玉米雄性不育性基因工程研究

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1、玉米雄性不育性基因工程研究作者简介：刘大文，男，1962年12月生，1996年从师于戴景瑞教授和谢友菊教授，于1999年７月毕业于中国农业大学作物遗传育种学专业，并获农学博士学位。摘要：用Ａ９启动子的引物从拟南芥菜基因组中扩增得到一条约350bp的片段。序列分析表明，该片段为360bp，TATAbox、TGTGG、TGTGA两个Ｍotifs皆完整，与已报导序列的同源性为99.2%，表明为Ａ９启动子。该启动子能启动GUS基因在玉米花药中特异表达，GUS酶活性为１.７２nm.min-1.mg-1.protEin。以Ｚm13启动子、Ａ９启动子、Barnase基因、Barstar基

2、因、抗除草剂基因35S-Bar-nos3'构建雄性不育基因表达载体pZMSBAR、pABBN和恢复基因表达载体pZRFBAR。用pUC18替换pBBN的骨架，得到较小的表达载体pUBBN。用基因枪将不育基因Zm13-Barnase(pZMSBAR)转化玉米愈伤组织，再生出40多个株，其中24株移载成活并生长发育至成熟，７个植株结实。PCR扩增表明16个植株呈阳性。I-KI染色观察和花粉离体萌发表明，有５个植株花粉部分不育。Southernblot分析证实这５个植株中整合了Barnase基因。用基因枪将不育基因TA29-Barnase(pUBBN)和A9-Barnase(pA

3、BBN)转化玉米愈伤组织，再生出２０多个植株，各对其中的６个植株进行PCR扩增，分别有３个和２个植株出现0.35kb的特异扩增带。关键词：玉米启动子遗传转化基因表达雄性不育TOPB2．论文题目：野生二粒小麦抗白粉病基因分子标记定位和抗病基因标记辅助选择研究作者简介：刘志勇，男，1965年生。1996年从师于孙其信教授和杨作民教授，于1999年毕业于中国农业大学植物遗传育种专业，并获农学博士学位。摘要：本文应用DNA分子标记技术首次对一个来自野生二粒小麦C20的抗白粉病基因进行了标记定位研究，建立了该抗病基因紧密连锁的分子标记Xg159/440-500，将该基因及其连锁的标记

4、位点定位于5BS染色体臂，并物理定位于该染色体臂基因富集和重组热点的FL0.41-0.43区域，为这一抗病基因的精细定位、定位克隆和标记辅助选择等进一步遗传操作奠定了基础。本文通过对RAPD标记的克隆和序列测定，建立了Pm21基因的SCAR标记SCAR1400和SCAR1265，并用此标记对抗白粉病育种群体中的Pm21基因进行了分子标记检测。此外，利用DNA标记对抗白粉病育种群体中的Pm21、Pm13和来自野生二粒小麦C20的抗白粉病基因进行了标记辅助选择研究，配制了含有两个抗白粉病基因的基因积累杂交组合，为实行小麦白粉病抗源的多样化和抗性持久化奠定了基础。关键词：小麦白粉

5、病，野生二粒小麦，簇毛麦，分子标记，标记辅助选择TOPB3．论文题目：小麦RAPD分子标记遗传差异及杂交种与亲本间基因差异表达研究作者简介：倪中福，男，1972年生，1996年师从孙其信教授,1999年7月毕业于中国农业大学作物遗传育种专业，并获农学博士学位。摘要：利用RAPD分子标记研究发现，斯卑尔脱小麦和西藏半野生小麦群体中存在较大的遗传变异，而且与普通小麦之间有较大的遗传差异，利用它们可以丰富杂交小麦亲本的遗传基础，扩大亲本的遗传差异。mRNA差异显示结果表明，小麦杂交种和亲本间基因表达发生了显著的改变，但差异表达程度与发育时期和器官有关。超亲表达基因以及杂种被抑制的

6、基因可能在小麦杂种优势形成中起重要作用。另外，MADS-box、GBFs和ser/thr蛋白激酶家族基因可能对小麦杂种优势形成有重要贡献。对4个差异表达基因(4B、AM1、GG3和AG5)进行了克隆测序分析，结果表明:1)4B和AM1为新基因;2)AG5为一新的RNA结合蛋白基因；3)GG3为17s或18s核糖体RNA基因。其中4B、AG5和GG3经Northern杂交证明在小麦杂交种和亲本间存在差异表达，并且与mRNA差异显示结果相吻合。关键词：小麦；RAPD标记；遗传差异；mRNA差异显示；基因表达；MADS-box；GBFs；ser/thr蛋白激酶；RNA结合蛋白；核

7、糖体RNATOPB4．论文题目：两系杂交水稻优势生态型及亲本籼粳差异与杂种优势的关系研究作者简介：姜廷波，男，1965年生，1996年从师于王象坤教授，于1999年7月毕业于中国农业大学植物遗传育种专业，并获农学博士学位。摘要：本研究利用58份水稻亲本材料，及216个杂交组合。研究供试品种（系）及杂种一代的籼粳分化程度、一般配合力和特殊配合力与双亲籼粳分化的关系、不同类型品种（系）作为两系杂交稻恢复系的利用价值。结果表明，①多数供试材料在分子水平上的籼粳分类与形态上的籼粳分类相一致，但也有个别供试材料不一致。两种分