欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:13040442
大小:115.55 KB
页数:8页
时间:2018-07-20
《蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、附件蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测(KJ201710)1 范围本方法规定了蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测方法。本方法适用于油菜、菠菜、芹菜、韭菜等蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速测定。酶抑制(率)法(分光光度法)2 原理在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率。3 试剂和材料除另有规
2、定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水。3.1 试剂3.1.1 丙酮(CH3COCH3)。3.1.2 磷酸氢二钾(K2HPO4)。3.1.3 磷酸二氢钾(KH2PO4)。3.1.4 5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(C14H8N2O8S2)。3.1.5 碳酸氢钠(NaHCO3)。3.1.6 碘化乙酰硫代胆碱( C7H16INOS)。3.1.7 pH8.0缓冲溶液:分别称取11.9g无水磷酸氢二钾及3.2g磷酸二氢钾,溶解于1000mL水中,混匀。3.1.8 显色剂:分别取160mg5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)和15.6mg
3、碳酸氢钠,用20mL缓冲溶液溶解,4℃冰箱中保存。3.1.9 底物:取125mg碘化乙酰硫代胆碱,加15mL蒸馏水溶解,摇匀后置于4℃冰箱中保存备用。保存期不超过两周。3.1.10 乙酰胆碱酯酶:4℃冰箱中保存备用。—8——1.1 参考物质3种有机磷和2种氨基甲酸酯类农药参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1,纯度均≥98%。表1有机磷和氨基甲酸酯类参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量序号中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量1克百威Carbofuran1563-66-2C12H15NO3221.252
4、灭多威Methomyl59669-26-0C5H10N2O2S162.233丙溴磷profenofos 41198-08-7C11H15BrClO3PS373.634敌敌畏Dichlorvos62-73-7C4H7Cl2O4P220.985敌百虫Dipterex52-68-6 C4H8Cl3O4P257.441.2 标准溶液的配制1.2.1 克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准储备液(1000μg/mL):冷藏、避光、干燥条件下保存。1.2.2 丙溴磷标准储备液(100μg/mL):冷藏、避光、干燥条件下保存。1.2.3 克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准中间液A(10
5、0μg/mL):精密移取上述标准储备液(1000μg/mL)(3.3.1)各1mL,分别置于10mL容量瓶中,用丙酮(3.1.1)稀释至刻度,摇匀,制成浓度为100 μg/mL的标准液A。1.2.4 克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫、丙溴磷标准中间液B(1μg/mL):精密移取标准中间液A(100μg/mL)(3.3.3)及丙溴磷标准储备液(100μg/mL)(3.3.2)各1mL,分别置于100mL容量瓶中,用缓冲溶液(3.1.7)稀释至刻度,摇匀,制成浓度为1 μg/mL的标准中间液B。2 仪器和设备2.1 恒温水浴锅。2.2 天平:感量为0.1g。2.3 分光光度
6、计或相应商品化测定仪。2.4 环境条件:温度15℃~35℃,湿度≤80%。3 分析步骤3.1 试样的提取3.1.1 整株提取法选取韭菜、芹菜有代表性的样品,擦去表面泥土,称取试样3g(精确至0.1g)置于表面皿中,加入10mL缓冲液(3.1.7),残缺面不得接触缓冲液,轻轻振摇50次,静置2min以上,取上清液—8——备用。1.1.1 整体测定法选取油菜、菠菜有代表性的样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,称取3g(精确至0.1g)放入离心管中,加入10mL缓冲溶液(3.1.7),振摇50次,静置2min以上,倒出提取液,静置3min~5min,待用。1.2 测
7、定步骤1.2.1 对照液的测定先于反应管中加入3mL缓冲溶液(3.1.7),再加入适量酶液、0.1mL显色剂,摇匀后于37℃水浴锅中放置15min。加入0.1mL底物摇匀,立即测定吸光度,3min后再测定一次,记录反应3min的吸光度值的变化∆A0。1.2.2 样品液的测定先于反应管中加入3mL提取液,其他操作与对照液操作(5.2.1)相同,记录反应3min的吸光度值的变化∆At。1.3 质控试验每次测定应同时进行空白试验和加标质控试验。1.3.1 空白试验称取空白试样,按照5.1和5.2步骤与样品同法操作。1.3.2 加标质控试验1.3.2.1 韭
此文档下载收益归作者所有