大鼠心肌缺血_再灌注损伤模型的改进与评价

大鼠心肌缺血_再灌注损伤模型的改进与评价

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1、第6卷 第4期解剖科学进展2000年PROGRESSOFANATOMICALSCIENCES2000大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的改进与评价王淑侠 兰小莉1 王吉文2 裴著果(中国医科大学第二临床学院核医学科 沈阳110003)  摘要 大鼠心肌缺血再灌注损伤是模拟人类心梗及溶栓再通治疗,研究缺血预适应机制,评价抗心律失常药物疗效常用的动物模型。本文在传统造模方法的基础上进行了一定的改进,采用在压管下加一小垫片的方法,减少了传统推管法对心表面的机械损伤,方法简便,冠脉阻断确实。结果:大鼠左冠状动脉主干缺血30

2、′再灌120′危险区左室重量比为55%±5%,坏死区危险区为58%±6%(N=10)。心肌酶谱结果:关键词 心肌再灌注损伤;大鼠;模型,TTC染色法  阻断冠状动脉造成急性心肌梗塞并在预定时间2∶1,压力在5~15cmH2O之间。根据呼吸频率及内恢复血供予以再灌注是模拟人类心梗及溶栓再通深度调整呼吸参数(鼠的气管插管可用一次性塑料治疗常用的实验研究方法。大鼠以其冠脉侧支循环滴管拉制)。右颈总动脉插管,监测动脉血压。胸骨缺乏、心肌坏死出现早、心律失常发生率高、重复性、稳定性好、费用低廉而成为制作该疾病模型[1

3、],特别拉两侧肋骨代替开胸器(对于270g以下的鼠,需剪是硕、博士研究生进行课题实验首选的实验动物。笔者在进行心肌缺血预适应机制的研究中,参照以往轻轻向上推开,暴露动脉圆锥与左心耳根部间的左型的制作方法进行了一定的改进,现报告如下:射性跳动过猛,血管反而暴露不清楚。以左冠状静脉为标志,用38圆3×10不锈钢圆针,3~0丝线在左冠状静脉下缝一针。进针深度应穿过心肌1mm健康雄性Wistar大鼠,体重240~350g(由中右。采用笔者自行改良的推管法行左冠状动脉缺血再灌注。即先将线的两端穿过一厚1mm,直径约呼

4、吸机(浙江医科大学医学仪器实验厂);自制简易血压计(由24号套管针、三通开关、U形管内装水的两线头。用纹式钳向下推动硬塑管,使其连同小垫由上海第三试剂厂生产;批号970924用前以线造成再灌注。以左室前壁紫绀或称蓝紫色及同步兰(EvansBlue)瑞士Fluka公司出品。电子天平志。复灌时左室前壁缺血区紫绀消失。显微镜。缺血再灌结束后,再次结扎阻断的左冠状动以3%戊巴比妥钠按50mgkg腹腔注射。气管脉,静脉内注入2%EvansBlue1ml。待鼠口唇兰染后,取下心脏,剔除心房右室,左室-20℃冻5~ 中国

5、人民解放军第202医院心内科片。置预温37℃,1%TTC磷酸缓冲液中染5~2Vol16 No14CK4301±251ul,CK2MB2288±328ul,LDH2329±216ul,AST371±57ul(N=5)。左缘约015cm剪断3、4肋骨,暴露胸腔。可用线牵断3、4、5共3条肋骨,以使心脏暴露良好)。破心包,左手用眼科镊夹一小棉球,用棉球将胸腺及左心耳文献记载的方法[2~4],并根据本实验室条件,对该模冠状静脉。注意左手推胸腺时一定要轻,太重心脏反1 材料与方法111 材料左右,进出针间宽度应在静脉

6、周围115~2mm左国医科大学实验动物部提供);NiHonKonden型心电图机(上海KONDEN医用电子仪器厂);小动物2mm的中央有圆孔的软垫,再将线穿过直径115mm长115cm的硬塑管,轻提从管另一端穿出银,管旁边附有直尺做刻度组成);红四氮唑(TTC)一起压向冠状动脉。夹紧丝线阻断冠脉血流,放松丝011M1PH714的磷酸缓冲液配成1%溶液;伊文斯心电图示S2T段抬高,QRS幅度升高为结扎成功标(ER2182A,A&Dcompanylimited),01ympus实体113 心肌缺血区,坏死区范围

7、的评定112 手术方法插管接呼吸机,按1~1.5ml100g潮气量,70~80次分的频率给予呼气末持续正压呼吸,呼∶吸比为20min。平行房室沟将左室切成115~2mm厚共5 中山医科大学附属第二医院急诊科15min,左室兰染区为非缺血区。坏死心肌呈白色。,,1・372・解 剖 科 学 进 展2000年第6卷第4期缺血未坏死心肌(濒危心肌)呈红色。待色差明显后,取出左室断面,置10%甲醛溶液中,固定1~2h。采用中国医科大学实验设备处的计算机图象分析系统用数码相机拍照。然后在olympus10实体显微镜

8、下计算危险区左室,坏死区危险区的重量比。再灌结束后,自下腔静脉取血2ml,分离血清,检测心肌酶谱。即肌酸磷酸激酶CK及其同功酶限公司生产。2 结果心肌缺血再灌血压、心率及心电图表现。冠脉结扎后,血压一过性下降,心率先略增快,后随时间与QRS波融合,QRS波增宽、增高、心律失常等。QRS波幅随着时间的延长可逐渐变小,心律失常以一过性室早、室速多见。再灌瞬间,QRS波再次增高、增宽。心律失常类型与结扎相同。心脏直视,

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