千层金叶片化学成分初步研究

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1、千层金叶片化学成分初步研究千层金叶片化学成分初步研究千层金（Melaleucabracteata）属桃金娘科白千层属，又名黄金香柳、黄金宝树，为常绿小乔木或灌木。千层金生长快，适生范围广，分枝性强，耐修剪，且株型直立，枝条柔软细长，叶片全年呈金黄色或鹅黄色。作为一种不可多得的色叶树种，千层金在园林上的应用越来越广泛。千层金叶片富含植物精油，芳香宜人，具有很强的杀虫和杀螨效果[1]。此外，千层金还具有重要的药用保健价值。在南非，当地人用千层金缓解头疼，还用其作为烹饪时包裹食物的材料，或加工成床席[2-4]。　　目前，关于千层

2、金的研究主要集中在栽培技术、组织培养方面，而对其化学活性成分方面的研究只有少量报道，且多集中在精油方面。千层金叶片中所含有的化学成分比较复杂，种类繁多，至今还未见有关千层金叶片化学成分系统研究的报道。该研究对千层金叶片中各类化学成分进行定性分析，初步确定千层金叶片中可能含有的化学成分种类，并对其总多酚、总黄酮以及总多糖活性成分进行了定量分析，旨在为千层金的进一步研究和开发利用提供依据。　　1材料与方法　　1.1试验材料　　1.1.1样品。千层金叶片取自福建农林大学，选取无机械损伤、无病虫害千层金枝条，洗净晾干后，将叶片采下

3、，冻干，粉碎，过40目筛，于-20℃下保存备用。　　1.1.2试剂。乙醇、乙酸乙酯、石油醚（沸程60～90℃）、盐酸、氢氧化钠、茚三酮、硫酸铜、α萘酚、三氯化铁、铁氰化钾、香草醛、溴酚蓝、浓氨水、氯仿、浓硫酸、醋酸镁、硼酸、硅钨酸、氢氧化钾、盐酸羟胺、3，5-二硝基苯本文由.LB3basic振荡器（IKA公司，德国），HYGB摇床（苏州培英试验设备有限公司）、SCIENTZIID超声波细胞粉碎机（宁波新芝生物科技股份有限公司）等。　　1.2研究方法　　1.2.1样品供试液制备。　　1.2.1.1水供试液。称取千

4、层金叶片粉末30g于锥形瓶中，加入300ml蒸馏水，于摇床振荡（30℃，180r/min）提取24h后，再超声提取2h（300l95%乙醇，于摇床振荡（30℃，180r/min）提取24h后，再超声提取2h（300l5%盐酸，充分搅拌后过滤，所得滤液即为酸水供试液，检测生物碱。　　（3）乙酸乙酯供试液。将（2）中酸水解不溶的部分用30ml乙酸乙酯溶解，然后用30ml5%NaOH溶液振摇洗涤2次，弃去碱水层。乙酸乙酯层继续用蒸馏水洗至中性，弃去水洗层，将剩余液体减压旋蒸除去乙酸乙酯后，用15ml95%乙醇进行溶解，得到乙酸乙

5、酯供试液，检测香豆素、内酯、强心苷等物质。　　1.2.1.3石油醚供试液。称取千层金叶片粉末30g于锥形瓶中，加入300ml石油醚（60～90℃），于摇床振荡（30℃，180r/min）提取24h后，再超声提取2h（300l，即得石油醚供试液，检测挥发油、油脂类物质。　　1.2.2化学成分预试验。采用试管法和纸色谱法，根据各供试液可能含有的化学成分类型，选择经典的特异显色反应、沉淀反应等，对千层金叶片中的化学成分进行定性分析。　　1.2.3总多酚、总黄酮和总多糖含量测定。　　1.2.3.1总多酚含量测定。标准曲线绘制：采用

6、FolinCiocaheu法[5]。精密称取干燥至恒重的没食子酸5.0mg，用水溶解定容至100ml，即为没食子酸标准溶液。分别精确吸取没食子酸标准溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0ml于棕色容量瓶中，加蒸馏水至11ml，并以蒸馏水为对照。然后，分别依次加入FolinCiocaheu试剂1ml、75g/LNa2CO3溶液8ml，摇匀，在室温下避光静置1h，于760nm处测定吸光值。以吸光值为纵坐标、相应没食子酸浓度为横坐标绘制标准曲线。标准曲线方程为y=94.0300x+0.0100，R2=0.996。样品

7、总多酚含量的测定：称取千层金叶片粉末4.00g于锥形瓶中，加入40ml50%乙醇水溶液，超声（300olish反应　　与浓硫酸接触面有紫红色环产生+　　酚类、鞣质三氯化铁试验溶液呈蓝绿色+三氯化铁-铁氰化钾试验滤纸片上斑点呈蓝色+　　明胶试验有白色沉淀产生+间二苯酚、间苯三酚化合物香草醛-盐酸反应斑点呈现不同程度红色+　　有机酸pH试纸试验呈酸性+溴酚蓝试验呈蓝色背景黄色斑点+皂苷　　泡沫试验　　极少泡沫产生，静置几分钟后泡沫消失-　　注：表中+表示正反应，-表示负反应。下同。　　2.2总多酚、总黄酮和总多糖含量测定结果试

8、验结果表明，千层金叶片干样中总多酚含量为43.56±0.76mgGA/g，总黄酮含量为11.34±0.20mgRT/g，总多糖的含量为16.13±0.32mgGC/g。表2乙醇提取液检测结果　　供试液检测成分检查方法试验现象判定结果乙醇供试液酚类、鞣质三氯化铁-