同种异体神经移植处置入bfgf复合降解膜的实验研究

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1、同种异体神经移植处置入bFGF复合降解膜的实验研究作者:吴锦生,辛畅泰,杨晓霞,徐媛,魏侃,安贵林,曹阳【关键词】神经移植  [摘要]目的探讨在异体神经移植处置入bFGF(basicfibroblastgro后,移植经冷冻处理的同种异体坐骨神经移植物。A组神经移植物经bFGF处理并在移植处置入bFGF复合降解膜,B组移植物不经bFGF处理,移植处置入不含bFGF的降解膜,C组移植物不经bFGF处理,移植处不置入降解膜。术后90、180d行电生理、组织学、血―神经屏障等各项指标观测。结果A组再生有髓神经纤维的数量和直径明显较B、C组的多而粗(P<0.0

2、5),结缔组织增生较少,血―神经屏障恢复和电生理指标均优于B、C组。结论bFGF复合降解膜有提高同种异体神经移植再生的作用。  [关键词]神经移植;同种异体移植物;bFGF;神经再生  ResearchontheeffectofbFGFpounddegradationmembranetoallograftofnerves  Abstract:ObjectiveTopromoteregenerationeffectbyplacingbFGFplexdegradationmembraneotingnerveregenerationandinhibitingco

3、nnectivetissueproliferationintransplantationsiteofxenogenEicnerve.Methods60ratsaredividedintogroupA,BandC.Allrats'2cmofsciaticnervecuttedoffinleftlob.Thenervesegmententembraneaftertransplanted.GroupB:nervesegmentembranenotcontainingbFGF.GroupC:nervesegmentountanddiameterofsheathed

4、nervefiberoutnumberedthatingroupBandC(P<0.05).Theconnectivetissueproliferationightpromotenerveregenerationbyinterferingconnectivetissueproliferationoteregenerationofallograftofnerve.  Keyg/kg腹腔麻醉,左大腿术区剃毛、消毒,显露坐骨神经,切除2cm神经段,切除的神经段经20%甘油盐水浸泡15min后,-80℃冷存10d,作为移植供体。将供体神经段在移植前复温,移植

5、到神经缺损处。A组供体神经段先经含bFGF和降低维生素C浓度试剂的生理盐水浸泡15min,再移植,并在缝合处包裹bFGF复合降解膜;B组和C组供体神经段移植前用生理盐水浸泡15min,B组在缝合处包裹不含bFGF的降解膜;C组不包裹降解膜。  1.3观察指标  1.3.1镜下观察取术后90d和180d的移植部位神经,分成近段(正常神经部位)、移植段、远段(神经再生部位)和神经远、近端缝合段等五个部分,制成不同标本。①锇酸髓鞘染色切片观察及显微图像分析测定A、B和C组有髓神经纤维的形态结构、数量和直径等差异;②透射电镜观察再生神经超微结构的变化;③连续切片M

6、allory和H.E染色观察各组一般组织结构尤其是结缔组织增生程度的差异。  1.3.2血―神经屏障HRP示踪按照Olssony的方法[1],在神经移植段远侧部位的神经外周注入30%HRP(sigmaⅡ型)溶液后1h,切取标本,制成20μm厚的切片,HRP分布处呈棕黄色反应。观察各组血―神经屏障功能恢复的差异。  1.3.3神经近端缝合段周粘连测定按汤绵波等[2]的方法,测定术后90d各组神经近端缝合段与其外周组织粘连程度的差异。  1.3.4电生理指标测试测定术后180d各组腓肠肌,显示潜伏期和波幅的变化,了解其神经传导速度和有效神经纤维数,从而对比神经

7、再生效果。  观测数据经t检验和方差分析。  2结果  2.1镜下观察  髓鞘染色可见有髓神经纤维的髓鞘呈黑色。术后180d,A组移植段和远段纤维的数量明显较B、C两组多而粗,髓鞘着色也较深(图1a、b、c),A组神经远、近两段的有髓纤维数量相似,直径差异明显。B、C组的神经远段有髓纤维数量明显较其近段的少。B、C组移植段和远段的近中央部位多出现变性、坏死、脂肪化和结缔组织增生(图1d),A组仅见轻度结缔组织增生,A组远、近端缝合段外周结缔组织增生也明显较B、C组的轻。  a:A组神经远段(×100);b:B组神经远段(×100);c:A组移植段(×200

8、);d:B组移植段(×200)  图1术后180d锇酸髓鞘染色(略

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