中药壁虎抗肿瘤作用的实验研究论文

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1、中药壁虎抗肿瘤作用的实验研究论文刘菲,王建刚,席守民,马晓娟【摘要】目的探讨中药壁虎抗肿瘤作用及其作用机制。方法建立移植瘤小鼠S180肉瘤模型,将50只雌鼠随机分为对照组、环磷酰胺组、壁虎高组、中组、低组共5组,分别给于生理盐水灌胃1次/d,CTX(100mg/kg)腹腔注射1次,壁虎高、中、低组(13.5,9.freeloractionofGeckoanditsmechanism.MethodsThetransplantedtumormodelofthemouseS180saraicelydividedintofivegroup

2、s,thecontrolgroup,theCTXgroup,theGeckogroup(highdose,middledose,loinistrationofsaline,andintraperitonealinjectionofCTX100mg/kgonlyonetime,oraladministrationofGeckoindosesof13.5,9,4.5g/kg,onetimeaday.After14days,theanti-tumoractivityortissuepactonimmuneorganusindex,spl

3、eenindexandthenumberofperitonealmacrophagemunohistochemistry.Thecellapoptoticrateethod.ResultsChinesemedicineGeckocouldobviouslyinhibitS180saraofmice,.freelpactonimmuneorgan.ItcouldreduceVEGFandbFGFproteinexpressionintumortissueandinducetumorcellapoptosis.ConclusionCh

4、inesemedicineGeckohasanti-tumoractivityanditsmechanismmightberelatedtoinductionoftumorcellapoptosisandthedoedicineGecko;S180saraofmouse;Vascularendothelingrol,24h后将小鼠随机分成生理盐水对照组、CTX组、中药壁虎高(13.5g/kg)、中(9g/kg)、低(4.5g/kg)3个剂量组共5组,每组各10只,每日小鼠称重后,阴性对照组根据体重按0.2ml/10g用生理盐水灌胃

5、1次,环磷酰胺(CTX)按100mg/kg第1天腹腔注射1次,壁虎组用0.2%羧甲基纤维素稀释至高(0.675g/ml)、中(0.45g/ml)、低(0.225g/ml)浓度混悬液,按0.2ml/10g根据体重每天灌胃一次,共14d。14d后小鼠称重,眼眶取血计数白细胞数,脱臼处死取瘤块称重。肿瘤抑瘤率=(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100%[2]1.2.2中药壁虎对荷瘤小鼠免疫功能的影响按上述方法对小鼠S180移植瘤的抑制作用观察14d后,处死动物取胸腺、脾脏称重。胸腺指数=胸腺重/体重,脾脏指数=脾脏重/

6、体重[3];观察荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响[4],对小鼠S180移植瘤的抑制作用观察第14天,用药后2h每鼠腹腔注射5%鸡红细胞0.4ml,12h后处死动物消毒腹部,剪开皮肤,经腹腔注入生理盐水2ml,转动固定板1min,然后抽取腹腔液1ml滴涂于干净载玻片,置于37度的孵箱中温育30min,以丙酮-甲醇液(1∶1)固定5min,再用4%姬姆萨瑞特氏液染色5min,用蒸馏水漂洗晾干。在油镜下计数200个巨噬细胞中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数及每个巨噬细胞中被吞噬的红细胞数,按下公式计算:吞噬百分率(%)=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/

7、200个巨噬细胞×100%吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数/200个巨噬细胞1.2.3小鼠S180肉瘤组织病理学变化肿瘤组织用10%中性甲醛固定,石蜡包埋切片,常规HE染色,光镜观察肉瘤组织病理变化。1.2.4VEGF,bFGF蛋白表达的检测用SABC免疫组化法,操作步骤按照试剂盒说明书进行。苏木素复染细胞核,将已知的阳性切片作阳性对照,以PBS代替一抗作为阴性对照,VEGF及bFGF判定与分析:凡细胞浆、细胞膜出现棕黄色颗粒或均质样棕黄色结构者为VEGF或bFGF免疫反应阳性细胞。免疫组化染色评分按Rahman等[5]的方法进行,

8、评分标准是:根据着色细胞的比例(染色范围)及染色强度,染色范围(阳性细胞比率)分为0~4级,阴性为0分;阳性细胞1%~25%为1分;25%~50%为2分;51%~75%为3分;76%~100%为4分。染色强度划分为0~3级,阴性为0分;弱阳性为1分

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