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时间:2018-07-16
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1、烟草农药残留快速检测技术研究进展与发展方向王全明821010950122010年5月19日摘要:本文综述了速测卡、薄层-酶抑制法、色-质联用、免疫分析和生物传感器等农药快速检测技术,并展望了这一领域的发展方向。关键词:农药残留;快速检测;进展;发展方向在最近的20~25年中,由于环境和食品中的农药残留导致的公共中毒事件屡屡发生,人们对于农药残留的担心与日剧增。烟草作为吸食品,其中的农药残留问题同样引起世界各国的重视。烟草是我国重要的经济作物,目前其病虫害的防治以化学防治为主,而长期使用化学农药就会使病原物的抗药性增加,
2、从而导致化学药剂更大量地使用。这就会造成烟叶中农药残留的增加,致使烟叶农药残留超标,从而成为我国烟草生产贸易中的一个难题。传统的农业残留检测技术技术复杂,花费时间长并且成本高昂,推广起来有很大困难,而快速检测技术简单快速,灵敏度高,特异性强,样品所需量少并且成本低,推广起来有很大优势。为保障人民的身体健康、有效控制农药在烟叶生产中的使用,体现中式烟叶原料的安全性和可用性,就必须认清我国烟草农药残留速测技术研究的现状和发展方向。1.我国烟草农药残留快速检测技术目前,我国烟草农药残留快速检测技术大多是根据有机磷、氨基甲酸酯
3、类农药的毒力,即主要是通过抑制动物神经系统胆碱酯酶活性,造成神经传导介质—乙酰胆碱积累,影响神经正常传导,使动物中毒致死的原理设计而成。其主要方法如下:1.1速测卡法农药速测卡中含有白色和红色两种药片。白色药片中含有胆碱酯酶,它是一种由蛋白质分子构成的生物催化剂,主要分布于动物体神经传导组织,专门催化神经传导介质乙酰胆碱的水解反应。红色药片中含有乙酰胆碱类似物靛酚乙酸酯(红色),靛酚乙酸酯在胆碱酯酶的催化下迅速发生水解反应,生成靛酚(蓝色)和乙酸。有机磷易水解,农药速测卡就是利用有机磷这一特性来检测农药残留量的。只要有
4、微量有机磷存在,就能强烈地抑制蓝色产物的产生,靠肉眼就可从蓝色的深浅来判断农药的残留。对呈阳性结果的样品,可用其它分析方法进一步确定具体农药品种和含量[1-2]。1.2薄层—酶抑制法将农药放在薄层板上展开后,喷酶液,农药抑制斑点上酶活性,而其它部分不被抑制,可以使基质水解,水解产物与显色剂染料发生特定反应,形成某一特定颜色,与农药斑点颜色区分开来。根据检出样品斑点的大小、清晰度与农药标准斑点比较,进行定性分析与概略定量分析。薄层—酶抑制法可采用酶源。植物酶源如面粉酶、玉米面酶、大米(或小米)酶液;动物酶源如马血清、牛肝
5、、蜂脑等。基质通常用乙酸,呈色剂常用蓝光重氮色盐蓝(又称牢固蓝染料)[3-5]。薄层—酶抑制法结合了薄层色谱法和酶抑制方法,对有机磷农药测定灵敏度高、适用性广,同时对样品净化要求不高,与气相色谱法相比,具有技术更容易掌握,不需要贵重仪器等优点,但影响因素很多,如酶液种类、酶液喷洒浓度、显色剂种类等等,使得此法重现性差,所以,采用薄层—酶抑制法时仅能概略定量。1.3色—质联用色—质联用作为一种发展相对成熟的检测手段,在国外的一些报道中,也笼统地将其划为残留速测技术当中的一种手段,它尤其适合于多残留分析。质谱法的优点是,能
6、在多种残留物同时存在的情况下对其进行定性定量分析,仅用气相色谱法检测需要多个检测器,而色—质联用一般只需1次提取和1次GC—MS检测即可。色—质联用法包括气相色谱—质谱联用(GC—MS)和液相色谱—质谱联用技术(LC—MS)。(1)气相色谱—质谱联用技术[6-7]:用气相色谱—质谱联用来检测水果和蔬菜中的邻苯基苯酚、二苯胺及克期特等。其残留用乙脂提取,再转移至丙酮中,邻苯基苯酚、二苯胺回收率比较高。该法可用来检测土壤中的痕量农药,适合于研究污染源在环境中的行为。气相色谱—化学电离质谱法可用来分析水果和蔬菜上多种致癌农药
7、的残留量,如高灭磷、丁草胺、谷硫磷、敌菌丹、克菌丹、杀虫腺、百菌清、禾草灵、烯氟乐灵、异丙甲草胺、恶草灵等。(2)液相色谱—质谱联用技术:大部分农药可用GC—MS检测,但对极性或热不稳定性太强的农药(及其代谢物)不适用(如灭菌丹、利谷险、黄草消等),可采用高效液相色谱—质谱来检测[8]。据统计,液相色谱可以分析的物质约占世界上已知化合物的80%以上,内喷射式和粒子流式接口技术可将液相色谱与质谱连接起来,已成功用于分析一些对热不稳定、分子量较大、难以用气相色谱分析的化合物;且具有检测灵敏度高、选择性好、定性定量同时进行、
8、结果可靠等特点。1.4免疫分析法免疫分析法是将免疫反应与现代测试手段相结合而建立的超微量测定技术。免疫是机体识别和排除进入体内的抗原性异物的保护性应答反应。近年来,免疫分析法尤其是酶免疫分析的研究十分活跃,应用领域也取得了较大的扩展[9]。免疫分析法(IA)被称为使用抗体作为“生物化学检测器”的分析技术,是基于抗原抗体特异性识别和
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