海南黄灯笼辣椒小叶病病原物的分子鉴定.pdf

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1、热带作物学报2014，35(1)：142—146ChineseJournalofTropicalCrops海南黄灯笼辣椒小叶病病原物的分子鉴定郑文虎，一，车海彦，杨毅，曹学仁，罗大全中国热带农业科学院环境与植物保护研究所蠢海南薯省翥热雾带农业有害生物监测与控制重重壹点羹实篓验妻室海。南一海口5711012三亚出入境检验检疫局．海南三亚572000摘要采用分子生物学技术对田间疑似植原体侵染引起的小叶症状的黄灯笼辣椒样品进行检测．以明确其病原分类地位利用植原体通用引物对R16mF2／R16mR1和R16F2n／R

2、16R2．对上述黄灯笼辣椒叶片DNA进行巢式PCR扩增。结果表明：获得约1．2kh的特异片段，经序列测定、Blast同源性检索及进化树和iPhyClassifier分析．获得该特异片段长为1248bp，与植原体16SrⅡ组中的花生丛枝植原体(L33765)同源性最高，达99％．聚类在同一个进化枝上．相似性系数为1．00．归属于16SrlI—A亚组暂将其命名为黄灯笼辣椒小叶植原体(CapsicumchinenseJacquinlittle—leafdiseasephytoplasma，CcJLL)。关键词黄灯笼

3、辣椒小叶病；植原体；16SrDNA：分子鉴定中图分类号$432．1文献标识码AMolecularIdentificationofthePathogenofCapsicumcenseJacquinLittle-leafDiseaseinHainanZHENGWenhu一，CHEHaiyan，YANGYi，CAOXueren，LUODaquan1EnvironmentandPlantProtectionlnstitute，CATAS／KeyLaboratoryofIntegratedPestManagemento

4、nTropicalGrops，Min~tryofAgriculture，P．R．China／HainanKeyLaboratoryforMonitoringandControlofTropicalAgriculturdPests，H~kou，Hainan571101，China2SanyaEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau，Sanya，Hainan572000，ChinaAbstractInthepaper，toascertaintaxonomicstatusofp

5、athogen，CapsicumchinenseJacquinsampleswithlittleleafsymptomwhichweresuggestiveofphytoplasmainfection，weredetectedbymolecularbiology．PrimersR16mF2／R16mR1andR16F2n／R16R2wereusedtoamplifytheDNAsamplesfromsymptomsabovebynestedPCR．ThePCRproductsweresequencedandB

6、lastsearchinginGenBank．ThephylogenetictreeandiPhyClassifieranalysisofthe16SrDNAsequencesshowedthatthesequencesharedtheidentityof99％withthatfromPeanutwitches一broom(L33765)，andclusteredinthesameclade，withsimilaritycoeficientof1．00．Thephytoplasmabelongedto16Sr

7、II—Asubgroup，wastentativelynamedasCapsicumchinenseJacquinlittle—leafdiseasephytoplasma，CcJLL．KeywordsCapsicumchinenseJacquinlittleleafdisease；Phytoplasma；16SrDNA；Molecularidentificationdoi10．3969／j．issn．1000—2561．2014．01．024植原体(phytoplasITIa)是一类能引起植物病害的展．其分

8、类鉴定依据逐渐丰富起来Lee等f5】在重要病原物．已在1000余种罹病植物中检测到该2000年综合分析了植原体16SrRNA和核糖体蛋病原物．给世界各地的经济作物造成很大损失_ll。白基因的序列．形成了一个包括19个组和46个亚在中国．能够造成严重危害的植原体病害主要有枣组植原体种类的分类体系．为后来植原体的分类打疯病、泡桐丛枝病、槟榔黄化病等l2。由于植原下了基础．在植原体的分类上具有重要意义体不