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1、卵巢癌组织中uPA与PAI1mRNA表达及意义【摘要】目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)和纤溶酶原激活剂抑制物?1（PAI?1）mRNA在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法采用逆转录?聚合酶链反应技术,检测38例卵巢癌、21例卵巢良性上皮性肿瘤及17例正常卵巢组织中uPA及PAI?1mRNA的表达，并分析其与病理分化程度的相关性。结果uPA及PAI?1mRNA在卵巢癌中的表达水平均较卵巢良性上皮性肿瘤、正常卵巢组织显著升高(F=184.51、51.00，q=11.34～26.69,P<0.05)。在不同分化程度的卵巢癌组织中uPA及PAI?1mRNA的
2、表达量随肿瘤分化程度的降低而增加(F=110.62、38.43,q=3.10～6.86，P<0.05)。结论卵巢癌组织中uPA及PAI?1mRNA呈高表达,且与卵巢癌的病理分化程度相关。【关键词】卵巢肿瘤尿纤溶酶原激活物纤溶酶原灭活剂基因表达［ABSTRACT］ObjectiveToexploretheexpressionsandtheirsignificanceofurokinase?typeplasminogenactivator(uPA)andplasminogenactivatorinhibitor?1(PAI?1)inovariancancer.Me
3、thodsTheexpressionsofuPAmRNAandPAI?1mRNAor(n=21)andnormalovary(n=17).ResultsTheexpressionsofuPAmRNAandPAI?1mRNAinthecancertissueorandnormalovariantissue(F=184.51,51.00;q=11.34-26.69;P<0.05).AnegativecorrelationexistedbetRNAandPAI?1mRNAandthedifferentiationofthecancer,thehigherofexpr
4、essionsofuPAmRNAandPAI?1mRNA,theloRNAandPAI?1mRNAs;urinaryplasminogenactivator;plasminogeninactivators；geneexpression肿瘤细胞的浸润和转移能力与其降解细胞外基质(ECM)有关。细胞外基质降解和基膜破坏是肿瘤浸润、转移的必要条件,其中尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）系统介导的细胞外基质水解起着重要作用［1］。本研究采用逆转录?聚合酶链反应(RT?PCR)测定uPA及纤溶酶原激活剂抑制物?1（PAI?1）mRNA在卵巢癌中的表达,探讨其与临床病理分化程度的
5、关系。1资料与方法1.1一般资料2005年1月～2006年5月，收集青岛大学医学院附属医院妇科治疗的病人的标本共76例，其中17例为因子宫肌瘤行手术治疗病人的正常卵巢组织，病人年龄27～52岁，平均为46.4岁。21例为卵巢良性上皮性肿瘤组织，病人年龄21～63岁，平均50.2岁；其中浆液性乳头状囊腺瘤13例，黏液性乳头状囊腺瘤8例。卵巢恶性肿瘤组织38例，病人年龄27～67岁，平均59.6岁；其中浆液性乳头状囊腺癌26例,黏液性乳头状囊腺癌12例；依据病理分化程度,分为高分化组8例,中分化组11例和低分化组19例。从术中直接取得新鲜组织标本后,立即保存在-70℃低
6、温冰箱。每份标本都经病理检查证实。1.2方法1.2.1总RNA抽提每份冷冻标本取100mg，剪碎,加入Trizol溶液1mL裂解，按Trizol一步法抽提得到总RNA，紫外线分光光度计检测RNA浓度和纯度,放置-70℃冰箱保存。1.2.2RT?PCR反应取0.18μg总RNA,在50μL体系中扩增，引物由上海生工生物工程公司合成［2］。uPA引物序列Primer1:5′?ACTACTACGGCTCTGAAGTCACCA?3′，Primer2:5′?GAAGTGTGAGACTCTCGTGTAGAC?3′。RT?PCR产物长度为200bp。uPART?PCR条件为：50
7、℃反转录30min，95℃预变性15min；然后94℃变性1min，62℃退火1min，72℃延伸1min,30个循环；最后72℃延伸10min。PAI?1引物序列Primer1:5′?TG?CTGGTGAATGCCCTCTACT?3′，Primer2:5′?CGGTCATTCCCAGGTTCTCTA?3′。RT?PCR产物长度398bp。PAI?1RT?PCR条件为：50℃反转录30min，95℃预变性15min；然后94℃变性1min，60℃退火1min，72℃延伸1min,32个循环；最后72℃延伸10min。内对照看家基因GAPDH引物序列Primer1
