热疗对肺癌a549细胞周期和凋亡的影响

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1、热疗对肺癌A549细胞周期和凋亡的影响：蒋东，李芳，沈文明，郑世营【摘要】目的：研究在不同温度、不同加热时间的条件下热疗对人肺腺癌A549细胞生长的影响。方法：不同温度、不同时间加热后，采用流式细胞技术观察热疗对人肺腺癌A549细胞株细胞周期和凋亡的影响。结果：流式细胞技术检测显示A549细胞经热疗处理后，细胞生长相应的滞留于细胞生长周期的G1期，细胞凋亡明显，细胞减少。热疗在不同温度、不同时间加热时间的条件下，导致A549细胞出现凋亡和坏死的程度不同，其中加热至42℃维持2h处理组中凋亡最为明显。结论:热疗可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,使细胞

2、周期阻滞于G1期,并且在加热至42℃维持2h时细胞凋亡最为明显。【关键词】肺癌；热疗；细胞周期；凋亡[Abstract]Objective:ToinvestigatetheinfluenceofthermotherapyonthegroonarycarcinosisA549cellunderdifferenttemperatureandheatingtime.Methods:ThefloetryonarycarcinosisA549cell,afterthecellotherapyunderdifferenttemperatureandheatin

3、gtime.Results:ThefloetershoberofA549cellongthedifferentconditionsofthermotherapyandinthegroupheatedfor2hoursunder42℃,remarkableapoptosiscouldbeobserved.Conclusion:TheproliferationofpulmonarycarcinosisA549cellotherapy,andremarkableapoptosiscouldbeobservedonarycarcinoma;Thermoth

4、erapy;Cellcycle;Apoptosis近年来肿瘤热疗已成为继手术、化疗、放疗、生物治疗之后的对肿瘤的第5类有效治疗手段，但其机制还不完全清楚。本实验以我们培养的肺癌A549细胞株为研究对象，观察不同温度、不同时间热疗对其细胞周期及凋亡的影响。流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况，以期对临床治疗提供有益的探索，并初步探讨其机制。1材料和方法1.1材料人肺癌A549细胞株为苏州大学医学院分子生物实验室提供。RPMI1640培养基（Gibco），小牛血清（杭州四季青），水浴箱（北京长风公司），培养箱（德国贺利氏集团公司），低速离心机（北京医用离心

5、机厂），流式细胞仪BeckmanFC500(美国)。1.2方法1.2.1细胞培养肺癌A549细胞常规在含10%小牛血清的RPMI1640培养液中，37℃、5%CO2培养箱中培养,待细胞生长汇合达85%时,用0.25%胰酶消化，按1∶3传代。实验时选取对数生长期细胞。1.2.2加温实验将对数生长期细胞用0.25%胰酶消化、打匀，分装入无菌10ml离心管。实验分为实验组和对照组：（1）不同时间热疗组实验组：将对数生长细胞放置入离心管中在42℃水浴中加热30min，1h，2h，4h；对照组将细胞消化装入离心管放置37℃水浴放置30min，1h，2h，4h

6、；（2）不同温度热疗组实验组：将对数生长细胞放置入试管中分别在40℃，42℃，44℃，46℃水浴中加热1h；对照组将细胞消化装入试管放置37℃水浴放置1h。1.2.3流式细胞仪检测细胞周期及凋亡将上述细胞离心后,新鲜培养液打匀继续37℃、5%CO2培养24h，收集细胞，用4℃预冷的PBS洗2次，加70%的冰乙醇固定过夜后，脱乙醇离心弃上清后，预冷的PBS洗1次，加入含RNA酶（100μg/ml）的PI（50μg/ml）染液1ml，避光30min后上机检测。观察细胞周期的变化。分析软件为PHOENIXFLOSMulticycleAVfor期细胞都明显

7、增加(P<0.05)，凋亡指数也都明显增加（P<0.05）。37℃组内细胞周期及凋亡指数无明显差异(P>0.05)。而在42℃组内，以加热2h组的细胞周期变化最为明显，42℃，2h组与其它不同加热时间组相比较，G0/G1期细胞明显减少(P<0.05)，S期细胞明显增加(P<0.05)，凋亡指数也明显增加（P<0.05）。3讨论热疗治疗肿瘤比较可靠的文献首推1866年德国医师Busch的报道。自上世纪60年代以来，热疗已悄然走进治疗领域，近20年来，在细胞生物、分子生物、蛋白质及基因等各个水平上关于热疗的基础研究都

8、取得了明显的进步[1]。目前有关肿瘤热疗的生物学研究远远领先于临床应用，且侧重于临床应用。在临床实践中，常用热疗来配合肿瘤