reach法规 第五卷译稿-21new

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1、C.13生物聚集：流动鱼的测定1.方法这个生物聚集实验是OECDTG305（1996）的翻版1.1.引言这个方法描述了流动条件下鱼的生物聚集能力，虽然流动测定的变化特征是更好的，但是假如确实性标准满足的话，半静止的变化特征也是可以的。为了满足不同的实验环境和各种特征的测定物质，这个方法给了足够的细节以便于给予实验者足够的自由去改变实验设计。当在1.5到6之间时，这种化学药剂是最好的。（1）但是极亲脂性的试剂也可以（>6）生物富积因子（）有时用表示。对于这种极亲脂性的试剂我们测得的数值应该会比稳定状况下的生物富积因子（）要大。预计我们用公式的话测得的生物富积因子的值会有9.0那么大。影响

2、生物聚集能的参数有吸收率常数（）、释放率常数（）和稳定状况下的生物富积因子。用放射性物质标记可以使测量定量时更加方便。只要测出最终剩余的放射性物质（例如：氧化或组织增溶），BCF是由母体化合物、保留的代谢物和吸收的碳所决定的。BCF并不是完全依赖于放射性剩余，可以用获得的BCF与母体化合物进行比较组作为特别的化学分析。整理一下过程，我们用放射性标记测定BCF，母体化合物和主要的代谢物如果需要的话应该被标记。我们还可以分析和识别鱼组织中的残余物质，并进行生物聚集的研究去组成对鱼代谢物的研究。1.2.定义及单位生物聚集即实验物质在器官（特别在组织中）浓度的增加与物质在环境中的浓度有关。生物

3、富积因子（或）在这个聚集实验的吸收阶段的任何时候都是与测定物质在鱼或组织的周围浓度有关的。这个浓度是被周围的化学物质所分割的。稳定状态的生物富积因子（或）在延长的时间里并没有明显的改变，在这段时间里，周围测定物质的浓度是恒定未变的。当鱼中的物质浓度（Cf）曲线开始平行于时间轴，这时达到了平台期或者叫做稳态。取三次样，每次至少相隔两天，Cf数值彼此相差在20%以内，并且鱼周围的环境没有什么明显的变化时，我们说鱼中的物质稳定和平衡了，当分析合并样本时，至少需要四个连续的分析。对于吸收慢的物质我们最好需要七天。可以直接从动力学比例常数（）计算得出动力学富积因子（BFCk）。辛醇-水分配系数（

4、Pow）是平衡时正辛醇在水中的溶解比率。水生生物体的生物聚集潜力用Pow的对数来标记。吸收阶段是鱼在暴露在测定物质中的时间。吸收率常数（K1）是鱼暴露于测定物质中时鱼中的测定物质的浓度的增长速率的数字表达（单位：天-1）。释放阶段是将鱼从含有测定物质的环境中转移至不含测定物质的环境中后，对外释放测定物质的阶段。释放率常数（K2）是将鱼从含有测定物质的环境中转移至不含测定物质的环境中后鱼中的测定物质的浓度的减小速率的数字表达（单位：天-1）。1.3.原理和实验方法实验分为两个阶段：聚集阶段和释放阶段。在聚集阶段过程中，分开的各组同类鱼放在至少两种浓度的测定物质中，然后把它们转移到一个没有

5、测定物质的环境中去进行释放阶段。只要聚集阶段中在生物体内的测定物质的聚集是比较明显的（>10），那么就需要进行释放阶段。在两个阶段时生物体内的测定物质都要进行测量。除了两种实验浓度，我们还要有一组鱼放在一个没有测定物质但其他条件都和两组实验组相同的环境下，用来作为“背景”。在没有证明平衡早已达到前聚集阶段需要进行28天，附录3的公式可以推导出聚集阶段至少需要的天数。将鱼转移到另一个没有测定物质但其他环境相同的容器里释放阶段就开始了。生物富积因子可以用两种方法计算，一种是周围测定物质的浓度与生物体内测定物质的比值；或者水中浓度与动力学生物富积因子的比值。=，是满足动力学第一定律的。如果明

6、显不符从动力学第一定律，那么我们就要用更加复杂的模型了（附录5）。如果28天都没有达到平衡，那么聚集阶段就应该延长，如果直到60天也没有达到平衡，那么就中止聚集阶段，而进入释放阶段。聚集率常数、释放率常数、生物聚集因子都可以从一个把鱼和水中的测定物质浓度描述的很好的模型中计算出来。可以用鱼的总湿重的一个函数表示。另外，当有特殊目的时，我们还可以把鱼分成肉和内脏两部分。对于许多有机物质，生物聚集能和和亲脂性有着明显的关系，测定物质的生物聚集和鱼的脂肪体积也有着一致的关系。为了减少实验结果中变量的影响，我们使用高脂性的（>3）物质，生物聚集就和鱼的总重和脂肪体积有关。条件允许的话，我们应该

7、用相同的生物材料和脂肪体积来决定测定物质的浓度。1.4.测定物质及性质在测定生物聚集能前，我们应该了解测定物质下面的一些信息：水中的溶解度；辛醇-水分配系数（）；水解作用；水中的折射率；表面张力；还有以下信息需要知道：实验中测定物质对鱼种的毒性强度，最好是渐进的LC50。一个合适的分析方法，要准确且精确，用于对实验实验结果和生物材料中测定物质定量化，对样品的细节进行准备。还要知道水和鱼中的测定物质的最小探测限度。当用14C进行标记时，应该要知道