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时间:2018-05-07
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1、菩人丹胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛功能的影响:郝祥俊,贾春华,杜金凯,庞宗然【摘要】目的观察苦瓜复方-菩人丹(PRD)胶囊的降糖效果,并探讨其可能的降糖作用机理。方法将苦瓜、人参、丹参等按一定比例组成处方,应用现代制剂技术将其制成胶囊剂。喂食以链脲佐菌素(STZ)造成的糖尿病大鼠,以二甲双胍为阳性对照药物,观察PRD降血糖及对大鼠胰岛A、B细胞的影响。结果PRD能明显降低糖尿病大鼠空腹血糖值,从空腹血糖的动态观察结果来看,PRD治疗组作用缓慢而持久,而二甲双胍组作用较强;胰岛细胞学结果:PRD治疗组与阳性对照药二甲双胍组比较,胰岛B细胞数量较多,胞体较大,颗粒较多;而胰岛A细胞则无明显差异。结论
2、PRD具有降糖功效,其降糖效果的产生,可能在于PRD降低胰岛素抵抗。【关键词】菩人丹胶囊;苦瓜;血糖;2型糖尿病;胰岛AB细胞 糖尿病属祖国医学“消渴病”的范畴,以多饮、多食、多尿为主证。许多研究表明糖尿病的基本病理是“气阴亏损”“瘀血阻滞”,同时“气阴不足,脉络瘀阻”也成为糖尿病并发症产生的病理基础。“益气养阴,泻热逐瘀”由此成为治疗糖尿病及其并发症的主要治则[1]。基于上述认识,贾春华教授[2]经过长期的临床实践,通过对糖尿病病因、病机、治法方药的反复研究与总结,研制出以苦瓜为主的中药复方—菩人丹胶囊(PRD),结合免疫细胞化学技术,观察其对2型糖尿病大鼠胰岛功能的影响,并探讨其可能的降
3、糖作用机理。 1材料与仪器 1.1动物a公司(美国)生产,葡萄糖、磷酸盐缓冲试剂(PBS)、一抗、二抗、三抗、胰岛素(Ins)检测试剂盒,为北京中山试剂有限公司产品。 1.4仪器AU640奥林帕斯全自动生化分析仪,GC911/R放射免疫计数器,中国科技大学实业总公司生产。 2方法 2.1糖尿病大鼠模型的复制mol/L为糖尿病合并高脂血症模型大鼠。 2.2观察指标 2.2.1PRD对STZ糖尿病大鼠空腹血糖、空腹血清胰岛素的影响挑选造模成功的30只糖尿病大鼠,随机分成模型组、阳性对照组(二甲双胍治疗组)、PRD治疗组,每组10只。另选10只健康鼠为空白对照组。二甲双胍对照组以0.
4、14g·kg-1·d-1灌胃,PRD治疗组以0.65g·kg-1·d-1灌胃;空白对照组及模型组灌服相应容量的蒸馏水;各组动物每天灌胃2次,连续4周。于治疗(1,2,3,4周)后,禁食、水8h,眼眶采血,离心血清,分别测定空腹血糖值。给药第4周后,各组实验动物于末次给药前禁食、水8h,眼眶静脉采血,测定空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(Ins)含量。 2.2.2PRD对STZ糖尿病模型大鼠胰岛A、B细胞的影响灌胃4周后,各组实验动物断头处死,取胰腺用10%福尔马林固定,常规石蜡包埋。德国进口AO切片机切片4张,裱于多聚赖氨酸载片上,实验指标有胰岛素胰高血糖素。切片免疫组化染色具体操作步骤按试
5、剂说明进行;DAB-H2O2显色3~5min;水洗后,苏木素复染,盐酸酒精分色,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。阴性对照切片与其相应的实验片裱在一张载片上,以PBS代替一抗,随其它标本一起染色,每批染色均设空白对照,光镜观察各组实验动物胰岛组织中A细胞、B细胞的变化。 2.3统计学处理数据以±s表示,前后比较采用t检验;组间比较采用F检验。 3.2PRD对STZ糖尿病大鼠血清胰岛素的影响实验组与对照组用药第4周后血清胰岛素检测。结果见表2。糖尿病大鼠血清胰岛素水平明显低于空白对照组,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01),PRD和二甲双胍可增加血清胰岛含量,但无统计学
6、意义。 3.3PRD对STZ糖尿病大鼠胰岛A、B细胞的影响显微镜下观察,细胞胞质内充满黄褐色颗粒为阳性细胞,无黄褐色颗粒为阴性细胞。A细胞:空白对照组和实验组阳性细胞均位于胰岛周边,细胞胞质内含大量橘黄色颗粒,各组之间没有明显差距。B细胞:空白对照组胰岛内阳性细胞数量均多,遍布胰岛中央,阳性细胞胞质内含大量橘黄色颗粒;模型组胰岛内阳性细胞偶见,细胞体积较小,颗粒较少;二甲双胍组胰岛内阳性细胞较少,细胞大小不一,体积较大的细胞胞质内颗粒较多,体积较小的细胞胞质内颗粒较少,胰腺腺泡间偶见阳性细胞,体积较小,颗粒较少;PRD组阳性细胞散在于胰岛内,细胞体积较大,颗粒丰富,有些胰岛内阳性细胞数量明
7、显增多,胰腺腺泡间有散在阳性细胞,胞体较大,颗粒较多。表1PRD对糖尿病大鼠空腹血糖的影响表2PRD对糖尿病大鼠血清胰岛素的影响 4讨论 中医认为糖尿病(又称消渴病)的主要病理机制为:热盛伤津-气阴两伤-阴阳俱损。现代医学则认为2型糖尿病的机理主要是由于胰岛素分泌障碍或/和胰岛素抵抗。我们依据中医药理论确立糖尿病的治疗原则:清热生津、益气养阴、滋补肝肾、活血化瘀。采用成熟苦瓜果实的浆汁配以人参、丹参等中药
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