【专题9】生物技术实践

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1、专题92011届生物二轮复习【专题九】生物技术实践【考情分析】本专题内容包括选修一《生物技术实践》的全部内容。本部分内容在高考中以非选择题呈现的较多，多为二选一模式。本专题内容在高考中的主要考点有：微生物的培养基的配制、消毒、灭菌、计数分离等技术，尤其是培养和分离；传统发酵食品制作的原理、过程、条件控制；花药离体培养技术的操作及与植物组织培养的区别；植物有效成分的提取的原理、方法等；DNA、蛋白质的提取、分离的原理、方法与装置。【知识网络】蛋白质提取和分离PCR技术应用其他现代生物技术植物组织培养测定微生物数量发酵生产特定产物微生物分离和培养微生物的利用生物技术实践制定

2、和应用固定化酶测定酶的活力探讨酶在食品制造和洗涤方面的应用酶的应用提取生物材料中特定成分食品发酵的基本方法测定食品加工中的有害物质食品加工【知识综合】一、传统发酵技术的应用1．几种传统发酵技术的比较菌种生活方式原理发酵条件操作提示果酒酵母菌兼性厌氧型C6H12O6→2C2H5OH+2CO2温度：18～25℃，最适温度为20℃。PH；5.0～6.0呈酸性。氧气：先期通O2，目的是使酵母菌大量繁殖，然后密闭发酵生产酒精。选材和材料处理；防杂菌污染；控制发酵条件；正确使用发酵装置。9专题92011届生物二轮复习果醋醋酸菌好氧型C2H5OH+O2→2CH3COOH+H2O温度：

3、30℃～35℃。前期和中期，不需通入氧气，目的是进行酒精发酵，接种后需保持氧气充足。腐乳毛霉需氧型蛋白酶蛋白质→多肽、氨基酸、脂肪酶脂肪→甘油、脂肪酸温度为15～18℃，此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长。防杂菌污染；控制盐、酒、辛香料用量；控制前、后期发酵条件。泡菜乳酸菌厌氧性在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料防杂菌污染，密封严密。选择气密性好的泡菜坛；控制腌制条件。二、微生物的培养及应用1、消毒和灭菌的区别使用方法产生的结果常用的方法应用的范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物质表面或内部一部

4、分对人体有害的微生物煮沸消毒法一般物品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌接种工具干热灭菌玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌培养基及容器的灭菌2、微生物的纯化（1）平板划线法：操作简单，但是单菌落不易分离（2）稀释涂布平板法：操作复杂，但是单菌落易分离3、微生物的分离和计数（1）分离：选择培养基（2）计数：常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。三、植物组织培

5、养1、原理：细胞的全能性2、花粉植株的产生和植物茎的组织培养的比较项目月季的花药培养菊花茎的组织培养相同点原理细胞的全能性过程脱分化、再分化不同点操作流程制备培养基—外植体消毒—接种—培养—移栽—栽培选材—材料消毒—接种和培养—筛选和诱导—移栽—栽培选育四、酵母细胞的固定化9专题92011届生物二轮复习（1）常用方法包埋法：适合于较大的细胞适用于酶的固定化学结合法物理吸附法（2）直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较方法优点缺点直接使用酶催化效率高、耗能低、污染低对环境条件非常敏感、易失活；难回收，成本高，影响产品质量固定化酶既能与反应物接触，又能与产物分离；可以反复利

6、用不利于催化一系列的酶促反应固定化细胞成本低、操作容易反应物不易与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降五：五种重要物质的提取（1）提取方法总结提取物质提取方法提取原理步骤DNA盐析法①DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；②DNA不溶于酒精，但某些蛋白质则溶于酒精①溶解在2mol/L的NaCl溶液中；②加水稀释至0.14mol/LNaCl溶液使DNA析出过滤；③加入冷却酒精析出。血红蛋白凝胶色谱法根据相对分子质量的大小①样品处理；②粗提取；③纯化；④纯度鉴定电脉法根据各种分子带电性质差异及分子本身大小、形状的不同玫瑰精油水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳

7、香油携带出来①水蒸气蒸馏；②分离油层；③除水过滤橘皮精油压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗；②压榨、过滤、静置；③再次过滤胡萝卜素萃取法使提取物溶解在有机溶剂中，蒸发后得到提取物①粉碎、干燥；②萃取、过滤；③浓缩（2）DNA粗提取与鉴定①哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。②实验过程中两次用到蒸馏水：第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。③鉴定DNA加入二苯胺试剂并沸水浴加热，观察是否出现蓝色。④注意事项：经以血液为材料时，