农药残留速测卡蔬菜、水果中农药残留速测技术.doc

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1、蔬菜、水果中农药残留速测技术果蔬农残速测卡果蔬农残检测卡农药残留速测卡对蔬菜、水果中农药残留速测技术的发展具有重要意义。一、蔬菜、水果中农药残留速测原理及特点(一)蔬菜、水果中用于快速检测的农药有两类一是有机磷类农药,有甲拌磷(3911)、对硫磷(1605)、甲胺磷等;二是氨基甲酸脂类农药,有呋喃丹、抗蚜威、西维因等。有机磷类农药和氨基甲酸脂类农药在我国使用比较广泛,这类农药中有不少为高残留、高毒农药。有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法,不受时间、地点、场合等条件限制,甚至普通消费者也能够操作使用,有利于及时发现问题、采取措施,控制高残留

2、农药蔬菜的摄入,降低农药中毒发生率,保障消费者食菜安全。(二)蔬菜、水果中农药残留速测原理有机磷和氨基甲酸酯类农药残留可以和人体内神经传导物质—胆碱脂酶相结合,即抑制酶的生理活性,引起神经传导过程受到阻碍,出现中毒症状,轻则引起慢性头疼、记忆力减退等症状,重则导致呼吸困难,甚至死亡。蔬菜中农药残留快速检测是基于“在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关”这一原理,提取制备了胆碱脂酶作为检测试剂,根据酶的活性变化程度来测定蔬菜中残留的农药。正常情况下,胆碱酯酶(酶)催化乙酰胆碱(底物)水解

3、,其水解产物(胆碱)与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。基本的化学反应式:酶(胆碱酯酶)+底物(乙酰胆碱)→中间产物(胆碱)中间产物(胆碱)+显色试剂→黄色物质基本检验机理抑制率﹤50%,没有或少部分活性被抑制,合格显色剂溶液呈黄色大量中间产物显色剂抑制率≧50%,大部分活性部分被抑制,不合格酶+样本+底物溶液呈淡黄色少量中间产物显色剂抑制率100%,无活性或严重超标,不合格溶液呈无色无中间产物抑制率的概念抑制率指的

4、是农药对酶抑制程度的指标。其计算公式为:I=(A0-At)/A0*100%I为抑制率A0为3分钟对照溶液吸光度的变化At为3分钟样品溶液吸光度的变化二、速测仪检测原理、结构前面介绍过,农药残留速测是在412nm处测定反应产物吸光度随时间的变化值,因此农残速测仪即是分光光度计的一种新的形式。(一)农残速测仪基本原理光源发出的光经过单色器时被变成平行的单色光,当单色光通过均匀的溶液时,光的一部分被溶液吸收,在吸收层厚度(比色皿)一定时,光的吸收于溶液的浓度成正比。仪器检测器将光的变化信号转化为电信号变化,经过仪器测量系统处理,检测结果显示在屏幕上

5、。(二)农残速测仪结构可见吸光光度计是利用物质本身对可见光的选择性吸收进行测定的。分光光度计的基本部件有:光源、单色器、吸收池(比色皿)、检测器和显示装置。吸收池单色器光源检测器测量装置A、光源分光光度计常用钨灯作为光源,波长为320-2500nm。B、单色器单色器是将光源发射的复合光分解为单色光的光学装置。C、吸收池也叫比色皿,是盛放样品溶液的容器,一般为1厘米厚。D、检测器是一种光电转换设备,它将光强度转变为电信号显示出来。E、测量系统包括放大器和结果显示装置,它可以将结果进行处理,并显示在屏幕上,或者打印出来。三、速测仪的使用方法及注意

6、事项(一)试剂的配制1、提取液:将提取液粉剂置于500ml瓶中,加入510ml蒸馏水摇匀溶解备用。可在常温下保存。2、酶液:每瓶酶粉剂加入3.1ml提取液,摇匀后4℃冰箱中保存备用。配制好的酶液在4℃可保存6天。3、底物:每瓶底物粉剂加入3.1ml蒸馏水,摇匀后4℃冰箱中保存备用。配制好的底物在4℃可保存6天。4、显色剂:将显色剂粉剂倒入棕色瓶中,加入32ml提取液摇匀后4℃冰箱中保存(二)试剂保存的注意事项1、酶的保存:粉状的酶应储藏在冷冻室(约0~-8℃),使用时用提取试剂溶解,溶解后的酶液分成小瓶。暂时不用的储存在冷冻室内,用时解冻;用

7、后的酶液储存在冷藏室(0~5℃)内,在1周内用完。酶液反复解冻最多不超过两次,否则会影响酶活性。2、底物和显色剂保存:固体保存在冷冻室(约0~-8℃),溶解后的底物和显色剂应保存在冰箱的冷藏室内(0~5℃)。3、提取试剂的保存:固体及溶解后的提取试剂只需在常温下保存。(三)仪器使用步骤仪器调零开机预热仪器调100做对照样品检测(四)仪器调零、调100A、仪器调零打开仪器后,进入仪器调零界面,将仪器所配的挡光黑块放入检测通道,盖好盖板,按下仪器调零确认键,待出现0.00后,即可完成调零。B、仪器调100取出挡光黑块,确认各光路中没有挡光物质后,

8、盖好盖板,按下仪器调100确认键,待出现99.9后,即可完成调100。注意:一般应先调零,后调100。(五)样品处理及检测1、样品采集后,后应尽快进行检测,选取表面

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