壳聚糖-羟基磷灰石支架修复骨软骨缺损的实验研究

《壳聚糖-羟基磷灰石支架修复骨软骨缺损的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、壳聚糖/羟基磷灰石支架修复骨软骨缺损的实验研究.L.编辑。作者：王文良张华亮关静，初殿伟【摘要】［目的］探讨双层壳聚糖（chitosanCS）/羟基磷灰石复合支架(hydroxyapatiteHA)修复兔骨软骨缺损的可行性。［方法］采用冻干法和烧结法制作双层壳聚糖（CS）/羟基磷灰石（HA）复合支架，以骨髓间充质干细胞为种子细胞，运用纤维蛋白胶种植技术，以双层壳聚糖（CS）/羟基磷灰石（HA）复合支架为载体，修复骨软骨缺损，实验分3组，A组：BMSc+支架，B组：单纯支架，C组：未处理。将修复材料植入骨软

2、骨缺损模型，分别于6、12周取材，进行大体观察，组织学检测，改良SCs附着在复合支架上。大体观察和组织学检测显示，A组基本修复软骨缺损，骨缺损有骨小梁长入。B、C组骨软骨缺损修复不良，组织学检测以纤维性组织或无新生组织形成，软骨及骨缺损均明显存在，改良Sc可修复软骨与骨的缺损，重建关节的解剖结构和功能。【关键词】壳聚糖/羟基磷灰石复合支架;组织工程;骨髓间充质干细胞;骨软骨缺损Abstract：［Objective］Toevaluatefeasibilityforthetreatmentofosteoch

3、ondraldefectsonthefemoralcondylesbychitosan/hydroxyapatitebilayeredscaffoldinrabbitkneejoint.［Method］Bilayeredscaffoldsethod．Theporesizeandinterporesofthescaffoldsicroscopy(SEM)anhydrousethanolsubstitutionmethodtodeterminateitsporosity.Rabbitbonemesenchym

4、alstemcells(BMSC)inoculatedontothescaffold．BySEMscanning，theconditionofthecellsadheringontothescaffoldplantedintoanrabbitmodelofosteochondraldefect10hourlater．TheresulticalcharacterizationofCS/HAbilayeredscaffold:HApossessedaporosityof72%±4.23%CSlayerposs

5、essedaporosityof76%±5.0%.SEMmicrographshorangingfrom200–400μmandHAporeatthetypicaltransversalcrosssectionofHAlayerrangingfrom200–500μm。TheFTIRdatashoplantedontheCS/HAscaffold10hours.ThetreatmentofsimpleCS/HAscaffoldimproveddefectfillingparedainlyfibrocar

6、tilageandshoation.odifiedSC);bonedefect目前软骨损伤生物学修复的金标准是自体软骨移植。尽管临床研究结果证实自体软骨移植大多数病例取得了很好的疗效，但生物学和临床上所面临的挑战是损伤软骨的完全修复和功能重建。目前仍有两个主要的问题需要重视：（1）有研究表明由于外伤，病理改变和因年龄等因素相关的关节软骨病变多伴随着软骨下骨的病变，而软骨下骨病变，又可以影响其上软骨的新陈代谢，形成恶性循环，加重软骨病变甚至发展为骨性关节炎，影响软骨的长期修复效果［1、2］；（2）新生的修复

7、组织与周围宿主骨与软骨组织的相互整合的问题，即新生组织与宿主周围的骨软骨缺乏牢固的锚定［3］，目前大多数软骨组织工程并没有解决这个问题。为了解决这两个问题，本实验采用模拟关节骨软骨组织学结构的CS/HA支架，结合兔骨髓间充质干细胞，同时修复免膝关节骨软骨缺损模型。1材料与方法1.1动物及主要试剂CS/HA支架（自制，图1），日本大耳白兔，LDMEM培养基（sigma美国）,优质胎牛血清（FBS）（血研所天津）胰蛋白酶（sigma美国）,纤维蛋白原凝血酶原（sigma美国）。图1CS/HA支架的宏观结构1

8、.2实验方法1.2.1双层壳聚糖（CS）/羟基磷灰石（HA）复合支架的制作及理化性质检测。　　称取CS溶于醋酸配成浓度为3%(in，紫外线照射30min消毒。收集兔自体P2代骨髓间充质干细胞（D1），调整细胞密度为2×107/ml，按图6e、6c、6a分别是空白组、支架组、支架细胞组动物实验12周时软骨修复情况（甲苯胺蓝），图7e、7c、7a分别是空白组、支架组、支架细胞组动物实验12周时软骨修复情况（甲苯胺蓝）图6f、6d、