昆明山海棠提取物预防急性移植物抗宿主病的实验研究

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1、昆明山海棠提取物预防急性移植物抗宿主病的实验研究作者：王春晴,李振宇徐开林【摘要】目的观察昆明山海棠(THH)提取物在急性移植物抗宿主病(aGVHD)中的作用及其可能的作用机制。方法建立aGVHD模型，BALB/c受鼠清髓性预处理后分别用生理盐水、环孢素A(CsA)、THH及CsA+THH混合物灌胃。观察移植后受鼠aGVHD、生存时间、CD4+/CD8+比率、CD4+CD25+T细胞比率及脾细胞Foxp3mRNA水平。结果生理盐水组出现典型aGVHD，20天内全部死亡。其余3组aGVHD临床、病理表现及生存时间均改善，组间无差异;CD4+/CD8+比率、受鼠CD4+CD25+T细胞比率及

2、脾Foxp3mRNA表达较生理盐水组升高，以联用组明显。结论THH可减轻小鼠aGVHD，延长其生存时间。机制可能与增加CD4+CD25+T细胞比率,上调Foxp3mRNA表达，调节CD4+/CD8+比率有关。THH和小剂量CsA联合有协同作用。【关键词】昆明山海棠;移植物抗宿主病;T细胞亚群;CD4+CD25+T细胞;Foxp3mRNA　　Abastract：ObjectiveToobservetheprophylacticeffectofTripterygiumhypoglaucumHutch(THH)extractonacutegraft-versus-hostdisease(aGV

3、HD)inmicefolloatopoieticstemcelltransplantation(HSCT).Methods1×108bonemarroixedC57BL/6miceicetoestablishtheaGVHDmodel.Recipientmicechloride(groupA),ciclosporinA(groupB),THHextract(groupC)andTHHbinedediumsurvivaltimeforgroupAicedied,iceexhibitedsignificantclinicalsymptomsandhistologicalsignsofaGVH

4、D,ildclinicalandhistologicalsignsofaGVHD.TheratioofCD4+Tcells/CD8+Tcells,percentageofCD4+CD25+TcellsandthelevelofFoxp3inthespleeningroupsB,CandDaximumeffect.ConclusionTHHcanpreventaGVHDafterallogenEicbonemarroice.ThepossiblemechanismisinvolvedintheupregulationofFoxp3expressiontoinduceCD4+CD25+reg

5、ulatoryTcellsandtheregulationoftheCD4+andCD8+Tcells.THHbinedhypoglaucumHutch;graft-versus-hostdisease;Tcellsubsets;CD4+CD25+Tcell;Foxp3mRNA　　异基因造血干细胞移植(allogenEIchematopoieticstemcelltransplantation，allo-HSCT)是血液系统恶性疾病的治愈手段之一，移植物抗宿主病(graft-versus-hostdisease，GVHD)是影响移植结果的主要障碍之一。预防GVHD常用的环孢素A(CsA)

6、、他克莫司等免疫抑制剂不良反应大、费用高。昆明山海棠(THH)是一种中药免疫抑制剂，属于卫矛科雷公藤属植物，已应用于结缔组织病及自身免疫性疾病的治疗，具有肾上腺皮质激素类疗效，但不良反应小，停药后无反跳和戒断症状，且价格低廉。本研究将其用于小鼠急性移植物抗宿主病(acutegraft-versus-hostdisease，aGVHD)模型，并测定移植后受鼠体内T细胞亚群、CD4+CD25+T细胞及Foxp3mRNA表达的变化，以评价其对GVHD的预防效果及可能的作用机制。　　1材料和方法　　1.1实验动物受鼠为BALB/c小鼠(H-2Kd)，雌性;供鼠为C57BL/6小鼠(H-2Kb)，

7、雄性，均为清洁级;鼠龄6～8周，体重18～22g;购自中国科学院上海实验动物中心，合格证号：SCXK(沪)200320003，按二级动物标准运输、饲养。　　1.2药物和试剂CsA(新赛斯平软胶囊，杭州中美华东制药有限公司生产)溶于无菌生理盐水，配制浓度为1g/L。昆明山海棠片(0.25g，广东博罗先锋药业集团有限公司)，溶于无菌生理盐水，配制浓度分别为40、20、10g/L。小鼠抗H-2Kb单抗(BD公司);异硫氰酸荧光素-CD3(