犬同种异体椎间盘移植的动物实验研究

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1、分类号密级ＵＤＣ编号—硕壬学位论文犬同种异体椎间盘移植的动物实验研巧Ａｎａｎｉｍａｌｓｔｕｄｙｏｆａｌｌｏｇｒａｆｔｉｎｔｅｒｖｅｒｔｅｂｒａｌｄｉｓｃ化ａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎｄｏｇｍｏｄｅｌ＾导师姓名阮狄克教授、专化名巧骨夕Ｉ科学培养类型学术型论文巧交日巧２０１５年３月２０日南方医科大学２０１２级硕±学位论文犬同种异体椎间盛移植的动物实验研究Ａｎａｎｉｍａｌｓｔｕｄｙｏｆａｌｌｏｇｒａｆｔｉｎ化ｒｖｅｒｔｅｂｒａｌｄｉｓｃ化ａｎｓｌａｎｔａ

2、村ｏｎｉｎｄｏｇｍｏｄｅｌｐ７４０课题来源：８１１７１：国家自然科学基金面上项目（编号）学位申请人李浩导师姓名阮狄克教授专业名称骨外科学培养类型学术型培养层次硕壬研究生所在学院第王临床分姿会附属海军总医院答辩委员会主席孙天胜教授答辩委员会委员何勃教授郭勇教授陈昭烈教授李进让教授周丽君教授２０１５年５月１２日北京２硕壬学位论文犬同种异体椎间盘移植的动物实验研究硕壬研巧生：李治指导老师：阮狄克教授摘要背景椎间盘退变引起的下腰痛（ＬｏｗＢａｃ

3、ｋＰａｉｎＬＢＰ）己经成为影响人类正常生一活最主要的职业性疾病之。近年来，许多国家报道每年用于该类疾病的治疗及预防的经费已经对其造成了巨大的经济负担，因此针对椎间盘退变的研究具有十分重要的意义。椎间盘退变有许多病理学表现，如髓核组织水分丢失、纤维环变性破裂，终板损伤等。目前的主要研究认为椎间盘退变的最终途径是营养通道的缺失，而椎间盘内的营养物质几乎都来自于终板血管的弥散作用。目前关于基因、细胞等治疗方式的研究主要着重于修复退变的髓核組织，且主要适用于早、中期退变的患者，并未针对主要影响椎间盘营养弥散功能的终板进行研巧。近５０年来，同种一异体椎间

4、盘移植技术作为种新的治疗方法，己在部分动物实验和临床治疗中开展，对于移植术后椎间盘营养功能的变化情况目前，且取得了良好的疗淑然而仍不清楚。ｎａｍ－动态对比増强核磁共振（ＤｙｉｃＣｏｎｔｒａｓｔｅｎｈａｎｃｅｄＭａｇｎｅｔｉｃ民ｅｓｏｎａｎｃｅＩｍａＤＣＥ－ｉｎ，ＭＲＩ）在增强造影剂的辅助下可Ｗ获得组织的灌注及血流情况，ｇｇ目前己在各个器官良恶性肿瘤的鉴别得到广泛应用一些动物及人体试验中。近期也证明了其在观察椎间盘弥散功能状态的有效性及可行性。目的一１．通过建立犬同种异体椎间盘模型，研究并描述种在无内固定辅助条件下建立犬同种异体椎间盘移植模型的

5、手术技术。２ＣＥ－ＭＲＩ技术及病理学观，．利用Ｄ察对移植术后动物进行随访观察移植椎Ｉ摘要间盎内弥散功能状态的动态变化，探讨其生物功能的变化情况。方法：－－ｋ）１．选取１岁龄健康杂种犬２５只，（１０１５月龄，１０１４ｇ，雌雄不限，进行ｍｎＸ线及ＭＲＩ对椎间盘整体情况进行评价，通过Ｐｆｉａｎｎ分级筛选出无明显脊柱崎形。，椎间盘整体情况良好的动物作为实验对象－２．注射过量戊己比妥钢处死其中的５只犬，在无茜条件下取Ｌ１Ｌ６椎间盘‘‘－共２５个放入预先配置好的冻存液中，逐级冻存，步骤为４ＣＵ２ｈ）、２０Ｃ（２ｈ）、’’－－４０Ｃｈ－。口）、８０Ｃ

6、（２ｈ），最后放入液氮中保存剩余２０只犬用于建立Ｌ５Ｌ６椎间盘移植模型的研究。３．术前、术后１、４、６、８、１２周进行腰椎正侧位Ｘ线检查，观察移植椎间盘的位置队及与相邻椎体的愈合情况，测量术后各时间点椎间盘高度数值，Ｗ苗Ｓ表示，并采用方差分析（ＡＮＯＶＡ）分别与术前测量的椎间盘高度进行对比。ＷＰ＜〇．〇５为有统计学差异。－４．术后４、８、１２、２４周对移植成功的动物进行ＤＣＥＭＲＩ观察，每次扫描的时间点为静脉注射造影剂（０．３ｍｍｏｌ／ｋｇ）后０ｍｉｎ，２ｎｉｉｎ、５ｍｉｎ、１０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、９０ｍｉｎ、１２０ｍｉｎ、１５

7、０ｍｉｎ、１８０ｍｉｎ、２１０ｍｉｎ、２４０ｍｉｎ，扫描序列为ＴＩＦＳＥ，３．０Ｔ。选取椎间隙上下椎体、上下终板区域及髓核五个区域的感兴趣区间，对感兴趣的间隔不同时间点测量感兴趣区域（ＲｅｇｉｏｎＯｆ虹ｔｅｒｅｓｔＲＯＩ）的信号－强度值，，并计算増强率。根据结果绘制各感兴趣区间的时间信号増强率曲线。观察各曲线的变化特点，并对其进行分析５．术后１２周、２４周处死半数实验动物，获得移植节段椎间盘及上下约５ｍｍ’ｒｅｎｉ的椎