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1、2014年12月第35卷第23期138食品研究与开发FoodResearchAndDevelopment专题论述DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2014.23.038原料乳细菌总数快速检测方法研究进展孟宪梅1,2,杨志国3,孙肖明1,2(1.吉林工商学院,吉林长春130062;2.粮油食品深加工吉林省高校重点实验室,吉林长春130062;3.吉林市太太食品有限责任公司,吉林吉林132011)摘要:概述了原料乳细菌总数快速检测方法的研究现状及最新研究进展,对电导微生物技术、PCR技术、ATP生物发光技术、流式细胞技术、
2、直接表面荧光过滤技术、酶联免疫法、生物传感器法、智能化图像识别技术进行了归纳,并对国内的研究方向进行了展望。关键词:原料乳;细菌;快速检测ResearchProgressonRapidDetectionofTotalQuantityofBacteriainRawMilkMENGXian-mei1,2,YANGZhi-guo3,SUNXiao-ming1,2(1.JilinBusinessandTechnologyCollege,changchun130062,Jilin,China;2.KeyLaboratoryofGrainandOilProc
3、essiongofJinlinProvince,changchun130062,Jilin,China;3.MrsFoodlimitedliabilitycompanyofJilinCity,Jilin132011,Jilin,China)Abstract:ThecurrentresearchstatusandthelatestresearchprogressonrapiddetectionoftotalquantityofbacteriainRawMilkwerereviewed.Themethodsofrapiddetectionfortot
4、alquantityofbacteriaincludedconductancemicrobiologytechnique,PCR,ATPbioluminescencetechnique,flowcytometry,directepifluorescentfiItertechnique,enzyme-linkedimmunosorbentassay、biosensormethod,intelligentimagerecognitiontechnique.Finally,thedomesticdevelopmentdirectionofcorrela
5、tedresearchworkwasalsoprospected.Keywords:rawmilk;bacteria;rapiddetection原料乳营养丰富,是细菌良好的培养基,在挤乳、收集、贮藏、运输的过程中极易污染细菌。目前我国乳品企业应用的细菌检测方法,主要有培养法和染色法两种,虽然具体操作程序有所不同,但是都存在着耗时、费力、操作繁琐等不足,影响着企业对原料乳品质的正确判别和生产。因此准确、快速、容易操作的细菌快速检测方法正在成为乳品企业关注的重点,直接决定着企业产品品质与综合竞争力的提升。本文综述了目前世界乳品领域内应用较为成熟的检
6、测方法,并对各种方法进行对比,同时也对正在进行研究的最新检测手段进行介绍。基金项目:吉林省科技发展计划项目(201205054);粮油食品深加工吉林省高校重点实验室开放资金项目(2014001)作者简介:孟宪梅(1964—),女(汉),教授,硕士生导师,博士,研究方向:食品安全及食品生物技术。1电导微生物技术该技术的工作原理是基于微生物生长导致样品电导率的变化,其方便之处在于,只要样品本身是液态就可以直接注入培养瓶中不需要经过稀释。微生物在培养过程中,使得液态样品中的糖类发酵成乙酸、乳酸等,蛋白质变成氨基酸,由不导电的大分子变成导电小分子,从而
7、改变培养瓶中液体的电导率。电导率从基线到明显增加的点,称为检测时间,检测时间长短与液态培养物中微生物总数多少关系密切,数量越多,检测时间越短,数量越少,检测时间就越长[1]。刘玲君等[2]应用英国的MALTHUS微生物快速分析仪,电热恒温培养箱等对100个污染度梯度不同的原料乳样品进行检测,同时用平皿计数法进行对照。结果表明方法可行,且具有测定结果更快捷、省力。由于资料收集自动进行,测试可以不间断,使原料奶得以更及时、更快的监测,具有传统平皿计数法测试所不能比拟的优点。但是当检测样品中含菌量少的样品时需要时间专题论述孟宪梅,等:原料乳细菌总数快速
8、检测方法研究进展139长(16h~20h),并且设备昂贵,难以普及是该种技术方法目前存在的缺点。2PCR技术2.1荧光定量PCR技术荧
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