胶束电动毛细管色谱法分析替考拉宁论文

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1、胶束电动毛细管色谱法分析替考拉宁论文【摘要】目的建立毛细管电泳分离替考拉宁各主要组分的新方法。方法通过表面活性剂的浓度、缓冲液的浓度及pH、温度及电压的优化，选择最佳的分离条件。结果最佳分离条件硼酸盐∶磷酸二氢钠缓冲液(40mmol/L硼砂，10mmol/L磷酸二氢钠，用硼酸调节pH9.35，内含0.35%十二烷基硫酸钠)；检测波长214nm，电压30kV，30℃，基线分离了替考拉宁的主要组分.freelicellarelectrokiiccapillarychromatographymethodforseparationofponentsofteicoplanin

2、.MethodsConcentrationofsurfactant,pHvalue,concentrationofbuffer,.freelperatureasumconditionsforseparationdodecylsulfate,thebaselineseparationofponentsofteicoplaninethodethodmaybeusedinqualitycontrolandstabilitystudy.KEYicellarelectrokiiccapillarychromatography;Teicoplanin;ponents替考拉宁(

3、teicoplanin)是继万古霉素后开发的另一种抗耐药菌糖肽类抗生素，它主要对革兰阳性需氧菌和厌氧菌具有较强的抗菌活性，特别对耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)引起的感染有很好的疗效，是目前临床治疗多重耐药菌感染的重要抗生素［1］。替考拉宁是由6个化学结构非常相似的化合物组成的混合物(图1)。文献报道的分析方法为高效液相色谱法［2，3］。毛细管电泳技术作为近十几年发展起来的新的分离技术，在医药、化工等领域得到广泛地应用。胶束电动毛细管色谱(MEKC)是电泳技术与色谱技术的交叉，既能分离带电组分又能分离中性物质，是毛细管电泳中应用最有效的方式之一，在药物分析中有着广泛的

4、应用。本文将胶束电动毛细管色谱法应用于测定替考拉宁中的6个主要组分，为该药的质量控制和稳定性研究提供了一种新方法。1材料与方法1.1实验仪器高效毛细管电泳仪：BeckmanP/ACE5000型，紫外检测器，黄金系列色谱工作站，未涂层石英毛细管67cm(有效长度60cm)×50μm(河北永年光导纤维厂)。1.2实验材料图1替考拉宁的结构式硼砂(分析纯)，硼酸(分析纯)，十二烷基硫酸钠(SDS)(分析纯)，磷酸二氢钠(分析纯)，替考拉宁及替考拉宁A22组分(华北制药集团研究开发新药中心，批号070601)。1.3实验方法(1)溶液的制备取样品约50mg，精密称定，置2

5、5ml量瓶中，加水溶解，并稀释制成每1ml含2.0mg的样品溶液，摇匀，备用。取替考拉宁A22组分50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加水溶解并制成每1ml含2.0mg的溶液。(2)电泳条件毛细管为67cm×50μm未涂层石英毛细管；背景缓冲液为硼酸盐∶磷酸二氢钠缓冲液(40mmol/L硼砂，10mmol/L磷酸二氢钠，用硼酸调节pH9.35，内含0.35%SDS)；操作电压30kV，毛细管柱温30℃，压力进样2s(低压)，紫外检测波长214nm。2实验结果2.1SDS浓度对分离的影响以SDS为表面活性剂形成胶束，并考察了SDS的浓度对分离的影响，实验结果表明，

6、当浓度增加到3.3%时，分离度达到最高，继续增加浓度到4.5%时，使得与各组分的作用进一步加强，迁移时间大大增长，但分离度并没有增加，因此，确定了SDS的最佳浓度为3.3%。2.2缓冲液的种类及浓度对分离的影响分别考察了不同的缓冲液系统(磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液和tris磷酸缓冲液及硼砂缓冲液)，结果表明只有硼砂缓冲液可以得到很好的分离。缓冲液浓度对分离的影响较大，硼砂缓冲液的浓度升高，使ζ电位降低，电渗流减小，迁移时间延长，分离度变大；当缓冲液浓度为40mmol/L时，分离度升高达到最高；进一步增加硼砂缓冲液的浓度，使电流增加和焦耳热增加，导致色谱峰的扩散，

7、分离度降低。2.3缓冲液的pH对分离的影响阴离子表面活性剂SDS形成的胶束的电泳迁移方向与电渗流方向相反，背景缓冲液的pH值对分离的影响较大。在本实验中，化合物的迁移时间随pH值的升高而延长，这是可能由于增大了化合物在胶束相中的分配系数，使化合物的迁移时间变长。实验证明当pH9.35时最佳，各主要组分的达到基线分离。2.4磷酸二氢钠对分离的影响当缓冲液中加入少量磷酸二氢钠时，分离度明显增加。当磷酸二氢钠的浓度增加到10mmol/L时，分离度升高达到最高，进一步增加时分离度不再增加。2.5温度及电压对分离的影响温度的变化对分离效果的影响较小。本实验选择的温度为30