微生物与发酵工程习题

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1、微生物和发酵工程重点习题讲解分析.1.不同的微生物有各自的代谢特点，人们常根据此来分离、鉴别微生物种类。某实验室有两个菌种，分别是胱氨酸依赖型细菌（无胱氨酸不能生长），甲基营养细菌只能利用甲醇、甲烷作碳源，但试管上标签脱落，请根据它们的代谢特点设计实验方案鉴别两管细菌，同时，证明胱氨酸是胱氨酸依赖型细菌必需的营养物质，甲醇或甲烷是甲基营养细菌必需的营养物质，并对实验结果作出分析：第一步：在两个菌种的试管上分别标上A、B请补充以下步骤。结果分析：解析：本题要求设计实验方案鉴别两管细菌，同时，证明胱氨酸是胱氨酸依赖型细菌必需的营养物质

2、，甲醇或甲烷是甲基营养细菌必需的营养物质，并对实验结果作出分析。明确实验目的后，再构思实验步骤。因为要证明胱氨酸是胱氨酸依赖型细菌必需的营养物质，甲醇或甲烷是甲基营养细菌必需的营养物质；所以必需设计对照实验。对照实验必需遵循的原则有：对照原则，等量原则，单因子变量原则，可重复可操作原则等。而对照的方法有：空白对照，条件对照，相互对照，自身对照等。本实验可设置“既不加胱氨酸又不加甲醇或甲烷”的空白对照组，分别与“只加胱氨酸”．“只加甲醇或甲烷”的实验组形成对照，从而得出结论。实验方案的设计要考虑全面，一些重要的步骤不能省略，如微生物

3、培养时，“灭菌”就是非常重要的步骤，因为接种前不进行灭菌，将得不到任何实验结果。本实验方案的设计容易出错，一是实验步骤的顺序错了，如写成先接种再配培养基。二是对培养基的表述不正确，写成只加胱氨酸，只加甲醇或甲烷，不要其他的营养物质。三是未写上“灭菌”，“在适宜条件下培养”等关键性步骤。参考答案：第二步：配制不含胱氨酸和甲基营养（甲醇和甲烷），但含有微生物所需的各种其他营养物质的普通培养基，分装到6支试管中，标上1．2．3．4．5．6，在1和2中加胱氨酸，3和4中加甲醇或甲烷，5和6中都不加，调节适宜的PH值，一起灭菌。第二步：将A

4、管菌接种于1．3．5号试管中，B管菌接种于2．4．6号试管中，适宜条件下培养数天。结果分析：因为1．3．5试管中，只有1号管加有胱氨酸，只有3号管加有甲醇或甲烷。因此，若只有1上有细菌生长，则A管菌为胱氨酸依赖型细菌；若只有3号上有细菌生长，则A管菌为甲基营养细菌。同理，2．4．6试管中，只有2号管加有胱氨酸，只有4号管加有甲醇或甲烷。因此，若只有2上有细菌生长，则B管菌为胱氨酸依赖型细菌；若只有4号上有细菌生长，则B管菌为甲基营养细菌2.某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起，请你设计一个实验。实验目的：分离

5、得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。（1）实验原理：（2）材料用具：（3）方法步骤：①配制A、B两种培养基：用于培养圆褐固氮菌的A培养基特点是，用于培养酵母菌B培养基特点添加了②调节培养基的PH值为；B培养基的PH值为③灭菌：在高压蒸汽灭菌前，必须要将灭菌锅中④搁置面：搁置的长度不超过试管的⑤接种：分别向A、B培养基中接种混和菌⑥培养。⑦生物用的圆褐固氮菌制成菌剂，施到土壤中，可以提高农作物的产量，这是由于解析：圆褐固氮菌能够进行生物固氮，可以在无氮培养基上生长；酵母菌可以在含有青霉素养的培养基上生长。无氮培养基，青霉素的培养基，6

6、.0~7.0，3.根据各类微生物的形态绘声结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂地一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来，下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行灭菌。再将上述微生物的混和液分别接种到各种培养基上进行培养。首先配制一系列的不同的固体培养基若干，然后进行灭菌，再把不同的菌种接种到不同的培养基上进行鉴别：第一步：第二步：第三步：第四步：答案：第一步：用无氮培养基分别培养5种

7、菌，能生长并繁殖形成菌落的是圆褐固氮菌第二步：用加青霉素的培养基分别培养余下的4种菌，能生长并繁殖形成菌落的是青霉菌第三步：用加高浓度NaCl的培养基分别培养余下的三种菌，能生长并繁殖形成菌落的是金黄色葡萄球菌第四步：用加伊红—美蓝的培养基分别培养余下的二种菌，菌落颜色呈深紫色并带有金属光泽是大肠杆菌（以上步骤的顺序可交换，另外也可以根据菌落的颜色或代谢类型来鉴别）.4.请填写出下列培育方法（1）通过花药离体培养再用秋水仙素加倍得到烟草新品种的方法（2）用60CO辐射谷氨酸棒状杆菌，选育出合成谷氨酸的新菌种，所用的方法（3）用小麦

8、和黑麦培育八倍体小黑麦的方法（4）将白菜与甘蓝的体细胞用酶处理，再用聚乙二醇使其融合，通过组织培养获得新的植物品种，这种方法是（5）将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花受精卵中，培育出的抗虫棉的方法（6）生产“人工种子”采用的方法是（7）最近国外市场