穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较论文

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1、穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较论文【摘要】目的对穿山甲（I）和猪蹄甲（II）的成分进行比较。方法用薄层层析法、紫外分光光度法，氨基酸分析仪对I、II水解液、水提液及醇提液的成分及氨基酸进行测定比较。结果①两者水提液、醇提液的薄层斑点颜色和Rf值相同；②紫外吸收峰峰形基本一致；③所含氨基酸一致，除个别氨基酸含量差异明显，其它氨基酸含量接近。结论猪蹄甲和穿山甲的提取物中所含成分相似且含量接近，这为猪蹄甲代替穿山甲药用提供了理论依据。【关键词】穿山甲猪蹄甲薄层层析紫外分光光度法氨基酸穿山甲的鳞甲，临床用于治疗痈疽疮肿、风寒湿痹、月经停

2、闭、乳汁不通，外用止血［1］，并有明显的抗肿瘤作用.freelol/L的HCl250ml，回流48h［7］，将水解液置于水浴上加热挥去HCl，取出加入活性炭，趁热抽滤，浓缩，定容，摇匀，灌装，密封，高温灭菌，备用。称取猪蹄甲（II）粉末50.0g，加入6mol/L的HCl250ml，同穿山甲水解液的制备，得猪蹄甲水解液。2.1.2醇提液的制备称取I粉末30.0g，加入70%乙醇240ml［8］，回流1h，趁热抽滤，滤液浓缩到一定量，定容（50ml），摇匀，灌装，备用。称取II粉末30.0g，照上法制得醇提液。2.1.3水提液的

3、制备称取I粉末20.0g加入蒸馏水200ml，煎煮1h，抽滤，滤渣中再加蒸馏水200ml，煎煮1h，抽滤，合并两次滤液，浓缩，定容，摇匀灌装，密封后高温来灭菌，备用。称取II粉末20.0g，照上法制得水提液。2.2薄层分析2.2.1层析板的制备玻璃规格厚2mm左右，光滑清洁，2cm×10cm或4cm×20cm。铺板：硅胶G300g，加入0.7%CMC-Na上清液60ml，研钵中研成均匀糊状，立即铺层，凉干，105℃活化1h，干燥器中备用。2.2.2点样液的制备将以上I、II醇提液、水提液各取40ml浓缩至10ml，装入小锥形瓶

4、中塞紧备用，水提液置冰箱中保存。2.2.3点样分别用微量进样器取上述I、II醇提液的浓缩制品15ml，点样于硅胶G板上，分别以A、B、C3种不同溶剂系统展开［8］，结果见图1～3。A溶剂系统：展开剂正丁醇（水饱和液）∶无水乙醇（3∶1）显示剂5%茚三酮无水乙醇液各点Rf值1I=0.1471II=0.1472I=0.2242II=0.2243I=0.3453II=0.3494I=0.4574II=0.4485I=0.7415II=0.7166II点为绿色，其它各荧光点均为淡紫色。B溶剂系统：展开剂正丁醇∶乙醇∶NH3·H2O（4

5、∶1∶1）显色剂5%茚三酮无水醇液各点Rf值：1I=0.08221II=0.08222I=0.2192II=0.2183I=0.2793II=0.2834I=0.6274II=0.6305I=0.9775II=0.9775I、5II、6II为紫色点，其它各荧光点均为黄绿色。由以上数据可看出，I、II醇提液或水提液在不同溶剂系统下展开后，其相应各点Rf值基本相同，荧光点的颜色也基本一致，说明二者成分基本相同。在上述两种提取液的薄层层析中，有一明显现象是II的斑点颜色和荧光点亮度均深于I的斑点，因在同一浓度下，说明II含有的成分量

6、可能高于I。2.3紫外分析分别取I、II的醇提物和水提物于721型可分光光度计中，在不同波长处测其吸收度A，醇提物以70%乙醇为空白，水提物以蒸馏水为空白，结果醇提物无吸收，水提物结果如图6～7。上图可看出I、II水提液在400nm左右都有强吸收峰，二者波形相似，说明I、II含的成分相近。在两次测量中，AIImax-AImax（最大吸收处A的差）基本相等且左右图峰相似，说明I、II水提物最大吸收受时间影响不大，水提的方法得到的组分稳定性较好。2.4氨基酸含量的测定将I水解液（0.2g/ml），水提液（0.4g/ml），醇提液（

7、0.6g/ml）；II水提液（0.2g/ml），水提液（0.4g/ml），醇提液（0.6g/ml）共6种样品取出一定量，用日立835-50型氨基酸自动分析仪测出其含游离氨基酸的量（浙江医学科学院食品研究所测）。结果见表1～2。表1必需氨基酸含量比较（略）表2非必需氨基酸含量比较（略）由表1～2可以看出II水解液中必需氨基酸总量高于I水解液的必需氨基酸总量；I、II水解液中天氨酸、苏氨酸、丝氨酸、赖氨酸等含量基本相同，其它各种氨基酸含量也十分接近；所测的7种必需氨基酸中有5种的含量基本一致，说明I、II含有相似的肽类或蛋白质且含

8、量相近。I、II水提液和醇提液中，各类氨基酸相对应的含量接近；必需氨基酸总量水提液中III。表中数据还可看出，水提方法所得的I、II的氨基酸总量远远高于70%乙醇提取液中的氨基酸总量。3讨论在TLC、UV以及氨基酸检测中皆显示I、II两种供试液的成分基本相同，这为猪蹄甲代替穿