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时间:2018-05-07
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1、实验性2型糖尿病大鼠睾丸Leydig细胞形态和睾【摘要】目的:研究糖尿病时睾丸的组织病理学变化及睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成功能的改变。方法:雄性成年SD大鼠20只,随机分为正常对照组10只、糖尿病组10只。后一组给以高脂饮食加小剂量(25mg/kg)链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠模型,12周后处死。用光镜及电镜观察大鼠睾丸的组织形态学改变;逆转录-PCR法检测睾丸组织类固醇激素合成灵敏调节蛋白(Steroidogenicacuteregulatoryproteins,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)及17a-羟基化酶/17,2
2、0-裂解酶(P450c17)mRNA含量;酶联免疫吸附法测定血清中睾酮和黄体生成素(leutelnizinghormone,LH)含量。结果:糖尿病大鼠光镜下主要表现为Leydig细胞数量减少,体积变小;透射电镜下主要见到Leydig细胞萎缩;睾丸组织的StARmRNA和P450sccmRNA含量糖尿病组低于正常对照组(P<0.05),P450c17含量糖尿病组较正常对照组差异无显著性(P>0.05);与正常对照组相比血清中睾酮和LH含量降低(P<0.05)。结论:成年期2型糖尿病可以引起大鼠睾丸Leydig细胞功能降低,形态结构改变。【关键词
3、】糖尿病2型间质细胞睾酮黄体生成素RT-PCRAbstract:Objective:TostudythepathologicalchangesoftestisandthechangesofthesynthesisfunelionoftestosteroneofLeydigcellsintype2diabeticrats.Methods:TaleSprague-Dauleyratsly:normalcontrolgroupandtype2diabeticgroup.MorphologicalchangesoftheLeydigcellsinbothgroupsic
4、roscope(LM)andtransmissionelectronmicroscopy(TEM).Concentrationofbloodluteinizinghormone(LH)andtestosterone(T)elinkedimmunosorbentassay(ELISA).Expressionofsteroidogenicacuteregulatoryprotein(StAR)mRNA,cytochromeP450sidechaincleavage(P450scc)mRNA,andcytochromeP45017a-hydroxylase(P450c
5、17)mRNAfromLeydigcellsinedalgroup,thenumberofLeydigcellsdecreasedunderLMandthevolumeofLeydigcellsshrinkedunderTEM.ThelevelofbloodLHandTdecreased,themRNAexpressionofStAR,P450sccdecreased,andtheexpressionofP450c17mRNAappeareddescendenttendencybuthadnosignificanceintype2diabeticgroup.Co
6、nclusion:Type2diabetesmellitusimpairsTsynthesisandtheconstructionofLeydigcells.Keyellitus,typez;Leydigcells;testosterone;luteinizinghormone;RT-PCR糖尿病是一种较常见的内分泌代谢障碍性疾病,其慢性并发症可影响全身重要器官,随着糖尿病发病率的逐年上升及出现的年轻化趋势,糖尿病并发的生殖损伤引起人们极大的关注。研究证明:糖尿病大鼠性功能障碍的直接原因与持续高血糖引起的细胞代谢异常、氧化应激有关,其发病可能是通过自主神经功能障
7、碍、糖尿病微血管病变、下丘脑对垂体-性腺轴调控障碍得以实现[1,2]。本实验以下丘脑-垂体-睾丸轴为中心,通过光镜和电镜观察糖尿病大鼠睾丸Leydig细胞的病理改变,测定睾丸组织中LHR、P450scc、P450c17及StARmRNA含量及血清中睾酮及LH含量,来阐述糖尿病状态下它们之间的变化关系。1材料和方法1.1动物分组及处理由温州医学院实验动物中心提供的雄性健康60日龄SD大鼠20只,体重180~220g,随机分为:①糖尿病组10只,给以高糖高脂饲料(饲料组成:10.0%猪油,20.0%蔗糖,2.5%胆固醇,1.0%胆酸盐,66.5%常规饲料)1个月后,
8、按25mg/kg剂量腹腔
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