甲基对硫磷和毒死蜱对中肋骨条藻的联合毒性效应

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1、甲基对硫磷和毒死蜱对中肋骨条藻的联合毒性效应【摘要】采用水生毒理联合效应相加指数法，比较了有机磷农药甲基对硫磷和毒死蜱的单剂和混合剂对中肋骨条藻的急性毒性和联合毒性。结果表明:两种有机磷对中肋骨条藻的毒性大小为：毒死蜱>甲基对硫磷；两种有机磷混合溶液对中肋骨条藻的联合毒性96h内均为协同效应。　　【关键词】甲基对硫磷；毒死蜱；中肋骨条藻；联合毒性　　Studyonthejointtoxicityofmethylparathionandchlorpyrifosforskeletonemacostatum(Grev.)Cl

2、eve　　【Abstract】Usingtheadditionmethodofindexinaquatictoxicity,paredtheacuteandjointtoxicityofmethylparathionandchlorpyrifos(singleorplex)toSkeletonemacostatum(Grev.)Cleve.Theresultsshoecroalgaeisintheorderofchlorpyrifos>methylparathion,andthetonthEirjointtoxicity

3、in96hrstoSkeletonemacostatum(Grev.)Cleve.　　【Keyethylparathion;chlorpyrifos;skeletonemacostatum;jointtoxicaction　　具有杀虫力强、适用范围广等特点的有机磷农药，在农业病虫害防治上起到了重要作用，但也不可避免地污染了周围环境，危害非靶生物。农药对海洋的污染，主要是通过施用时散落在田间的农药，随雨水等冲刷或工厂的“三废”排放造成的。这不可避免地对海洋生物造成危害。海洋微藻是近岸海域的初级生产者，是鱼、虾、贝的主要饵料生物，

4、因此，开展有机磷农药对海洋微藻的毒性研究工作，对探讨有机磷农药污染对近岸海域初级生产力的影响具有重要意义。为此，国内外开展了大量的研究工作。中肋骨条藻属硅藻类，是渤海、黄海的优势藻种［1］，可作为饵料藻，已被证实是引发赤潮的主要藻种之一。甲基对硫磷和毒死蜱是我国北方沿海地区曾经或正在大量使用的有机磷农药，它们的分子结构式如图1所示。有关甲基对硫磷和毒死蜱对中肋骨条藻毒性效应的研究均未见报道。本文以中肋骨条藻以及甲基对硫磷和毒死蜱为研究对象，较为系统的研究了有机磷农药对海洋微藻的毒性效应。　　在联合毒性的评价和危险评价中，汝少国

5、［2］等认为采用48h或72h的EC50值较为客观。这是因为，有机磷农药的EC50随培养时间、pH、实验条件等变化很大。一方面，随处理时间的延长，藻体繁殖增快，自身产生生物稀释效应［3］；另一方面，有机磷农药遇水易分解［4,5］，生成的降解产物对藻的毒性有较大变化。本文利用荧光光度仪测定微藻生长的方法，研究了有机磷对微藻的毒理效应；采用72h-EC50作为评价指标。　　图1有机磷的分子结构式（略）　　Figure1MolecularstructureofOrganophosphoruspesticides　　(a)毒死蜱(ch

6、lorpyrifos)(b)甲基对硫磷（methylparathion）　　1实验材料　　1.1试剂甲基对硫磷［国家农药质检中心（沈阳），纯度≥99.1%］；毒死蜱［国家农药质检中心（沈阳），纯度≥99.3%］。甲基对硫磷和毒死蜱分别用丙酮配制成1000mg/L的标准贮备液，置于4℃冰箱中保存。　　其他试剂包括丙酮、NaNO3、NaH2PO4·H2O、Na2SiO3·9H2O、FeCl3·6H2O、Na2EDTA·2H2O、CuSO4·5H2O、Na2MoO4·2H2O、ZnSO4·7H2O、CoCl2·6H2O、MnCl2·

7、4H2O、VitaminB12、Biotin、Thiamine·HCl均为分析纯（上海化学试剂公司）。　　　　实验用水为用MilliporeMilli-Q50（MilliporeCorp.,A,USA）新鲜制备的去离子水（18MΩ）；海水采自青岛石老人近岸，经0.45μm玻璃纤维滤膜过滤，高温灭菌。　　1.2仪器设备HitachF-4500荧光分光光度计（日本岛津公司）；磁力搅拌器（常州国华电器有限公司）；EZ-DryKiic冷冻干燥机（美国）；AJ100型电子天平（Mettler-Toledo公司，瑞士）；Milli-Q50

8、超纯水处理系统（Millipore公司，美国）；TOMYAutoclaveSS-325高压灭菌锅（TOMY公司，日本）；LRH-250G光照培养箱（广州医疗器械厂）；NikonAlphaphotYS型显微镜（Nikon，日本）。　　2实验方法　　2.1藻类的培养及有机磷的投加