外周血单个核细胞甲胎蛋白mrna表达与肝癌的研究

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1、外周血单个核细胞甲胎蛋白mRNA表达与肝癌的研究肿瘤1999年第6期第19卷论著作者:罗 伟 王 红 王 强 矢野右人单位:罗伟 王红 王强 上海第二医科大学医学检验实验室(上海200023);矢野右人 日本国立长崎中央病院临床研究部关键词:甲胎蛋白;肝肿瘤/诊断;外周血单个核细胞;肿瘤转移/诊断  中图分类号:R735.7   文章标识码:A   文章编号:1000-7431(1999)06-0323-04  摘要:目的 应用RT-PCR技术研究原发性肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)甲胎蛋白(AFP)

2、mRNA表达与肝癌转移的关系。方法 原发性肝癌48例。慢性肝病患者21例。正常对照20例。采外周血,肝素抗凝,分离单个核细胞及分离总RNA。逆转录酶合成cDNA。设计扩增AFP基因的引物,进行巢式PCR扩增。结果 正常人PBMC均无AFPmRNA表达。原发性肝癌患者的PBMCAFPmRNA阳性率(28/48,58.33%)明显高于慢性肝病组(3/21,14.28%,P<0.01)。伴远处转移的原发性肝癌患者全部为阳性(8/8)。结论 RT-PCR检测原发性肝癌患者AFPmRNA有可能成为反映肝癌细胞血行播散

3、的指标。EXPRESSIONOFAFPmRNAINPERIPHERALBLOODCELLSOFPATIENTSWITHHEPATOCELLULARCARCINOMALUOWei1,WANGHong1,WANGQiang1,etal.(1LaboratoryofMedicalTechnology,ShanghaiSecondMedicalUniversity,Shanghai200023,China;2ClinicalResearchBranch,NationalNagasakiCentralHospital

4、,Japan)  Abstract:Objective Anestedreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT-PCR)wasdevelopedtostudytherelationshipbetweenexpressionofAFPmRNAinperipheralbloodmononuclearcellsandmetastasisinpatientswithhepatocellularcarcinoma(HCC).MethodsHeparinizedblo

5、odsampleswereobtainedfrom48patientswithHCC,21patientswithchronicliverdiseasesand20normalsubjects.Mononuclearcellswereseparatedfromblood.TotalRNAwasextractedbytheacid-guanidium-phenol-chloroformmethod.ThefirststrandofcDNAwassynthesizedfromanaliquotoftheRNAu

6、singMoloneymurineleukemiavirusreversetranscriptaseandrandomhexamers.ThetwopairsofprimerschosenfromthesequencesofAFPwereusedforthetwo-stepPCR.ResultsAFPmRNAinperipheralbloodcellswasnotdetectedinallnormalsubjects,butitwasdetectein28of48(58.33%)caseswithHCCan

7、dinall8patientswithextrahepaticmetastasis.ThepositiverateinpatientswithHCCwassignificantlyhigherthanthecaseswithchronicliverdiseases(3/21,14.28%,P<0.01).ConclusionsThedetectionofAFPmRNAinperipheralbloodcellsmaybehelpfulforclinialdetectionofmetastasisofHCC.

8、  Keywords:α-fetoprotein;Liverneoplasms/diagnosis;Peripheralbloodmononuclearcells;Neoplasmmetastasis/diagnosis  血行转移是恶性肿瘤常见的病理特征,肿瘤的血行播散是转移发生的重要条件,及时发现血流中的肿瘤细胞对于治疗方案的选择,预后的判断,疗效观察有重要价值。  近来有文献报道用肿瘤特异基因反映血流中肿瘤

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