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1、p63在脂溢性角化病中的表达及意义【关键词】p63蛋白;脂溢性角化病;免疫组织化学 【Abstract】ObjectiveTostudytheexpressionofp63proteininseborrheickeratosis(SK)andtoinvestigatethecorrelationbetalskintissuesmunohistochemistry.ResultsThepositiverateofp63〔91.07%(51/56)〕inSKtissuesaltissues〔20.00%(1
2、/5)〕(P<0.01).ConclusionsTheexpressionofp63proteinisassoclatedmunohistochemistry 脂溢性角化病(SK)又名老年疣、基底细胞乳头瘤,是一种良性表皮增生性肿瘤,其病因不清。p63基因是p53基因家族的新成员,在肿瘤发生、细胞凋亡和组织发育的研究中备受关注。本文采用免疫组织化学SP法检测56例SK患者p63蛋白的表达情况,为探讨SK的发病机制提供理论依据。 1材料与方法 1.1材料56例SK标本均来自2006至2007年
3、吉林大学第二医院皮肤科,经临床表现及HE染色确诊SK,其中男性19例,女性37例;年龄28~72岁。5例对照组标本取自正常皮肤组织,其中男性3例,女性2例;年龄22~67岁。标本均经10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片厚4μm。 1.2试剂小鼠抗人p63单克隆抗体(美国SantaCruz公司),多聚赖氨酸、SP试剂盒、AEC显色液及水溶性封片剂均购自福州迈新生物技术开发公司。 1.3方法采用SP法,石蜡切片经脱蜡、水化后,PBS冲洗,柠檬酸缓冲液抗原修复20min,冷却至室温冲洗,过氧化酶(试剂A)
4、阻断内源性过氧化物酶,应用非免疫性动物血清(试剂B)封闭非特异性抗原,室温孵育30min,滴加小鼠抗人p63一抗(工作液浓度为1∶100),4℃过夜,AEC显色,显微镜下观察控制显色时间,不超过15min,苏木精复染,水溶性封片剂封片,中性树脂封固。以PBS代替一抗作为阴性对照。 1.4结果判断显微镜下观察,p63蛋白定位于细胞核,细胞核中出现清晰红色颗粒为阳性。随机选择4个高倍视野(×400),从基底层向上计数200个细胞,计算阳性细胞率,由于正常皮肤组织的基底层和棘层有少量表达,因此将阳性细胞率&g
5、t;10%认定为阳性。 1.5统计学处理采用秩和检验进行统计学分析。 作为p53家族新成员,p63基因的结构与p53基因具有较大的同源性〔3〕,p63蛋白能激活p53的相关靶基因,抑制增殖、诱导凋亡,是一种肿瘤抑制基因;p63编码的活性产物还对调节胚胎形成时外胚层的分化、各种上皮组织的正常发生与分化及维持细胞形态具有重要作用,其缺乏会引起一系列的发育畸形。因此,p63基因在肿瘤发生、细胞凋亡和组织发育的研究中备受关注。在正常皮肤组织中p63分布于表皮的基底层和棘层、外毛根鞘、毛囊的毛基质、皮脂腺和汗腺
6、的外层细胞中〔4〕。本实验研究发现在的病损中p63蛋白不仅在表皮基底层和棘层高表达,而且在颗粒层中也有表达,阳性率明显高于正常皮肤组织。提示SK作为一种良性皮肤肿瘤,p63蛋白可能与其发生发展有关,研究p63基因可能对其发病机制具有一定的意义。 p63蛋白拥有多种异构体,各种异构体蛋白在细胞周期和肿瘤发生中的作用及其与p53基因和其他相关分子的相互作用有待于进一步的深入研究。目前p63与SK的关系更是处于起步阶段,有待于进一步的深入研究。【参考文献】 1PesceC,ScaloraS.Apoptosi
7、sintheareaofsquamousdifferentiationirritatedseborrheickeratosis〔J〕.JCutanPathol,2000;27:1211. 2李澄,周红,樊小妹,等.EGF、EGFr在脂溢性角化病组织中的表达〔J〕.临床皮肤科杂志,2001;30:2256. 3YangA,KaghadM,olCell,1998;2(3):30516. 4TsujitaKyutokuM,KiuchiK,DanbaraN,etal.p63expressioninn
8、ormalhumanepidermisandepidermalappendagesandtheirtumors〔J〕.JCutanPathol,2003;30(1):117.
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