三叶木通指纹图谱研究

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1、三叶木通指纹图谱研究【关键词】指纹图谱；,,三叶木通；,,川木通；,,高效液相色谱　　摘要：目的应用反相高效液相色谱（RPHPLC）建立三叶木通指纹图谱。方法HypersilODS柱，H2O与CH4梯度洗脱，流速：1ml/min,柱温：20℃，检测波长：215nm。结果建立了HPLC指纹图谱共有模式，并应用此共有模式对五叶木通和川木通进行了相似度比较。结论三叶木通药材中各成分均得到很好分离，可作为三叶木通药材专属性指纹图谱。　　关键词：指纹图谱；三叶木通；川木通；高效液相色谱　　StudyonHPLCFi

2、ngerprintChromatographyofAkebiatrifoliata(Thunb.)Koidz　　Abstract：ObjectiveToapplyRPHPLCtobuiltthefingerprintofAkebiatrifoliata(Thunb)Koidz.MethodsHypersilODScolumnixturesofethanolasmobilephaseinagradientmode.Theflol/min.Thetemperatureofcolumn.ResultsAfter

3、thenutualmodeofHPLCfingerprintilardegreetothecrudedrugsofAkebiaquinata(Thunb.)Dee.andClematismontanaBuch.Ham.hadbeencarriedon.ConclusionAccordingtotheselectedchromatographicconditions,agoodfingerprintofAkebiatrifoliata(Thunb)Koidzhasbeendescribed.Themetho

4、dissimple,accurateaybepracticalvalueforthequalitycontrolofsampleforAkebiatrifoliata(Thunb)Koidz.　　Keyatography;Akebiatrifoliata(Thunb)Koidz.;ChuanMutong;HPLC　　木通科植物三叶木通Akebiatrifoliata(Thunb)Koidz.的干燥藤茎味微苦、性寒，清热、利尿、活血通脉，有止痛、杀菌、消炎、利尿之功效，是中药木通的主要药源［1~3］。关木通

5、用药标准被取消后，三叶木通作为药材木通已在市场上逐渐恢复使用。因此，建立木通药材有效的质量评价方法，对不同产地三叶木通的质量进行全面而系统的研究，确保其质量的稳定，直接关系到木通相关药品和临床处方的疗效。近年来，指纹图谱技术被用于中药的质量控制，其优点在于可全面反映中药复杂的化学成分及其相对比例，在大多数中药有效成分尚未阐明的情况下，仍可有效地表征中药质量［4］。本文采用反相高效液相色谱法，建立三叶木通的指纹图谱，并对药材木通的主要源植物三叶木通、五叶木通进行了比较研究，同时将药材木通的典型指纹谱与川木通

6、的指纹谱进行了比较，为木通的质量控制提供有效方法。　　1器材仪器　　　Agilent1100系列高效液相色谱仪，配备紫外检测器及自动进样装置；HypersilODS柱(4.6mm×250mm，5μm)，系列号USLO009043；隆达HF5.0B超声循环提取机（北京弘祥隆生物技术开发有限公司）。试剂　甲醇（色谱纯），FisherScientificUKLimited；乙腈（色谱纯），FisherScientificUKLimited；重蒸馏水；其余试剂均为分析纯。材料　13个三叶木通样品、2个五叶木通样品

7、和2个川木通样品（表1），经四川农业大学杨文钰教授鉴定分别是木通科木通属植物Akebiatrifoliate(Thunb.)Koid.，木通科木通属植物Akebiaquinata(Thunb.)Dee.，毛茛科铁线莲属植物ClematisarmandiFranch。　　表1样品来源（略）　　2方法　　2.1供试品溶液的配制采自各地的三叶木通、五叶木通和川木通多年生茎，60℃烘干，粉碎过40目筛，称取5.000g，50%乙醇50ml、功率1200in后过滤，再加50ml超声10min，合并提取液，70℃减压

8、浓缩至干，加甲醇溶解并定溶至25ml备用。　　2.2色谱条件的确定根据提取液的紫外扫描图知三叶木通乙醇提取物在203nm具有最大吸收，因此在此检测波长下对提取液进行了色谱条件的选择，但发现此波长下进行梯度洗脱时基线漂移严重。通过反复多次实验，最终确定的色谱条件为：流动相：甲醇A，水B，梯度洗脱程序见表2。检测波长：215nm柱温：20℃流速：1ml/min在以上色谱条件下的色谱图见图1。　　2.3方法学考察取012号样品的供试