il18对hk2细胞e钙黏蛋白表达的作用及其可能的胞内信号途径

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1、IL18对HK2细胞E钙黏蛋白表达的作用及其可能的胞内信号途径作者：陈伟,梁东,姚翠微,陶静莉,陈孝文,刘华锋【摘要】目的:探讨白细胞介素18（IL18）是否通过核因子κB（NFκB）细胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化。方法:实验分单纯IL18刺激组和SN50预孵育组,单纯IL18刺激组采用终浓度分别为0、1、10、100μg/L的IL18处理人肾小管上皮细胞株（HK2细胞）72h,SN50预孵育组在此基础上预先应用终浓度为100mg/L的NFκB特异性抑制剂SN50预处理细胞0.

2、5h。然后应用免疫细胞化学法检测HK2细胞Ecadherin的表达百分数;采用RTPCR法检测HK2细胞EcadherinmRNA的表达。结果:NFκB特异性抑制剂SN50可拮抗IL18对HK2细胞EcadherinmRNA和蛋白表达的抑制作用。结论:IL18可通过核因子κB（NFκB）细胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化。【关键词】上皮细胞间充质细胞转分化;IL18;NFκB;肾小管上皮细胞［Abstract］AIM:ToexploretheeffectofNFκBsign

3、alingpathwayininterleukin18inducedtransdifferentiationinrenalproximaltubularcells.METHODS:9InIL18stimulationgroups,HK2cellswerechallengedwithdifferentconcentrations(0,1,10,100μg/L)ofIL18for72h;InSN50preincubationgroups,HK2cellswereincubatedwith100mg/LSN50

4、for30minbeforeIL18wasadded.Attheendoftheincubation,theexpressionofEcadherinwasdeterminedbythecombinationofimmunocytochemistryandRTPCR.RESULTS:PercentageofEcadherinpositiveexpressionHK2cellswasdecreasedbyIL18indosagedependantmanner.ExpressionofEcadherinmR

5、NAinHK2cellswasalsodecreasedbyIL18indosagedependantmanner.RecoveredthemostlypartofexpressionofEcadherinwasfoundafterHK2cellswerepretreatedwithSN50.CONCLUSION:IL18inducedtransdifferentiationofRTECsissuppressedbyblockingNFκBsignalingpathway.IL18inducedtr

6、ansdifferentiationofRTECsatleastispartlyviaNFκBpathway.［Keywords］renaltubularepithelialcells;interleukin(IL)18;nuclearfactorκB;epithelialmesenchymaltransdifferentiation近年来已证实肾小管上皮细胞（renaltubularepithelialcells,RTECs）间充质细胞转分化（epithelialmesenchymal9transdif

7、ferentiation,EMT）在肾间质纤维化过程中发挥重要作用［1,2］。稳定上皮细胞的物质主要是上皮细胞表型稳定物质如钙黏蛋白（Ecadherin）表达丧失和/或间充质细胞标志蛋白如α平滑肌肌动蛋白的表达是EMT的重要标志［3,4］。IL18是一多功能炎症因子,我们前期研究发现:IL18可促进近曲小管上皮细胞转分化［5］,但其细胞内通路尚不明确。有研究证实许多免疫炎症因子,包括肿瘤坏死因子、白细胞介素、黏附分子、单核细胞趋化因子1等均含有核因子κB（NFκB）的结合位点［6］;另外有人研究发现阻断

8、NFκB途径可以抑制EMT［7］。因此,本研究通过观察NFκB特异性抑制剂SN50（可透过细胞膜,抑制NFκB复合体核转位）对IL18所诱导HK2细胞Ecadherin表达的变化,旨在进一步探讨IL18促进RTECs转分化的细胞内通路。1材料和方法1.1材料人近端肾小管上皮细胞株（HK2）由上海第二医科大学瑞金医院肾科陈楠教授惠