间充质干细胞分化的内皮细胞有免疫调控作用的论文

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1、间充质干细胞分化的内皮细胞有免疫调控作用的论文【摘要】为了探讨间充质干细胞(mesenchymalstemcell,msc)诱导而来的内皮细胞的免疫调控能力，将人骨髓msc在体外经vegf诱导分化为内皮细胞，并用倒置相差显微镜和流式细胞术分别观察和检测细胞的形态和免疫表型，用淋巴细胞转化实验观察其免疫调控能力。结果表明：msc在向内皮细胞分化的体系中生长迅速，诱导后的细胞经vonatrigel上形成毛细血管样网状结构。细胞表面标记无明显改变，即cd73、cd105、hlaabc仍阳性，cd34、cd80、cd86、hladr、cd31仍为阴性。由msc诱导分

2、化而来的内皮细胞能抑制t淋巴细胞的增殖，其抑制作用随内皮细胞加入量的增多而增强。结论：由骨髓msc来源的内皮细胞对t淋巴细胞具有调控作用。【关键词】间充质干细胞免疫调控endothelialcellsderivedfrommesenchymalstemcellsharborimmunoregulatoryeffectsjiangxiaoxia*,chenjinsong*1,suyongfeng,liaocan1,liubing,maoninginstituteofbasicmedicalsciences,academyofmilitarymedicalsc

3、iences,beijing100850,china;1guangzhoucordbloodbank,guangzhoumaternalneenatalhospital,guangzhou510180,chinaabstractthisstudymunoregulatoryeffectofendothelialcellsderivedfrommesenchymalstemcells(msc).thehumanmscetry,thecellmorphologicfeatureicrosoopeandanalysisofcapillaryformationedby

4、usingtheinvitroangiogenesiskit.theimmunoregulatoryeffectphocytetransformationtest.theresultindicatedthatduringthedifferentiationcellsgremunofluorescenceanalysisshoscsformedcapillarylikestructure.endothelialcellsderivedfrommscalsorevealedimmunosuppressiveeffectontcellproliferationina

5、dosedependentmanner.itisconcludedthatendothelialcellsderivedfrommscalsoharborimmunoregulatoryeffectontlymphocytes.keyesenchymalstemcell;endothelialcell;immunoregulatoryeffectjexphematol2007;15(1):175-178间充质干细胞(msc)起源于中胚层，免疫原性低,移植后无免疫排斥反应，对多种免疫细胞具有调控功能［1］，且在体外可大量增殖培养。.若将msc定向诱导，分化为血管

6、内皮细胞，在体外构建成理想的血管移植物，在血管组织工程和再生医学领域必将有广阔的应用前景。为了研究成体msc向血管内皮细胞分化的能力，摸索msc体外诱导分化为内皮细胞的实验条件，以及探讨msc分化为内皮细胞后应用于血管损伤修复方面的可行性，我们分离纯化骨髓msc后，选取合适的条件，将msc诱导分化为内皮细胞，并观察其对t淋巴细胞的免疫调控能力。材料和方法msc分离培养及鉴定msc分离培养取正常人骨髓以肝素抗凝，用pbs稀释后，密度梯度离心(percoll比重1.077g/ml)分离单个核细胞，按2×105/cm2加入含10%胎牛血清(hyclone公司产品)的d

7、memlg培养液的75cm2培养瓶中，于37℃、5%co2、饱和湿度的培养箱中培养48小时后去除非贴壁细胞，并更换新鲜培养体系，继续培养，待细胞90%融合时，用0.05%胰酶消化，按5000cells/cm2的密度传代培养，取第3代至第7代的细胞进行实验。间充质干细胞分化而来的内皮细胞具有免疫调控能力msc表面标志测定用0.05%胰酶消化收获细胞，用流式细胞术按常规测定以下指标：cd34、cd45、cd31、cd80、cd86、cd73、cd105、hlaabc、hladr(pharmingen公司产品)。间接免疫荧光染色法测定vsc多向分化潜能鉴定msc

8、以0.5×104/em