REACH法规 第五卷译稿-23

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1、C.15鱼在胚胎期和幼苗期的短期毒性实验1．方法这个短期的毒性实验是重复OECDTG212（1998）上的。1．１引言这个鱼在胚胎期和幼苗期的短期毒性实验是一个将生命从受精卵到幼苗期这段时间暴露在危险中的短期实验。在胚胎期和幼苗期没有饲料提供，而实验将这样终止，但是幼苗仍将从卵囊中继续培养。本实验打算划定在测定的特殊时期和种类中足以致死的和非致死的化学物质。这个实验将提供许多有用的信息包括：a、是一座架在致死和非致死间的桥梁；b、可以作为一个对不完全初期生物时期或慢性毒物的审查性实验；c、对在某处耕作技术还未充分发展到可以包括内部生长到内部饲养改变时

2、期的物种做测定。可能认为只有混合鱼生命循环中所有周期的实验才可能对慢性毒物对鱼的影响作出一个准确的评估，而且那些在生命各时期方面减少的暴光度可能会减少敏感度而因此低估了慢性毒物。为此预计胚胎期和幼苗期实验特别是在一些高亲脂性化合物及有特殊毒性效果的化学物质方面不如全程生命实验敏感。尽管如此，可能在2个实验中有一些不特殊的有麻醉效果的物质在敏感性上有更微小的差异（1）。在发表这个实验之前，这种胚胎-幼苗期实验的经验多以一种叫Daniorerio的淡水鱼（硬骨鱼，鲤科，普通名称斑马鱼）。更多关于这个系列的实验演示的详细指导在附件1中给出。这个并未避开使用

3、其他可用的经验（表格1）。1．２定义最低观测影响浓度（LOEC）：是一种被观测物质在对比于对照实验有明显影响（当p<0.05）的情况下在测定的最低浓度。无观测影响浓度（NOEC）：是实验浓度中低于LOEC的浓度。１．３实验原理胚胎和幼苗期的鱼被暴露在一系列不同浓度的溶有实验物质的水中。在草案中，可能要在半稳态实验和流动法实验中做出一个选择。而这个选择取决于实验物质的性质。这个实验始于将受精卵放入实验扩展槽中而终于在任一实验扩展槽中的卵黄被幼虫全部同化之前或饥饿死亡率超出对照之前。将致死和非致死影响与对照实验对比、评估，并测出LOEC和NOEC。相互地

4、，也可以用回归分析来估计浓度而导致的百分比影响（即：LC/Ecx，这里x定义为影响百分比）。１．４实验物质信息一个精确的毒性实验结果能更好的显示出一系列对实验的选择，是可利用的。这个实验结果可以用在选择早期生命实验中可处理的实验浓度范围。还要知道实验物质在水中的溶解性（包括在实验用水中的溶解性）和实验物质的饱和蒸汽压。在一个已知的、精确实验结果报告并且限量探测的实验方案中一个可靠的物质定量分析方法是有效的。结构公式，物质的纯度，在水中和光照下的稳定性，Pka，Pow以及预备生物降解的结果都是有用的信息。１．５实验的有效性对一个有效的实验，应当遵循以下

5、几点：所有对照实验中相关的继续存活的受精卵及相关在仅溶的容器中的量不少于附件２、３中所定义的限制；在整个实验中溶解的氧气浓度必须在空气饱合含量的60%~100%之间；在实验扩展槽或整个实验中任何连续几天时间水温变化不超过±℃，并且在一系列实验中指定的温度范围内（附件2、3）。1.６实验方法描述１．６．１实验扩展槽可以使用任何玻璃或其他任何化学惰性容器。容器的尺寸应大至足够允许满足投放比率（见章节1.7.1.2）。要求实验扩展槽在实验地区的某一随机位置。当存在实验室系统误差时，一个对每个分步骤处理方式的分步骤预想对完全随机方案是有好处的，并能够进行适当

6、控制。分步骤，如使用，要注意随后的数据处理，而实验扩展槽要小心防备以外打扰。１．６．２鱼品种的选择可接受的鱼的品种在表格1A中已给出。这里不能避免使用其他种类（例如：在表格1B中所列出的），但实验步骤上可能不得不提供更好的实验条件来适应实验步骤。在这种条件下实验结果报告出了选择的基本原则和实验方法。１．６．３养殖鱼种类的选择关于养殖鱼种类的细节可在OECDTG210和参考文献（2）、（3）、（4）、（5）、（6）中找到。１．６．４胚胎和幼苗的处理在主容器中，胚胎和幼苗是暴露在外的，在小点的容器中在侧面和底部安装网使得容器里允许实验的水流动。那些计划好

7、的悬浮在臂状物上的小容器使得容器上下摇动会产生不狂暴的水流流过小容器，但总能保持有机体浸没在水中。在使用一个虹吸系统。鲑鱼的受精卵被放在有足够幼鱼孵化后离开的孔的网或架子上。巴斯德移液管的用处是适当地将胚胎和幼苗移到半稳态实验中并每日都重复（见章节1.6.6）。在大容器中放有卵的格子或网是卵的容器。这些限制可以在幼苗孵化后移除，但要保留一些以阻止鱼逃跑。如果有需要迁移幼苗，它们就不能暴露在空气中且网不应用来将鱼从卵容器中放出来（对于一些易碎种类如鲤鱼，这个警告不必要）。对于这个迁移而安排的时间随种类而改变而且迁移并不一定是必要的。对半稳态技术，如必要

8、也可使用烧杯或浅底容器，并在其底部上方装一个纱网且比烧杯底略微提高一点。如果这组容器足够满足装样要求，那迁移