牡丹中丹皮酚含量及其提取检测方法研究

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1、牡丹中丹皮酚含量及其提取检测方法研究　　关键词：牡丹；丹皮酚；含量；分离提取　　AStudyontheExtraction,IsolationandtheAnalysisofContentofPaenolinRootBarkofPenoy　　Abstract：Rootbarkofpenoyedicineconsistsofmanyactiveponents,suchaspaeonalandpaeonal,edicineofeasingpain,diminishinginflammation,antibioticandsoon

2、.Pa，52℃的提取条件下，2.5h后其丹皮酚提取液为淡红棕色液体，冷藏后自动分层，上层为淡黄色液体，下层为淡红棕色固体［16］。CO2超临界流体萃取法提取的丹皮酚量少，远低于文献报道值，该方法能萃取出大量脂溶性成分。因CO2是非极性物质而酚苷类成分极性较大，故未能将该类萃取出来，这也是导致总提取物收率较低的一个原因［17］。为提高丹皮酚及酚苷类成分的收率，并保持本方法的提取特点，可考虑进一步优化提取条件并加入夹带剂，这方面的工作还有待深入研究。　　3丹皮酚含量测定方法　　目前对丹皮酚的检测方法有高效液相色谱法、气相色谱法、

3、分光光度法、薄层扫描法和溴量法、库仑滴定法等。　　3.1高效液相色谱法杨洁等［5］采用HPLC法，结果显示丹皮酚在0.01～0.55μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9996)，平均回收率99.87%，RSD为1.46%。该法简便、快速，重现性好，精度高，适用于牡丹皮中丹皮酚的定量分析。实验中试用不同体系和比例的流动相，如甲醇－磷酸，甲醇醋酸水，结果以甲醇醋酸水溶液为流动相时丹皮酚的分离效果最好。李海燕等［7］以甲醇0.5%磷酸(60∶40)为流动相，检测波长274nm下应用反相高效液相色谱法对丹皮酚含量进行测定，其检测

4、效果也较为理想。　　3.2薄层扫描法白少岩等［18］应用反射法锯齿扫描法测定牡丹皮中丹皮酚含量，以环己烷:氯仿:无水乙醇(7∶3∶1)为展开溶剂，将待测液在0.13mm硅胶G板展开，波长：λs=274nm，λR：365nm；下进行扫描。各项实验结果均较为理想，证明薄层扫描法操作简便、省样、省时，不失为测定丹皮酚含量的较理想方法，尤其是在中药复方制剂中，此方法对丹皮酚的测定可较好地排除其他成分的干扰［5］。　　3.3分光光度法分光光度法按具体不同原理又可分为紫外分光光度法、双波长示差光谱法、一阶导数分光光度法、正交函数分光光度

5、法等，应用各种分光光度法测定丹皮酚含量，其技术较为成熟。王剑波等［19］人使用双波长示差光谱法测定丹皮酚含量，用双波长差示光谱法消除干扰组分的影响来测定丹皮酚含量，方法快速简便，结果准确，但丹皮酚在碱性溶液中稳定性较差，应在加碱后30min内完成测定，以免造成误差；应用一阶导数光谱法测定丹皮酚含量，首先绘制吸收光谱及一阶导数光谱图，从一阶导数光谱可知，选择263nm和267nm两波长以峰零法定量效果较好，此法可不经分离对丹皮酚进行含量测定，结果准确；王焕云等［21］应用正交函数分光光度法测定丹皮酚含量，首先得吸收光谱，根据该

6、光谱的信息，选用二次正交多项式系数P2作为定量参数，按公式计算P2值，结果显示P2值与浓度C呈良好线性关系，平均回收率为99.0%，供试品溶液在24h内无明显变化。　　3.4胶束电动毛细管色谱法赵新峰等［22］选取芦丁为内标,用胶束电动毛细管色谱法分离测定中药材牡丹皮及中成药六味地黄丸中丹皮酚的含量。以丹皮酚对照品峰面积与内标的比值对其质量浓度作图。结果显示胶束电动毛细管色谱法用于测定牡丹皮及六味地黄丸中丹皮酚的含量是可行的。　　3.5其他方法除以上方法外，用气相色谱法也可测定丹皮酚的含量，但测得含量较紫外分光光度法略低，分

7、析原因是因为样品在用紫外法测定时其他共存物存在干扰［23］；用气相色谱法测定时，样品经色谱分离后，其所测组分更真实、准确，故百分含量会略低于紫外分光光度法。近年来，使用电化学方法溴量法、库仑滴定法［24］等对丹皮酚含量进行测定，但这些方法已不多用。　　4结束语　　市场上牡丹中药材丹皮酚含量差异很大，可能是由于不同的产地气候、地理环境、药材种植、药材采后加工方法及用药部位；目前对丹皮酚的定量分析方法的研究已相当深入和广泛，每种方法各有其优点及适用范围，工作中可结合自己的实际情况参考选用；随着科技的进步与发展，丹皮等中药材不再只

8、用于中药制剂配伍及成药用料，而是采用现代生化技术，提取有效成分，使用牡丹皮提取丹皮酚过程没有考虑对其它成分，生物资源未充分利用，造成了较大的资源浪费，因此对牡丹中药材提取也要兼顾其它有效成分提取率。　　参考文献：　　［1］孙国平，王华，沈玉先，等.丹皮酚诱导K562细胞凋亡的研究［J］.中