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时间:2018-05-04
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1、血清K、Na、Cl在生化分析仪上的应用及评价作者:邢喜龙,宋丽芳,张理华【关键词】血清K、Na、Cl 在生物化学检验中,电解质检验是各类型医院里常用的分析项目,常用于观察患者体内的电解质平衡状态,判断是否存在电解质紊乱,临床常见的有低钠血症,高钾血症、高氯性酸中毒等电解质紊乱。由于钾钠以前不能直接上生化分析仪测定,只能用其他仪器检测,给生化检验带来了很大的不便。现有北京九强公司推出的英国RANDOX公司钾酶法测定试剂盒,可以直接在全自动生化分析仪上进行测定。我们利用钾钠酶法试剂和氯硫氰酸汞试剂在全自动化分析仪上测
2、定,并和离子选择电极法进行了比较,取得满意效果,现报道如下。 1 资料与方法 1.1 仪器 日本产OLYMPUSAU640型全自动生化分析仪瑞士产AVL9180型电解质分析仪。 1.2 试剂 血清钾酶法试剂盒英国RANDOX公司血清钠酶法试剂盒英国RANDOX公司;血清氯硫氰酸汞比色法试剂盒北京中生公司;AVL9180型电解质分析仪试剂瑞士罗氏公司。 1.3 标准液 血清K、Na、Cl使用RANDOX标准品。标准1:K+2.99mmol/L;Na+120.8m
3、mol/L;Cl-80mmol/L。标准2:K+7.03mmol/L;Na+160.4mmol/L;Cl119.2mmol/L。 1.4 方法 1.4.1 参数设定 K样本量6μl;试剂(R1)200μl,试剂(R2)80μl;波长(λ)340nm;方法:两点法;负反应;读数时间第一点为15,第二点为27。Na样本量8μl;试剂(Rl)200μl,试剂(R2)80μl;波长(λ)410nm;方法:两点法;正反应;读数时间第一点为13,第二点为20。C1样本量2μl;单试剂200μl波长(λ)48
4、0nm:方法:终点法;正反应;读数时间第一点为0,第二点为3。 1.4.2 选择AU640型全自动生化分析仪3AB定标,以去离子水为第1点标准,RANDOX标准1为第2点标准,标准2为第3标准;AVL9180电解质分析仪按使用说明定标与测定。 2 结果 2.1 精密度 取正常浓度混合血清分别测定,连续测定20次,测得批内CV如下。钾:4.2mmol/L;s:0.55mmol/L;CV:1.3%。钠:134.2mmol/L;sd:3.36mmol/L;CV:2.5%。氯X:96mmol/L;s:
5、2.11mmol/L;CV:2.2%。 2.2 相关试验 随机取20份标本血清分别在OLYMPUS生化分析仪和在AVL电解质分析仪测定钾、钠、氯,并做相关性分析,回归方程为:钾Y(酶法)=1.04X-0.18,r=0.995;钠Y(酶法)=0.962X0.1,r=0.990;氯Y(酶法)=0.978X+0.2,r=0.988。 2.3 两组数据做配对t检验 Kt=0.28,NAt=1.2,CLt=0.47;n=20,t0.05=1.725,t 2.3 稳定性试验
6、将钾钠氯试剂打开后,测定高低值质控血清,测定完毕后将试剂盖好放入冰箱保存,连续测定20d高低值质控CV小于2%。将钾钠氯试剂打开放置于生化仪试剂仓内,钾氯试剂连续测定高低值质控血清10d,结果质控高低值CV均<2%。第11天质控结果开始逐渐升高,重新定标后结果才能正常。钠试剂放置于生化仪试剂仓内,连续测定高低值质控血清3d,结果在第3天就有下移现象且偏差>6%,在重新定标后结果才能正常。 3 讨论 从以上相关试验看,以离子选择性电极法为X坐标,以生化仪比色法为Y坐标,与离子选择电极法有较好的一致性,
7、通过配对数据t检验比较,两者差异无显著性,是一种可行的方法。如果在有试剂仓的大型生化分析仪上使用时,钾试剂和氯试剂在试剂仓内较稳定,可长期使用。但每次复溶配制试剂和新旧试剂混合时必须进行重新定标,以保证结果的准确性。钠试剂在试剂仓内不够稳定,必须经常定标才能使用,以保证结果的准确性。血清钾钠氯检验常用的测定方法有火焰光度法和离子选择电极法,其中氯有硫氰酸汞比色分析法,可以上全自动生化仪检验[1]。而钾钠由于其方法学复杂,不能上生化分析仪检验,只能使用火焰光度法在火焰光度计或用离子选择电极法在专用的离子选择电极仪上检
8、验,以致电解质项目的检验需要在几个不同的仪器上检验,然后把数据集中到一起报告结果,给生化检验工作带来很大不便。自从1989年Berry等研制成功利用钾依赖性丙酮酸激酶(PK)可催化PEP转化为丙酮酸而建立了酶藕联连续测定血清钾和后来研制的利用钠依赖性β半乳糖苷酶水解ONPG生成乳糖和对硝基苯酚的反应而建立了酶藕联连续测定血清钠之后,使得血清钾钠上生化分析仪检
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