外周血单个核细胞甲胎蛋白mrna表达与肝癌的研究

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1、外周血单个核细胞甲胎蛋白mRNA表达与肝癌的研究肿瘤1999年第6期第19卷论著作者：罗　伟　王　红　王　强　矢野右人单位：罗伟　王红　王强　上海第二医科大学医学检验实验室(上海200023)；矢野右人　日本国立长崎中央病院临床研究部关键词：甲胎蛋白；肝肿瘤/诊断；外周血单个核细胞；肿瘤转移/诊断　　中图分类号：R735.7　　　文章标识码：A　　　文章编号：1000-7431(1999)06-0323-04　　摘要：目的　应用RT-PCR技术研究原发性肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)甲胎蛋白(AFP)

2、mRNA表达与肝癌转移的关系。方法　原发性肝癌48例。慢性肝病患者21例。正常对照20例。采外周血，肝素抗凝，分离单个核细胞及分离总RNA。逆转录酶合成cDNA。设计扩增AFP基因的引物，进行巢式PCR扩增。结果　正常人PBMC均无AFPmRNA表达。原发性肝癌患者的PBMCAFPmRNA阳性率(28/48，58.33%)明显高于慢性肝病组(3/21，14.28%，P＜0.01)。伴远处转移的原发性肝癌患者全部为阳性(8/8)。结论　RT-PCR检测原发性肝癌患者AFPmRNA有可能成为反映肝癌细胞血行播散

3、的指标。EXPRESSIONOFAFPmRNAINPERIPHERALBLOODCELLSOFPATIENTSWITHHEPATOCELLULARCARCINOMALUOWei1，WANGHong1,WANGQiang1,etal.(1LaboratoryofMedicalTechnology,ShanghaiSecondMedicalUniversity,Shanghai200023,China；2ClinicalResearchBranch,NationalNagasakiCentralHospital

4、,Japan)　　Abstract：Objective　Anestedreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT-PCR)wasdevelopedtostudytherelationshipbetweenexpressionofAFPmRNAinperipheralbloodmononuclearcellsandmetastasisinpatientswithhepatocellularcarcinoma(HCC).MethodsHeparinizedblo

5、odsampleswereobtainedfrom48patientswithHCC,21patientswithchronicliverdiseasesand20normalsubjects.Mononuclearcellswereseparatedfromblood.TotalRNAwasextractedbytheacid-guanidium-phenol-chloroformmethod.ThefirststrandofcDNAwassynthesizedfromanaliquotoftheRNAu

6、singMoloneymurineleukemiavirusreversetranscriptaseandrandomhexamers.ThetwopairsofprimerschosenfromthesequencesofAFPwereusedforthetwo-stepPCR.ResultsAFPmRNAinperipheralbloodcellswasnotdetectedinallnormalsubjects,butitwasdetectein28of48(58.33%)caseswithHCCan

7、dinall8patientswithextrahepaticmetastasis.ThepositiverateinpatientswithHCCwassignificantlyhigherthanthecaseswithchronicliverdiseases(3/21,14.28%,P＜0.01).ConclusionsThedetectionofAFPmRNAinperipheralbloodcellsmaybehelpfulforclinialdetectionofmetastasisofHCC.

8、　　Keywords：α-fetoprotein；Liverneoplasms/diagnosis；Peripheralbloodmononuclearcells；Neoplasmmetastasis/diagnosis　　血行转移是恶性肿瘤常见的病理特征，肿瘤的血行播散是转移发生的重要条件，及时发现血流中的肿瘤细胞对于治疗方案的选择，预后的判断，疗效观察有重要价值。　　近来有文献报道用肿瘤特异基因反映血流中肿瘤