菊黄上清含片抗流感病毒的研究

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1、菊黄上清含片抗流感病毒的研究【关键词】病毒；感冒；菊黄上清含片；死亡率；肺炎，病毒性；病理学；小鼠　　［Abstract］Objective:TostudytheeffectsofJuhuangshangqingbuccaltabletagainstinfluenzavirus.Methods:Mouseinfluenzainfectionmodelouselungspecially.Juhuangshangqingbuccaltabletsentalmiceounts,andtheirsurvivalt

2、ime,mortality,lungindex,andpathologicalchangedegreeoflungtissueonarypathologicalchanges,andreducedvirusmultiplicationandmortalityofinfluenzavirusinfectedmice.Conclusions:Juhuangshangqingbuccaltabletshaveobviouseffectsagainstinfluenzavirus.　　［Keyoncold;Juh

3、uangshangqingbuccal；mortality;pneumonia,viral；pathology；mice菊黄上清含片（JH）是由羊耳菊、甘草、黄芩、冰片四味药材经提取加工、用现代药物制剂手段研制成的口含片，具有疏风清热，解毒利咽之功效，适用于治疗热毒内蕴、挟风上扰所致咽痛、咽干灼热、吞咽不利、舌边尖红等症。处方中甘草药材中的甘草酸类化合物（甘草酸、甘草次酸）和黄芩药材中的黄酮类化合物（黄芩苷）都有较好的抗病毒作用[1,2]。为了进一步为临床应用提供实验依据，对JH的体内抗流感病毒作用进行了

4、实验研究。　　1材料与方法　　1.1药物　　JH干浸膏（批号20021016-1）由贵阳医学院药物研究开发中心提供；病毒唑，批号020705，由贵州光正制药有限公司生产；抗病毒颗粒，批号02121011，由四川光大制药有限公司生产；羊抗兔IgG荧光抗体，由晶美生物工程公司生产。　　1.2动物　　昆明种小鼠，符合国家一级实验动物标准，体重18～22g，雌雄兼用，合格证号SCXK（黔）2002-0001，由贵阳医学院实验动物中心提供。　　1.3病毒、流感病毒FM1毒株兔免疫血清　　流感病毒鼠肺适应株（FM1）

5、，由贵阳医学院免疫学教研室提供。用流感病毒FM110ml免疫家兔，10d后试血，血凝效价高于1∶640即取血，分离血清，小管分装，-80℃冻存备用。　　1.4JH对小鼠的急性毒性测定　　取小鼠40只，随机分成4组，每组10只。将JH用生理盐水稀释成2g/ml、1g/ml、0.5g/ml浓度的药液，正常对照组灌胃等容积生理盐水，给药组每只小鼠给予高、中、低浓度JH药液0.4ml/10g，灌胃2次（间隔4h），给药后观察小鼠的中毒症状及死亡情况，连续观察7d，以不产生中毒及死亡的剂量为无毒剂量[3]。　　1.

6、5流感病毒FM1的LD50测定　　取小鼠40只，随机分成5组，每组8只，留一组作正常饲养对照组，其余各组动物在乙醚轻度麻醉下，用不同稀释度10-6、10-5、10-4、10-3的流感病毒FM1滴鼻感染小鼠，每只0.05ml。感染后每日观察记录小鼠死亡数，连续观察14d，按ReedandMuench法[4]计算流感病毒FM1的LD50。　　1.6JH对流感病毒FM1致小鼠肺炎的影响　　取小鼠70只，按表1随机分成7组，每组10只；除正常对照组外，其余小鼠用乙醚轻度麻醉，以15倍LD50的流感病毒FM1滴鼻，

7、每只0.05ml。给药组按表1剂量，于感染前一天开始灌胃给药，每天1次，连续5d，正常对照组同法给等容积生理盐水。感染第6天称体重（禁水8h），处死动物，解剖取肺清洗，去除气管、肺门淋巴结等组织，用滤纸吸干水分，称重，肉眼观察肺部病变，计算肺指数和抑制率[5]。肺指数=肺重（g）/体重（g）×100，肺指数抑制率（%）=[（病毒对照组平均肺指数－试验组平均肺指数）/病毒对照组平均肺指数]×100%。　　1.8JH对小鼠体内流感病毒增殖的影响　　取小鼠50只，随机分为5组，每组10只，在乙醚轻度麻醉下，以1

8、000倍LD50流感病毒FM1感染小鼠，感染前1天，用不同浓度的受试药物和病毒唑溶液按表3剂量分别给小鼠灌胃。连续给药3d，在感染48h后，解剖取肺，固定，制成切片并脱蜡；用流感病毒FM1兔免疫血清37℃作用30min，0.01mol/LPBS(pH7.4)轻洗3次，再加1∶10的羊抗兔IgG荧光抗体37℃15min，0.01mol/LPBS(pH7.4)轻洗3次，吸干水分，荧光显微镜下计数各组小鼠细支气管内含特异性荧光抗体颗