髓鞘少突胶质细胞糖蛋白mog抗原肽免疫原性验证

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1、ＸＸ大学毕业论文题目：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白MOG抗原肽免疫原性验证学生姓名：XXX学号：XXXXXXXXX指导教师：XXX职称：教授专业：生物技术院（系）：生物工程系完成时间：2011年5月25日2011年5月25日摘要目的：通过实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE）小鼠模型的建立，验证固相合成法制备的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）抗原肽免疫原性。并通过观察EAE病理学变化，初步探讨多发性硬化（MS）的发病机制。方法：本实验室利用Fmoc固相合成法制备的MOG35~55抗原肽（纯度>95%）加完全

2、弗氏佐剂（CFA）免疫C57BL/6小鼠，观察小鼠发病情况，并采用双盲法进行神经功能评分。利用电子显微镜观察EAE小鼠的病理学变化，分别采用HE染色、LuxolFastBlue髓鞘染色法评估脊髓中炎性细胞的浸润及髓鞘脱失的情况。结果：MOG35~55成功诱导了C57BL/6小鼠EAE模型。免疫后15天起，小鼠开始陆续出现临床症状，至第21天发病率达100%。电子显微镜下可见EAE小鼠脊髓中典型脱髓鞘现象，并伴随有典型的炎性细胞的浸润。结论：用本实验室合成的抗原肽MOG35~55诱导的C57BL/6小鼠EAE模型，发病率高，模型稳定，为进一步研究多发性硬化（multiplesc

3、lerosis,MS）的发病机制与治疗打下基础。关键词：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白、实验性自身免疫性脑脊髓炎、动物模型、神经病理学10AbstractObjectiveThemodelofexperimentalautoimmuneencephalomyelitis(EAE)wasestablishedinfemaleC57BL/6micetovalidatetheimmunogenicityofmyelinoligodendrocyteglycoprotein(MOG),toobservepathologicalchangesofEAE,andtoexplorethepossi

4、blepathogenesisofmultiplesclerosis(MS).MethodsEachmousewasinjecteds.coverflankswithMOG35-55,MycobacteriumH37Ra,andCFA,injectedi.pwithpertussistoxin.TheclinicalsymptomswereobservedandthepathologicalchangesofEAEwerestudiedwiththeelectronmicroscopy.Consecutivesectionswerestainedwithhematoxylin

5、/eosin(HE)andLuxolFastBlue(LFB),toassessinflammationanddemyelination.ResultsTheincidenceofEAEinimmunizationanimalreached100%,mostmicedevelopedclinicalEAEwithinabout15daysofimmunizationMOG35~55peptides.WithElectronmicroscopy,inflammatorycellsinwhitematteranddemyelinationwereobserved.Andtheco

6、mponentofaxonisdisappeared.ConclusionTheimmunogenicityofMOG35~55synthesizedbytheimprovedsolid-phasesynthesismethodwasidentifiedbytheinductionofEAEinC57BL/6micewithstableperformanceandhighincidence,whichmaybehelpfulinexploringthemechanismandtherapyofMultiplesclerosis(MS).KeyWords:Myelinoligo

7、dendrocyteglycoprotein(MOG),Experimentalautoimmuneencephalomyelitis(EAE),Mousemodels,Pathologicalchanges10目录引言1一、材料和方法21.试剂和仪器21.1.主要试剂21.2主要仪器22.实验动物22.1小鼠来源22.2饲养33.EAE小鼠模型的制备34.神经功能评分35.脊髓组织病理学检测取材36.溶液的配制37.H&E、LFB染色47.1H&E染色47.2LFB染色48.数据分析及统计学处理5二、