体外镁合金与小鼠成骨细胞联合培养观察

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1、体外镁合金与小鼠成骨细胞联合培养观察【摘要】观察镁合金与小鼠成骨细胞体外联合培养后，小鼠成骨细胞的活力、组织形态变化及生长扩增情况。由此验证镁合金与成骨细胞的生物相容性和骨传导特性，探讨镁合金成为一种新型骨科内置物材料的可行性。［方法］将小鼠成骨细胞体外扩增培养，并应用钙钴法及VonKossa法检测碱性磷酸酶加以验证。传代后将成骨细胞与镁合金金属片体外复合培养，细胞密度为3×104/ml。培养24、48、72h后，分别进行扫描电镜（SEM）、共聚焦显微镜观察细胞形态学变化及生长情况。［结果］小鼠成骨细胞体外培养后大量扩增，

2、细胞特性稳定。与镁合金复合培养后，细胞保持良好的活性和分裂增殖能力。SEM观察：细胞粘附明显，增殖分化良好；共聚焦显微镜观察：随时间段的延长，细胞形态完整，轮廓清晰，增殖明显。［结论］镁合金与小鼠成骨细胞具有良好的生物相容性，镁合金对成骨细胞具有良好的骨传导特性。因此，镁合金成为一种新型的骨科内置物材料具有较强的可行性。【关键词】镁合金成骨细胞生物相容性Abstract：［Objective］Toobservemouseosteoblastsvitality,histomorphologyandgrowingdevelop

3、mentinvitroco-culturecombinedwithmagnesiumalloys,confirmthebiocompatibilityofmagnesiumalloysandosteoblasts,andtry10tofindoutthepossibilityofmagnesiumalloystobeanewtypeofbonesurgeryimplantmaterial.［Method］MouseosteoblastswerecheckedbyGomoriandVonkossastained,cultur

4、edanddevelopedinvitro.Thentheosteoblastsweremixedwithmagnesiumalloysinacelldensityof3×104/ml.After24、48、72hourscoculture,thesurfaceofmagnesiumalloyswereobservedbyscanningelectronmicroscopy(SEM)andconfocalmicroscopytofindthechangeofosteoblasts.［Result］Afterculture

5、invitro,theosteoblastswelldeveloped,andexpressedstablecharacter.Aftercoculturewithmagnesiumalloys,thecellsadheredandproliferatedonthesurfaceofalloysverywellfromSEMandconfocalmicroscopyobservation,whichshowedtheosteoblastshadgreatactivityandreproducecapability.［Co

6、nclusion］Magnesiumalloysshowedgoodbiocompatibilityandboneconductioncapabilitywithmouseosteoblasts,sothemagnesiumalloyisverypossibletobeanewtypeofbonesurgeryimplantmaterial.Keywords：magnesiumalloy;osteoblast;biocompatibility10镁合金作为一种可降解金属材料，近年来成为新型的骨科内置物领域的研究热点。本研究

7、用小鼠成骨细胞与镁合金体外联合培养的方法，并与生物相容性好、可降解的多聚乳酸（PLA）作比较，初步评价其生物相容性及骨诱导性，从而为进一步动物体内实验做准备。1材料与方法1.1材料准备1.1.1镁合金金属片镁合金由镁（98%）、锰（1%）、锌（1%）组成，制成直径8mm，厚度1mm的圆形薄片。中国科学院金属研究所提供。高温高压消毒后备用。PLA膜片PLA膜片：分子质量19kd，孔径＜5μm,制成直径8mm,厚度200μm的圆形薄片。武汉工业大学生物材料研究所提供。紫外消毒后备用。小鼠成骨细胞的制备1.2.1细胞营养液配制培

8、养液使用DMEM低糖培养基（Gibco）加入20%灭活胎牛血清（杭州四季青），青霉素100U/ml,链霉素100U/ml；细胞消化液用胰蛋白酶（1∶250，Sigma）溶解于d-hank’10s液，过滤灭菌。1.2.2小鼠成骨细胞培养及检验　　小鼠成骨细胞购自上海麦莎生物科技有限公司的MC3T3-E1小