甲基对硫磷和毒死蜱对中肋骨条藻的联合毒性效应论文

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1、甲基对硫磷和毒死蜱对中肋骨条藻的联合毒性效应论文【摘要】采用水生毒理联合效应相加指数法，比较了有机磷农药甲基对硫磷和毒死蜱的单剂和混合剂对中肋骨条藻的急性毒性和联合毒性。结果表明:两种有机磷对中肋骨条藻的毒性大小为：毒死蜱甲基对硫磷；两种有机磷混合溶液对中肋骨条藻的联合毒性96h内均为协同效应。【关键词】甲基对硫磷；毒死蜱；中肋骨条藻；联合毒性Studyonthejointtoxicityofmethylparathionandchlorpyrifosforskeletonemacostatum(Grev.)Cleve【Abst

2、ract】Usingtheadditionmethodofindexinaquatictoxicity,paredtheacuteandjointtoxicityofmethylparathionandchlorpyrifos(singleorplex)toSkeletonemacostatum(Grev.)Cleve.Theresultsshoecroalgaeisintheorderofchlorpyrifosmethylparathion,andthetontheirjointtoxicityin96hrstoSkeleto

3、nemacostatum(Grev.)Cleve.【Keyethylparathion;chlorpyrifos;skeletonemacostatum;jointtoxicaction具有杀虫力强、适用范围广等特点的有机磷农药，在农业病虫害防治上起到了重要作用，但也不可避免地污染了周围环境，危害非靶生物。农药对海洋的污染，主要是通过施用时散落在田间的农药，随雨水等冲刷或工厂的“三废”排放造成的。这不可避免地对海洋生物造成危害。海洋微藻是近岸海域的初级生产者，是鱼、虾、贝的主要饵料生物.freelethylparathion）1实

4、验材料1.1试剂甲基对硫磷［国家农药质检中心（沈阳），纯度≥99.1%］；毒死蜱［国家农药质检中心（沈阳），纯度≥99.3%］。甲基对硫磷和毒死蜱分别用丙酮配制成1000mg/L的标准贮备液，置于4℃冰箱中保存。其他试剂包括丙酮、NaNO3、NaH2PO4·H2O、Na2SiO3·9H2O、FeCl3·6H2O、Na2EDTA·2H2O、CuSO4·5H2O、Na2MoO4·2H2O、ZnSO4·7H2O、CoCl2·6H2O、MnCl2·4H2O、VitaminB12、Biotin、Thiamine·HCl均为分析纯（上海化学试

5、剂公司）。实验用水为用MilliporeMilli-Q50（MilliporeCorp.,A,USA）新鲜制备的去离子水（18MΩ）；海水采自青岛石老人近岸，经0.45μm玻璃纤维滤膜过滤，高温灭菌。1.2仪器设备HitachF-4500荧光分光光度计（日本岛津公司）；磁力搅拌器（常州国华电器有限公司）；EZ-DryKiic冷冻干燥机（美国）；AJ100型电子天平（Mettler-Toledo公司，瑞士）；Milli-Q50超纯水处理系统（Millipore公司，美国）；TOMYAutoclaveSS-325高压灭菌锅（TOMY公

6、司，日本）；LRH-250G光照培养箱（广州医疗器械厂）；NikonAlphaphotYS型显微镜（Nikon，日本）。2实验方法2.1藻类的培养及有机磷的投加中肋骨条藻(Skeletonemacostatum(Grev.)Cleve)由中科院海洋所微藻室提供，培养温度为（25±1）℃，光强3500Lux，光暗周期昼/夜为12h∶12h，培养液为f/2培养液，所用海水取自青岛近岸石老人的天然海水，经孔径0.45μm的玻璃纤维滤膜过滤，煮沸消毒。实验使用250ml的三角瓶，实验体积200ml，每处理组3个平行样。接种前，先加入相应实

7、验浓度的有机磷标液，平衡24h，以消除器壁对有机磷的吸附。接种后，立即取样，分别进行荧光光度法和气相色谱法的测试，以后每隔24h取样。在培养期间经常摇动三角瓶，实验重复3次。实验所用器械均经高压蒸锅灭菌。2.2藻类生物量的测定2.2.1藻细胞浓度-藻液荧光光度标准曲线取高浓度的藻液，用超纯水按浓度减半的原则稀释成一定的浓度梯度，每份样品分别用血球计数板计数和进行荧光测试，根据实验结果，绘制相应的对照曲线。2.2.2血球计数板法藻细胞密度的测定，以Lugol碘液固定样品，显微镜下血球计数板计数，每个样品重复3次。2.2.3荧光光度法

8、在激发波长466nm时，扫描600～730nm范围，以679nm处发射峰进行定量分析。2.2.4荧光光度法与细胞计数法实验结果对照接种当天测定藻液在679nm处的发射峰高度，然后每隔24h测定一次，从藻细胞浓度-藻液荧光光度标准曲线查出对应的藻细胞