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时间:2018-05-05
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1、益肾通络颗粒澄清工艺研究作者:湛琦,刘友平,王继森,石宇华,俞佳,李准【摘要】目的研究益肾通络颗粒ZTC1+1澄清工艺。方法ZTC1+1Ⅱ型澄清剂应用于益肾通络颗粒的澄清工艺,以丹酚酸B、多糖的保留率及固形物的降低率为评价指标,优选药液浓缩比、絮凝温度及澄清剂用量,并与醇沉法进行比较。结果运用ZTC1+1Ⅱ型澄清剂除杂能有效降低收膏率,且有效成分保留率均较醇沉法高。结论ZTC1+1Ⅱ型澄清剂对益肾通络颗粒的除杂具有可行性。【关键词】益肾通络颗粒;ZTC1+1澄清剂;澄清工艺 Abstract:ObjectiveTostud
2、ytheZTC1+1clarificationprocedureofYishentongluogranule.MethodsZTC1+1Ⅱnatureclarifyingagentumclarifyingtemperature,thedensityofdecoctionandthecontentofZTC1+1natureclarifyingagententation.ResultsBesidesreducingtheyieldofdriedextract,theZTC1+1oreeffectivethanalcoholse
3、dimentationinretainingtheactivepound.ConclusionTheZTC1+1ⅡnatureclarifyingagentusedintheclarificationprocessofYishentongluogranuleisfeasible. Keyl去离子水,溶胀24h,搅拌,配制成1%粘胶液。称取B组分14.4g,加入1440ml醋酸溶液,溶胀24h,搅拌,配制成1%粘胶液。 2.2药液的制备按处方量称取600g药材,加11倍量水,煎煮3次,2h/次,滤过,合并水煎液,浓缩药液至
4、3000ml。 2.3评价指标的选择及测定丹参为本方君药,其水溶性有效成分丹参酚酸B含量较高,且具有抗血栓、抗脂质过氧化、抗糖尿病型肾病等作用,与本方的功能主治相符;同时本方药液所含的大量多糖具有增强机体免疫功能、调血脂、降血糖的作用,为有效部位。故以有效成分丹参酚酸B、多糖的保留率及固形物的降低率为评价指标综合考察本复方制剂的澄清工艺。 2.3.1丹参酚酸B含量的测定 2.3.1.1色谱条件色谱柱:HypersilODS色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇水(42∶58),水加甲醇至pH=2.5;
5、流速:0.6ml/min;检测波长:281nm;柱温:30℃;理论板数按丹参酚酸B峰计算应不低于2000。 2.3.1.2标准曲线的制备精密称取105℃干燥至恒重的丹参酚酸B对照18.80mg,置10ml量瓶中,加70%甲醇溶液解并稀释至刻度,摇匀,即得。精密吸取上述对照品溶液0.2,0.5,1.0,1.5,2ml,分别置于10ml量瓶中,加70%甲醇稀释至记得度,摇匀。分别精密吸取10μl注入高效液相色谱仪,以对照品浓度为横坐标X(μg/ml),峰面积为纵坐标Y,绘制标准曲线,得回归方程Y=19142X-16681,r=
6、0.99985。表明丹参酚酸B浓度在37.6~376μg/ml范围内与峰面积线性关系良好。 2.3.1.3供试品溶液的制备及测定将2.4.1,2.4.2,2.4.3项下的药液于离心机中5000r/min离心20min,取上清液置100ml量瓶中加蒸馏水水稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜(0.45μm)滤过,取续滤液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入高效液相色谱仪,测定。 2.3.1.4阴性对照溶液制备及测定按处方比例,取除丹参以外的其它药味,同供试品制备方法制备阴性对照溶液。结果在丹参酚酸B的出峰位置处无其它
7、干扰。 2.3.2多糖含量的测定 2.3.2.1测定波长的选择分别移取经0.2%蒽酮浓硫酸显色后的葡萄糖对照口溶液及样品供试液,以0.2%蒽酮浓硫酸溶液作空白,于400~700nm波长进行扫描,对照品溶液及样品供试液均在(625±1)nm波长有最大吸收。 2.3.2.2标准曲线的制备取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品适量,精密称定,置50ml量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,即得(每毫升含1.078mg葡萄糖)。精密吸取上述对照品溶液1,2,4,6,8,10ml,分别置50ml量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀。分别吸取
8、上述溶液5ml置量瓶中,加10ml0.2%蒽酮浓硫酸显色,摇匀,置沸水中加热6min,置冰水浴中速冷,以试剂为空白,于625nm处测定吸光度。以浓度(mg/ml)为横坐标X,吸光度为纵坐标Y,绘制标准曲线,得回归方程Y=9.5504X+0.1571,r=0.9995。表明多糖浓度在0.02
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