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1、加拿大一枝黄花不同部位酚类化合物的含量测定论文.freelm×250mm,5μm),柱温为30℃,检测波长为360nm,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0mL/min。结果加拿大一枝黄花花中酚类化合物的含量较其他部位高。结论本方法操作简便、快速、可靠、易行、重复性好,适合加拿大一枝黄花不同部位中酚类化合物的含量测定。【关键词】加拿大一枝黄花；不同部位；酚类化合物；高效液相色谱法；含量测定Abstract：ObjectiveTodevelopthemethodfordeterminationofphenolicpoundsfromdi
2、fferentfractionsofSolidagoCanadensis.MethodsContentsofphenolicpoundsinedbyHPLC.Theabsorptionandanalysisn(4.6mm×250mm,.freel).ThemobilephaseconsistedofacetonitrileandandthefloL/min.ResultsContentsofphenolicpoundsinfloinationofphenolicpoundsfromdifferentfractionsofSolidagoC
3、anadensis.Keyination加拿大一枝黄花(SolidagocanadensisL.)属菊科,一枝黄花属,富含黄酮类(酚类)1-3等成分。原产北美,于20世纪70年代作为花卉引入我国,后逸为杂草,目前在上海及其周边地区,沪宁、沪杭、浙赣铁路沿线,浙江的宁波、台州等地广为分布,造成了极大的生态灾难4。然而,加拿大一枝黄花也具有一定的利用价值,在一些地方如瑞士、以色列、俄罗斯仍被作为花卉观赏植物；在北美是重要的蜜源植物,并且可以作为草料作物5；在欧美已经有700多年的药用历史,用于治疗慢性肾炎、膀胱炎、尿结石、风湿、糖尿病等疾病,
4、具有抗氧化、抗菌消炎等药理作用6。目前,有关加拿大一枝黄花化学成分的研究较少。本试验以酚类化合物为指标性成分,对加拿大一枝黄花根、茎、叶、花、全草中酚类化合物的含量进行了比较研究,以期为更好地开发与利用加拿大一枝黄花提供依据。1仪器与试药FS、1HNMR和13CNMR鉴定,纯度经HPLC检测在98%以上；乙腈为色谱纯；95%乙醇为分析纯；水为纯净水。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：AgilentZORBAXEclipseSB-C18(4.6mm×250mm,5μm)；柱温：30℃；检测波长：360nm；流动相：乙腈-水,梯度洗脱(洗脱程
5、序见表1)；流速：1.0mL/min。表1梯度洗脱程序时间(min)乙腈(%)水(%)时间(min)乙腈(%)水(%)018824075251518824510003035655010003550502.2溶液的制备混合对照品溶液的制备：分别精密称取4.3mg绿原酸、2.2mg芦丁、1.1mg槲皮素、10.7mg山萘酚,用少量甲醇溶解后定容至10mL,得标准品储备液,密封存于4℃冰箱备用。供试品溶液的制备：加拿大一枝黄花根、茎、叶、花、全草洗净、晒干后,用粉碎机充分粉碎,过60目筛,放入干燥器内备用。精密称取1.0g样品,加15mL75%
6、乙醇超声浸提2次,过滤,残渣用75%乙醇洗涤2次,合并滤液,定容至50mL,摇匀,即得。进样前用0.45μm滤膜过滤。2.3标准曲线的绘制将上述混合对照品溶液按照色谱分析条件进样,色谱图见图1。以对照品的进样量对峰面积的积分值进行回归,以质量为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y)作标准曲线。线性范围及回归方程等见表2。注：1.绿原酸；2.芦丁；3.槲皮素；4.山萘酚图1加拿大一枝黄花不同部位的HPLC图谱表2标准曲线、保留时间及线性范围对照品保留时间(min)回归方程r2线性范围(μg)绿原酸3.98Y＝287.6X＋8.37270.999
7、50.215～4.30芦丁12.07Y＝1348.6X＋5.47040.99970.055～1.10槲皮素34.28Y＝2348.3X＋0.52620.99900.011～0.22山萘酚38.41Y＝1945.9X－2.338810.0107～0.2142.4方法学考察2.4.1精密度试验精密称取加拿大一枝黄花全草1.0g,按“2.2”项下方法和“2.1”项下色谱分析条件制备供试品溶液并进行分析,进样量均为30μL,1d内进样5次。计算相对标准偏差(RSD),RSD均小于1.5%。2.4.2稳定性试验精密称取一枝黄花全草1.0g,按“2.
8、2”项下方法和“2.1”项下色谱分析条件制备供试液并进行分析,进样量均为30μL,分别在0、3、6、12、24h测定。计算RSD,结果RSD均小于2.6%。2.4.3重复性试验精密称取加拿大一
