一、重要植物病原物分子检测技术、种类鉴定及其

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1、一、项目名称：重要植物病原物分子检测技术、种类鉴定及其在口岸检疫中应用二、推荐单位：浙江省科学技术厅三、项目简介：外来病原生物入侵对我国农林业生产造成了巨大威胁，本项目针对我国植物病原物检测先进技术缺乏，普遍存在“检测难、鉴定难、防控难、标准缺”的问题开展了系统研究，取得以下创新成果。1.建立了重要植物病原物分子检测技术首创了基于科属特异性简并引物的马铃薯Y病毒科、马铃薯X病毒属、麝香石竹潜隐病毒属和葱X病毒属成员RT-PCR检测和基因组全序列扩增技术，建立了16种高风险病毒和8种高风险真菌的基于PCR原

2、理的检测方法，完善了伞滑刃属线虫的ITS-RFLP鉴定方法，创建了伞滑刃属线虫分组鉴定方法和分组及各组分种检索表，建立了单条线虫DNA提取新方法以及松材线虫R型和M型株系区分方法。2.系统鉴定、命名、截获了一大批重要植物病原物从全国18个省44种作物和6种进口植物种苗中鉴定了59种植物病毒，其中上述4科（属）新种9种（占全球同期鉴定的新种14%），中国新纪录种11种，更正命名6种。测定26种病毒基因组全序列，其中19种为首次测定，20种被NCBI认定为相关病毒的参考序列，占同期认定的同科（属）病毒参考序列

3、总数24%。口岸截获鉴定线虫新种25种，更正命名2种，其中鉴定伞滑刃属线虫新种16种，测定新序列59条，占全球鉴定的该属新种（31种）和测定新序列的50%以上。首次研究了葱X病毒属分类标准，发现明确了一些植物病毒基因组分子特征。3.建立了高风险种苗中线虫的检疫处理技术综合应用物理和化学防治技术，明确了进出境种苗中线虫检疫处理的药剂种类、剂量、处理时间和温度等技术参数，建立了安全、高效、成本低廉的检疫处理技术。4．应用情况国家质检总局根据本项目研究成果发布警示通报7次，执行境外谈判和预检7次。本项目先后承担

4、全国检验检疫系统和国家认监委培训班12次，共培训1226人次。建立的技术在全国检验检疫系统广泛应用，近3年59个应用单位共截获检疫性植物病原物53种1466批次，节约了取样费、试剂费、货柜和船舶滞港费累计2.37亿元，缩短了检测周期，提高了种苗成活率和价值。本项目发表论文101篇，其中SCI收录45篇，已被他引592次，出版专著2部，授权国家发明专利10项，制订国家标准8项、行业标准9项，获得省科学技术奖一等奖2项。本项目的意义不仅在于建立的植物病原物分子检测技术具有重要实用价值，成为我国外来植物病原物检

5、疫检验或早期预警的核心技术和国家标准，改变了我国检疫检验领域缺少自主检测技术的被动局面，而且已被我国检疫检验部门广泛应用，截获了大量外来检疫性植物病原物，为维护国家生物安全做出了重要贡献。同时发现鉴定了一大批植物病毒、线虫新种，明确了其基因组特征，发表的论文已被国内外同行大量引用，并得到国际组织和同行高度评价，丰富了植物病原学理论，对国际植物病原学发展起到了引领作用，处于国际领先水平。四、主要完成人及技术贡献陈剑平：排名第1，浙江省农业科学院，研究员，项目主持人，提出学术思想并争取立项，制定该项目的研究目

6、标和总体技术方案，组织项目实施，提供学术和技术指导，完成项目总结。合作出版专著1部、发表论文50篇，其中通讯作者49篇，SCI收录27篇，完成成果总结。曾获：“大麦和性花叶病毒在其禾谷多黏菌介体内的发现和增殖的研究”1995年国家科技进步奖一等奖；“我国大麦黄花叶病毒株系鉴定、抗源筛选、抗病品种应用及其分子生物学研究”2001年国家科技进步奖二等奖；“我国水稻黑条矮缩病和玉米粗缩病病原、发生规律及其持续控制技术”2004年国家科技进步奖二等奖；“禾谷多黏菌及其传播的小麦病毒种类、发生规律和综合防治技术应用

7、”2005年国家科技进步二等奖。均为第一完成人。陈炯：排名第2，宁波大学，研究员，建立植物病毒检测和基因组扩增技术，完成大部分病毒种类鉴定和基因组研究。合作出版专著1部、发表论文50篇，参与成果总结。曾获：“我国大麦黄花叶病毒株系鉴定、抗源鉴定、抗病品种应用及其分子生物学研究”2001年国家科技进步二等奖，排名第二。“禾谷多黏菌及其传播的小麦病毒种类、发病规律、抗源筛选及其分子生物学研究”2005年国家科技进步二等奖，排名第三。陈先锋：排名第3，宁波检验检疫科学技术研究院，高级农艺师，负责组织项目第二完成

8、单位宁波检验检疫科学技术研究院有关本项目研究工作，完成部分线虫、病毒、真菌种类鉴定工作，合作出版专著1部、发表论文22篇、专利3项、国家和行业标准15项，参与成果总结。顾建锋：排名第4，宁波检验检疫科学技术研究院，高级农艺师，完成线虫检测方法和种类鉴定工作，主编专著1部，合作发表论文37篇、专利2项、国家和行业标准5项，参与成果总结。段维军：排名第5，宁波检验检疫科学技术研究院，高级农艺师，完成真菌检测方法和种类鉴定工作，合作