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1、卵磷脂的提取及鉴定作者:未知来源:郑州轻工业学院时间:2006-9-23一、实验目的1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。卵磷脂被
2、碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共热,可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。三、仪器和试剂仪器小烧杯、试管。试剂1.鸡蛋黄2.红色石蕊试纸3.95%乙醇4.10%氢氧化钠溶液5.钼酸铵试剂将6g钼酸铵溶于15mL蒸馏水中,加入5mL浓氨水,另外将24mL浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中,两者混合静置一天后再用。6.丙酮7.乙醚8.3%溴的四氯化碳溶液9.硫酸
3、氢钾四、操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g蛋黄于小烧杯中,加入温热的95%乙醇30mL,边加边搅拌均匀,冷却后过滤。如滤液仍然混浊,可重新过滤直至完全透明。将滤液置于蒸发皿内,水浴锅中蒸干,所得干物即为卵磷脂。(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管,加入少许卵磷脂,再加入5mL乙醚,用玻棒搅动使卵磷脂溶解,逐滴加入丙酮3~5mL,观察实验现象。(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~5mL氢氧化钠溶液,放入水浴中加热15min,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味。将加热过的
4、溶液过滤,滤液供下面检验。2.不饱和性检验取干净试管一支,加入10滴上述滤液,再加入1~2滴3%溴的四氯化碳溶液,振摇试管,观察有何现象产生。3.磷酸的检验取干净试管一支,加入10滴上述滤液和5~10滴95%乙醇溶液,然后再加入5~10滴钼酸铵试剂,观察现象;最后将试管放入热水浴中加热5~10min,观察有何变化。4.甘油的检验取干净试管一支,加入少许卵磷脂和0.2g硫酸氢钾,用试管夹夹住并先在小火上略微加热,使卵磷脂和硫酸氢钾混熔,然后再集中加热,待有水蒸气放出时,嗅有何气味产生。卵磷脂 名称卵磷脂(lecithin)
5、 卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”,然而,真正了解卵磷脂的人却很少。1844年法国人Gohley从蛋黄中发现卵磷脂(蛋黄素),并以希腊文命名为Lecithos(卵磷脂),英文名为Lecithin,也自此揭开了其神秘的面纱。卵磷脂是生命的基础物质,人类生命自始至终都离不开它的滋养和保护。卵磷脂存在于每个细胞之中,更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官。 磷脂是一类含有磷元素的脂肪化合物,通常是卵磷脂(磷脂酰胆碱,简称PC)、脑磷脂(磷脂酰乙醇胺,简称PE)、肌醇磷脂(磷脂酰
6、肌醇,简称PI)、磷脂酸(简称PA)、丝氨酸磷脂(简称PS)等的混合物,其中最典型的是前三种。磷脂是一种成分复杂的甘油脂,水解后可以的到甘油、脂肪酸、磷酸、胆碱、胆胺、肌醇等化合物。一般大豆磷脂分子中的脂肪酸为软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和花生烯酸。 目前我们食用磷脂的主要来源是大豆磷脂和蛋黄磷脂,而这两种磷脂在本质上有什么区别呢?下面我们将会谈到。除此之外,牛奶、动物的脑、骨髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。卵磷脂在蛋黄、大豆、鱼头、芝麻、蘑菇、山药和黑木耳、谷类、小鱼、动物肝脏、鳗鱼、赤腹蛇、眼镜蛇
7、、红花籽油、玉米油、向日葵等食物中都有一定的含量,但营养及含量较完整的还是大豆、蛋黄和动物肝脏。卵磷脂在体内多与蛋白质结合,以脂肪蛋白质(脂蛋白)的形态存在着,所以卵磷脂是以丰富的姿态存在于自然界当中,如果能摄取足够种类的食物,就不必担心会有缺乏的问题,同时也不需要额外补充卵磷脂的营养品。 通常所说的磷脂泛指大豆磷脂,以大豆磷脂物为主体,并含有中性油和其他非磷脂成分,如色素、糖分、半乳糖苷、脑苷脂类。磷脂是一类脂的统称,含有多种含磷成分,大豆磷脂或称大豆卵磷脂含有卵磷脂、脑磷脂、心磷脂、磷脂酸(PA)、磷脂酰甘油(PG)、缩
8、醛磷脂、溶血磷脂等。其多种营养成分对人体均有很大的裨益,加上其成本价格的低廉。所以市场上销售的多为大豆卵磷脂。 说起蛋黄磷脂还有一段渊源。磷脂“Lecithin”一词源于希腊语的蛋黄“Lekithos”,1846年Gobley从蛋黄中分离出含磷脂肪物质,并命名为磷脂。蛋黄磷
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