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时间:2018-05-03
《酪氨酸酶抑制剂对生育期雌性大鼠的抗生育效应研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、酪氨酸酶抑制剂对生育期雌性大鼠的抗生育效应研究作者:钟兴明钟依平齐诠韦相才【摘要】目的:动物实验观察酪氨酸酶抑制剂对生育期雌性大鼠的抗生育效应。方法:将90只检查阴栓为阳性的小鼠随机分为3组,每组30只。低剂量组每日灌胃大豆异黄酮40mg.kg-1.d-1;高剂量组每日灌胃大豆异黄酮80mg.kg-1.d-1,正常对照组每日灌胃等量生理盐水。于D4观察囊胚和胚胎个数,D6观察着床胚胎数,D20剖腹检查活胎数。结果:D4正常对照组、低剂量组和高剂量组的囊胚发育率分别为84.8%(106/125),65.63%(84/128),62.
2、4%(78/125)。D6正常对照组、低剂量组和高剂量组的平均着床胚胎数分别为5.25个,1.71个和1.33个。D20剖宫取胎,正常对照组、低剂量组和高剂量组的平均活胎数分别为4.6个,0.9个和0.7个。3组相比较,正常对照组的囊胚发育率、平均着床胚胎数和平均活胎数显著高于低剂量组和高剂量组(P<0.05)。结论:大豆异黄酮作为一种酪氨酸酶抑制剂,可抑制生育期的雌性小鼠胚泡的发育和胚胎着床,但具体剂量和机制需进一步深入研究。【关键词】酪氨酸激酶;大豆异黄酮;抗着床酪氨酸激酶(tyrosineprotEinkinase,PTKs
3、)是一组酶系,是在正常和异常增殖过程中起重要作用的癌蛋白和原癌蛋白家族中的成员。多种生长因子包括表皮生长因子(EGF)、血小板源生长因子(PDGF)和胰岛素样生长因子(IGF)的受体都有PTKs活性。PTK途径的激活属于与细胞的生长、增殖和分化有关的信号途径。目前,PTK抑制剂在医学上的应用主要是抗肿瘤。近来研究还发现PTKs的活性与非肿瘤细胞的生理活动有关,许多PTKs抑制剂能影响正常细胞的功能和机能,在这一方面研究较多的是一些发现较早的天然化合物如染料木黄酮(genistEIn,GST)、herbimycinA和lavendu
4、stinA。大量的研究已证实,GST在防治癌症、降低血脂、妇产科的激素替代治疗、激素依赖性肿瘤的防治方面有着广阔的应用前景[1],但对于抗生育方面的研究较少。本研究通过小鼠动物实验观察大豆异黄酮对青年雌性大鼠生育功能的影响。1材料与方法1.1材料1.1.1实验动物性成熟期的健康昆明小白鼠,清洁级,雌性100只,6~8周龄,体重25~30g,连续观察两个动情周期均正常;雄鼠15只,3~4月龄,体重大于30g,雄鼠均采用单笼饲养;喂养颗粒饲料,光照周期12L:12d,自由摄食饮水。由南方医科大学动物中心提供。1.1.2受试物大豆异黄酮
5、类提取物,由某生物制品公司提供。总的异黄酮含量为22%,其中大豆黄酮9.5%,大豆甙元1.5%,金雀异黄酮10.3%,金雀异黄素(genistein)0.7%,总的游离甙元(有效生物浓度)含量14.4%。动物实验用剂量参考徐叔云“药理实验方法”计算[2]。1.1.3试剂及仪器二甲亚枫(dimethylsulfoxide,DMSO)购自生工生物工程(上海)有限公司;实验用M2囊胚培养液由中山大学转基因动物实验室提供(为Sigma产品)。1.2试验方法及内容1.2.1动物适应性饲养实验动物在中山大学北校区动物中心二级实验动物房(温度2
6、0~24℃,湿度40%~70%,12h明暗交替)单笼饲养适应1g.kg-1.d-1;高剂量组每日灌胃大豆异黄酮80mg.kg-1.d-1,按灌胃量为1ml.150g-1.d-1配制。正常对照组每日灌胃等量生理盐水。于D4下午用颈椎脱臼法每组处死1/3小鼠,取出输卵管、子宫。自输卵管伞端及子宫与输卵管连接处用预平衡过夜的M2培养液灌注冲出胚胎,用显微操作系统中的倒置显微镜(德国Leica公司)观察囊胚形态学、统计胚胎个数,计算囊胚发育率,留取子宫待检。②每组的另1/3小鼠于D6用颈椎脱臼法处死,处死前5min从鼠尾注射1%的芝加哥蓝
7、B染液0.1ml,肉眼观察着床胚胎数(子宫壁上每出现一条蓝色深带为一处胚胎着床点),统计每组着床胚胎总数及妊娠率[3]。③将每组剩余1/3小鼠继续按相同方法喂养,于第20d处死并称重,剖腹取出子宫和胎鼠,检查死胎和活胎数。1.3数据处理与统计所有数据以SPSS10.0软件包建库并计算各组各指标的平均值,进行均数和方差分析。2结果2.1大豆异黄酮对胚泡在体内发育的影响光镜下,3组共获取胚胎378个,其中正常对照组为125个,低剂量组为128个,高剂量组为125个。3组相比较,获取胚胎总数无显著差异(P>0.05)。其中,正常对照组见
8、106个胚胎发育成囊胚,囊胚发育率为84.8%(106/125);低剂量组见84个胚胎发育成囊胚,囊胚发育率为65.63%(84/128);高剂量组见73个胚胎发育成囊胚,囊胚发育率为62.4%(78/125)。3组相比较,正常对照组的囊胚发育率较
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