胶质瘤基因治疗的进展的论文

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1、胶质瘤基因治疗的进展的论文胶质瘤基因治疗的进展关键词：胶质瘤基因治疗　　胶质瘤基因治疗的实验研究始于80年代末。随着分子生物学技术的进步和肿瘤发病机制研究的深入，恶性肿瘤的基因治疗越来越受到重视，本文将胶质瘤在突变补偿、分子化疗和遗传性免疫增强三方面的研究情况加以综述。　　1　突变补偿　　目前对肿瘤的病因学研究发现，肿瘤的发生与癌基因的激活和抑癌基因的失活有关。突变补偿就是消除激活的癌基因或增强抑癌基因的功能。　　1.1　消除激活的癌基因　包括反义核酸、核酶和单链抗体技术。反义核酸是指与体内某rna或dna序列具有互补顺序，并能通过碱基配对与互补链杂交，从而

2、影响其转录或翻译过程的rna或dna片段。癌基因反义核酸的导入，抑制了癌基因编码蛋白质的合成，从而抑制癌基因的功能。胶质瘤常过表达一些生长因子。tgf-β是一种t细胞抑制因子，用反义tgf-β表达质粒转导9l胶质肉瘤细胞，可使荷瘤鼠长期生存率达100％，12周后肿瘤消失，淋巴结效应细胞增加了3～4倍［1］。vegf可促进血管内皮细胞的分裂，把vegf／vegfr的通路打断，可抑制肿瘤血管的形成。saleh等［2］把c6胶质瘤细胞用反义vegf的真核表达载体转导，vegf的表达水平下降，组织学检查见肿瘤内血管数目减少且有很大程度的坏死。肽生长因子bfgf对胶质

3、瘤的增殖、浸润有刺激作用。反义bfgf使u-87胶质瘤细胞增殖被抑制70％［3］。.trogan等［4］发现恶性胶质瘤有igf-1异常表达，此表达异常可促进肿瘤的生长；反义igf-1的导入，成功治疗了转基因鼠的脑内胶质瘤。　　虽然反义核酸治疗恶性肿瘤有一定效果，但也有局限性，不能转运足够的反义核酸到靶细胞而达到长期逆转肿瘤的目的，现已设计了一种具有催化活性的反义rna，又被称为核酶（ribozyme），它不仅可与rna结合，同时还能使其裂解，可反复使用。多形性胶质母细胞瘤（gbm）表达cd44粘附分子，设计了两种锤头核酶（hammerheadribozyme

4、s）来抑制cd44的表达。两种核酶定靶于cd44的外显子2上，对转录的cd44s、cd44r1rna进行剪切，流式细胞仪（fcm）检测显示了其对cd44转录的裂解作用，这样降低了cd44的表达［5］。　　单链抗体技术是利用抗体的特异性和高亲合特征，对表达抗体的基因进行操作，使其在抗原结合区表达，又被称为内抗体（intrabody）。erbb2在许多肿瘤，特别是一些腺癌中过表达，将erbb2单链可变区抗体（scfv）基因导入肿瘤细胞内，可抑制erbb2跨膜蛋白质的过表达，引起明显的细胞生长抑制［6］。这种“敲除”（knockout）癌基因的方法很有效，也很有前

5、途，但这方面报道较少。　　1.2　增强抑癌基因的功能　p53是普遍公认的抑癌基因，是一种多功能蛋白质。它可以调节转录，监控细胞周期，激活细胞凋亡，控制dna的复制与修复，也发挥着保持基因组稳定的作用。许多肿瘤都发生p53的点突变，突变使p53抑癌功能丧失，而获得了肿瘤的形成能力。frankel等［7］报道，在40例胶质瘤中有16例（40％）发生了p53突变。badie等［8］用adp53转染9l细胞进行体内、外试验，pcr和orita等［9］对521例多形胶母细胞瘤病人进行回顾性分析，其中10例生存期≥7年，这10例中有4例p53过表达，表明gbm病人的长期

6、生存可能与p53的过表达有一定的关系。　　新近又发现一种抑癌基因p21ts1）是一种具有许多特性的肿瘤抑制基因，在胶质瘤中缺失率高达50％。fueyo等［10］用ad5rsv-16将p16基因导入胶质瘤细胞，可直接合成功能性的p16，明显抑制了细胞的生长，改善了被转导细胞的恶性表型。　　2　分子化疗　　该方法是将毒素基因释放到肿瘤细胞而达到化疗“辐射”的作用。在这方面研究最多、最深入的是hsv-tk／gcv系统。hsv-tk基因表达产物可使对哺乳细胞无毒或低毒的核苷类似物（gcv或acv）转换成毒性的gcv-tp，抑制dna多聚酶并掺入到dna链中，导致肿瘤

7、细胞的死亡。有关这方面报道较多，大多是采用产生hsv-tk的逆转录病毒颗粒的包装细胞转导各种胶质瘤细胞，gcv治疗后，发现肿瘤完全消退。也有对转导动力学和毒性进行了试验，发现该系统对小鼠、大鼠和猴基本是安全的；也未检测到插入突变和有复制能力病毒的产生。胶质瘤细胞处于活跃的增殖状态，易被自杀基因tk转导。但也存在正常细胞转导表达tk基因导致组织损伤的可能性，如肠上皮和骨髓细胞被转导可引起腹泻和骨髓抑制，为此，研究者们克隆了只在特异组织表达的启动子基因，用mbp启动子与hsv-tk结合就可只转导胶质瘤细胞，gcv治疗后使肿瘤消退，避免了腹泻和骨髓抑制等副作用［1

8、1］。　　对hsv-tk基因的转导开始多采用逆转录病