微波辐射性雄小鼠生殖功能障碍的中医证候研究

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1、微波辐射性雄小鼠生殖功能障碍的中医证候研究微波辐射性雄小鼠生殖功能障碍的中医证候研究微波辐射严重地危害着人们的健康。生殖系统是微波辐射敏感的靶器官,持续地微波辐射可以导致男性不育症[1]。中医药对微波辐射导致的男性不育症有很好的防治作用[2-4],但目前大多是应用单方对症治疗。辨证论治是中医理论与临证实践的完美结合,与单方对症治疗相比辨证论治能解决更复杂的临床问题,因此微波辐射导致的男性不育症的中医证候学研究意义重大。本课题组曾对具有微波辐射职业暴露史之男性不育症患者进行症状观察及证候分析,探讨了其中医证候特点

2、,发现随着辐射时间延长,患者最终表现为肾精亏虚证[5,6],但由于男性不育症病因复杂,这些患者除微波损伤外,还可能存在其他病因,因此,微波辐射职业暴露患者表现出的证候并不单纯,其证候往往不是本文由.LHz连续微波中,功率密度为10m2,辐射18d,每天辐射1h[7]。将基准造模的80只小鼠分为8组,即:①基对组10只,生理盐水分别灌胃。②基金组10只,金匮肾气丸分别灌胃。③基左组10只,左归丸分别灌胃。④基十组10只,十全大补丸分别灌胃。⑤基龙组10只,龙胆泻肝丸分别灌胃。⑥基柴组10只,柴胡疏肝散分别灌胃。⑦

3、基少组10只,少腹逐瘀汤分别灌胃。⑧基苍组10只,苍附导痰汤分别灌胃。  加功造模分组研究:选小鼠80只,增加功率密度进行造模,即在基准造模其他条件不变基础上,将其功率密度增至为40m2。将加功造模的80只小鼠分为8组,即:①功对组10只,生理盐水灌胃。②功金组10只,金匮肾气丸分别灌胃。③功左组10只,左归丸分别灌胃。④功十组10只,十全大补丸分别灌胃。⑤功龙组10只,龙胆泻肝丸分别灌胃。⑥功柴组10只,柴胡疏肝散分别灌胃。⑦功少组10只,少腹逐瘀汤分别灌胃。⑧功苍组10只,苍附导痰汤分别灌胃。  加时造模分

4、组研究:选小鼠80只,增加辐射时间进行造模,即在基准造模其他条件不变基础上,将其辐射时间增至每天4h。将加时造模的80只小鼠分为8组,即:①时对组10只,生理盐水分别灌胃。②时金组10只,金匮肾气丸分别灌胃。③时左组10只,左归丸分别灌胃。④时十组10只,十全大补丸分别灌胃。⑤时龙组10只,龙胆泻肝丸分别灌胃。⑥时柴组10只,柴胡疏肝散分别灌胃。⑦时少组10只,少腹逐瘀汤分别灌胃。⑧时苍组10只,苍附导痰汤分别灌胃。22小鼠精子参数测定及睾丸病理变化  取上述小鼠脱颈处死,先用电子天平测重并记录,迅速剖开附睾及

5、附睾管,用01mL生理盐水冲洗,滴于2份载玻片上,1份用YTD-2002系列医学影像工作站精子检测仪检测精子活率,另1份伊红染色,观察畸形精子,计算畸形率。对各实验组小鼠进行精子总活率(PR+NP)、快速向前精子率(PR)和精子畸形率测定。  取上述小鼠睾丸(每只小鼠各取1只),先用电子天平测重并记录,以便之后计算睾体比;之后迅速将睾丸置于10%福尔马林中,固定24h,石蜡包埋,HE染色,切片,光镜观察组织形态学改变。  对小鼠精子PR+NP、PR、精子畸形率、睾体比及睾丸病理学改变进行比较。首先对基准造模、加

6、时造模、加功造模及平行对照组之间的疗效进行比较研究,以判断不同辐射量对小鼠生殖功能影响程度;之后,对基准造模、加时造模、加功造模各组组内及组间进行比较研究,判断有疗效的组分,以确定证候。  23统计学方法  所有数据均采用Stata120版统计软件进行分析,各组检测结果以(±s)表示。多样本比较,首先采用方差分析,在方差分析中,通过bartlett的卡方值来检验等方差假设,然后再用kruskal-es;200)图2基对组(HE,200)图3基苍组(HE,200)图4基柴组(HE,200)图5基金组

7、(HE,200)图6基龙组(HE,200)图7基少组(HE,200)图8基十组(HE,200)图9基左组(HE,200)加时对照组小鼠睾丸精原细胞肿胀,偶见精原细胞溶解、消失。可见较多的精母细胞完全变性、坏死、脱落,结构正常的精母细胞也可见连接松散,失去正常的细胞序列,出现细胞排列紊乱,精细胞变性、坏死、脱落,精子极少,多数生精细胞管腔内无精子细胞存在(图10)。时金组小鼠睾丸的生精小管界膜基本完整平坦,生精小管内可见成熟精子,各类生精细胞排列较为整齐,层次较为清楚,间质细胞结构基本正常(图13);时苍组(图1

8、1)、时柴组(图12)、时龙组(图14)、时少组(图15)、时十组(图16)、时左组(图17)未见明显改善。加功对照组小鼠睾丸的精原细胞也出现肿胀,也可见溶解、消失。精母细胞完全变性、坏死、脱落,结构正常的精母细胞也可见连接松散,失去正常的细胞序列,出现细胞排列紊乱,精细胞变性、坏死、脱落,偶见精子,多数生精细胞管腔内无精子细胞存在(图18)。功金组小鼠睾丸的生精小管界膜基本完整平坦,

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