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时间:2018-05-07
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1、穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较的论文【摘要】 目的对穿山甲(i)和猪蹄甲(ii)的成分进行比较。方法用薄层层析法、紫外分光光度法,氨基酸分析仪对i、ii水解液、水提液及醇提液的成分及氨基酸进行测定比较。结果①两者水提液、醇提液的薄层斑点颜色和rf值相同;②紫外吸收峰峰形基本一致;③所含氨基酸一致,除个别氨基酸含量差异明显,其它氨基酸含量接近。结论猪蹄甲和穿山甲的提取物中所含成分相似且含量接近,这为猪蹄甲代替穿山甲药用提供了理论依据。【关键词】穿山甲猪蹄甲薄层层析紫外分光光度法氨基酸穿山甲的鳞甲,临床用于治疗痈疽疮肿、风寒湿痹、月经停闭、乳汁不通,外用止血[1],并有明显的抗肿瘤作用,用
2、于妇科卵巢肿瘤效果显著[2];猪蹄甲临床用于治疗痔疮、疽咳嗽喘息及通乳、补血等[3]。此外,民间有将猪蹄甲煅成炭后口服以治疗功能性子宫出血症的[4]用法。穿山甲是国家二级保护动物,其鳞甲为常用的贵重中药材。由于用量不断增大,野生资源已临灭绝,市场供需矛盾非常突出,因而,很有必要寻找新资源予以代用。据临床报道,猪蹄甲可代替穿山甲[5,6]使用,《本草纲目》记载了穿山甲与猪蹄甲作用疗效有相同之处,均可治痈疽、恶疮、痔漏、除痰化痰等。本文对穿山甲和猪蹄甲的水和70%乙醇提取物进行了薄层、紫外线及氨基酸含量等的分析,结果发现,两种提取物斑点颜色和rf值基本相同;此外吸收峰形基本一致,含氨基酸的
3、类型及含量也基本相同。.现报道如下。 1材料及仪器穿山甲(已炮制,购于南昌中药切制厂),猪蹄甲(已炮制,购于南昌肉类加工厂)。仪器:三用紫外线分析仪(海顾村电光仪器厂),日立835-50型氨基酸自动分析仪,721型可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)。所有试剂均为a.r级。 2方法与结果 2.1检测液的制备 2.1.1水解液的制备 称取穿山甲(i)粉末50.0g,加入6mol/l的hcl250ml,回流48h[7],将水解液置于水浴上加热挥去hcl,取出加入活性炭,趁热抽滤,浓缩,定容,摇匀,灌装,密封,高温灭菌,备用。称取猪蹄甲(ii)粉末50.0g,加入6mol/l的hc
4、l250ml,同穿山甲水解液的制备,得猪蹄甲水解液。 2.1.2醇提液的制备 称取i粉末30.0g,加入70%乙醇240ml[8],回流1h,趁热抽滤,滤液浓缩到一定量,定容(50ml),摇匀,灌装,备用。称取ii粉末30.0g,照上法制得醇提液。 2.1.3水提液的制备 称取i粉末20.0g加入蒸馏水200ml,煎煮1h,抽滤,滤渣中再加蒸馏水200ml,煎煮1h,抽滤,合并两次滤液,浓缩,定容,摇匀灌装,密封后高温来灭菌,备用。称取ii粉末20.0g,照上法制得水提液。 2.2薄层分析 2.2.1层析板的制备玻璃规格 厚2mm左右,光滑清洁,2cm×10cm或4cm×
5、20cm。铺板:硅胶g300g,加入0.7%cmc-na上清液60ml,研钵中研成均匀糊状,立即铺层,凉干,105℃活化1h,干燥器中备用。 2.2.2点样液的制备 将以上i、ii醇提液、水提液各取40ml浓缩至10ml,装入小锥形瓶中塞紧备用,水提液置冰箱中保存。 2.2.3点样 分别用微量进样器取上述i、ii醇提液的浓缩制品15ml,点样于硅胶g板上,分别以a、b、c3种不同溶剂系统展开[8],结果见图1~3。a溶剂系统:展开剂正丁醇(水饱和液)∶无水乙醇(3∶1)显示剂5%茚三酮无水乙醇液各点rf值1i=0.1471ii=0.1472i=0.2242ii=0.2243i=
6、0.3453ii=0.3494i=0.4574ii=0.4485i=0.7415ii=0.7166ii点为绿色,其它各荧光点均为淡紫色。b溶剂系统:展开剂正丁醇∶乙醇∶nh3·h2o(4∶1∶1)显色剂5%茚三酮无水醇液各点rf值:1i=0.08221ii=0.08222i=0.2192ii=0.2183i=0.2793ii=0.2834i=0.6274ii=0.6305i=0.9775ii=0.9775i、5ii、6ii为紫色点,其它各荧光点均为黄绿色。 由以上数据可看出,i、ii醇提液或水提液在不同溶剂系统下展开后,其相应各点rf值基本相同,荧光点的颜色也基本一致,说明二者成分基本
7、相同。在上述两种提取液的薄层层析中,有一明显现象是ii的斑点颜色和荧光点亮度均深于i的斑点,因在同一浓度下,说明ii含有的成分量可能高于i。 2.3紫外分析分别取i、ii的醇提物和水提物于721型可分光光度计中,在不同波长处测其吸收度a,醇提物以70%乙醇为空白,水提物以蒸馏水为空白,结果醇提物无吸收,水提物结果如图6~7。 上图可看出i、ii水提液在400nm左右都有强吸收峰,二者波形相似,说明i、ii含的成分相近。在两次测量中,aiim
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