【摘要】  目的:建立测定兔血浆中黄芩苷的含量测定方法。方法:用PEG400-2%偏磷酸沉淀血浆蛋白,离心后取上清液进行色谱分析。色谱柱为Diamosil-C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸(25∶75,V/V),流速为1ml/min,检测波长275nm。结果:黄芩苷的质量浓度在0.08722~2.9075mg/L(r=0.9899);低、中、高3个浓度的质量控制(QC)样品的相对回收率分别为96.3%、97.3%和96.6%。结论:方法简便快速,适用

2、于黄芩苷的血药浓度测定及药代动力学研究。【关键词】黄芩甙;色谱法,高压液相;血浆;免  [Abstract]Objective:ToestablishabiopharmaceuticalanalyticalmethodforthedeterminationofbaicalininplasmabyRP-HPLC.Methods:RabbitplasmaproteinswereprecipitatedwithPEG400-2%metaphosphoricacidandthesupernatantliquidobtainedf

3、romtheserumbycentrifugewassubjectedtochromatographicanalysis.TheanalyticalcolumnwasEclipseXDB-C18,andthemobilephaseconsistedofacetonitrile-0.1%phosphoricacid(25∶75,V/V)withaflowrateof1ml/min.Thedetectionwavelengthwas275nm.Results:Thelinearrangeofbaicalininrabbitp

4、lasmawas0.08722~2.9075mg/L(r=0.9899).Threerelativerecoveriesofbaicalinrepresentedlow,middleandhighconcentrationswere96.3%,97.3%and96.6%respectively.Conclusion:Thismethodisaccurate,reliableandsimpleandissuitableforthepharmacokineticstudyofbloodconcentrationofbaica

5、lin.  [Keywords]baicalin;chromatography,highpressureliquid;plasma;rabbits黄芩为唇形科多年生草本植物黄芩的根,主要含有黄芩苷、黄芩素等多种黄酮类化合物[1]。黄芩苷作为黄芩的主要有效成分之一,属葡萄糖醛酸苷类,具有广泛的药理作用,除传统意义上的抗炎、抗变态、抗病毒以及解热和保肝作用外,近年来,黄芩苷新用途的开发与研究日渐深入[2]。黄芩苷具有清除氧自由基、减轻组织缺血再灌注损伤、促进细胞凋亡以及抗肿瘤等多方面的作用[3]。黄芩苷具有多种药理活性,在中

6、药中的应用非常广泛,用量也特别的大,但相关报道其生物利用度较低[4]。因此,在传统种植、提取及含量测定研究的同时,建立黄芩苷的血药浓度测定方法,研究其体内代谢过程,具有十分重要的基础和临床意义。2007年4月对兔血浆中黄芩苷的含量测定方法进行了研究,并测定了灌胃后家兔体内黄芩苷浓度,同时对其进行了相应的药代动力学分析。4  1仪器与试药    Agilent1100系列高效液相色谱仪(四元泵、可变波长检测器、自动进样器、柱温箱、化学工作站B.01.01C版),TGL-16C离心机(上海安亭科学仪器厂);黄芩提取物(含黄芩

7、苷90%,四川省玉鑫药业有限公司),黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号110715-200514);乙腈、甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。实验用兔由贵阳医学院动物中心提供。  2方法与结果  2.1色谱条件    色谱柱:Diamosil-C18(250mm×4.6mm,5μm),Phenomenex-C18保护柱(3mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸(25∶75,V/V);流速:1ml/min;检测波长:275nm;柱温:40℃;进样量:50μl。  2.2血浆样本处理    取待测血浆0

8、.2ml,加入PEG4000.2ml,2%的偏磷酸0.2ml,涡旋混合30s沉淀蛋白,高速离心(16000r/min)10min,取上清液50μl进样测定。  2.3检测  限在2.1的色谱条件下,样品按上述方法操作,得黄芩苷的最低检测浓度为0.02908mg/L(S/N≥3)。  2.4方法专一性  在2.1的色谱

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