绵茵陈药材高效液相色谱指纹图谱研究

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1、绵茵陈药材高效液相色谱指纹图谱研究作者：王凤云，江滨，曾元儿，张军【摘要】目的建立绵茵陈药材的HPLC指纹图谱，为其质量控制提供依据。方法采用反相高效液相色谱法，并进行相应的方法学考察，对不同产地和批次绵茵陈药材进行质量评价。结果采用KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，流动相以乙腈和体积分数为0.2％的磷酸水溶液进行梯度洗脱，柱温35℃，流速1.0mL·min-1，检测波长327nm；该方法稳定性、精密度、重复性良好,可用于绵茵陈药材的指纹图谱测定；不同批次的绵茵陈药材在图谱上存在一定的差异。结论该结果可为绵茵陈药材的质量控制提供依据。【关键词

2、】绵茵陈；高效液相色谱法；指纹图谱　　Abstract:ObjectiveToestablishHPLCfingerprintsofHerbaArtemisiaescopariaeandoffersomeinformationforthequalitycontrolofHerbaArtemisiaescopariae.MethodsandResultsThefingerprintsofHerbaartemisiaescopariaefromdifferenthabitatsandbatchesanceliquidchromatography.ThesampleasilC1

3、8（250mm×4.6mm，5μm）columnundergradientelution.ThemobilephaseconsistedofacetonitrileandH2O(0.2%H3PO4)andthefloL·min-1.Thedetection.Thestability,accuracyandcredibilityofthismethodethodofferssomeinformationforthequalitycontrolofHerbaArtemisiaescopariae.　　Keyisiaescopariae;HPLC;HPLC;fingerprin

4、ts　　茵陈为菊科植物滨蒿ArtemisiascopariaERCK公司）；其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1品种鉴定　　　　指纹图谱所用的不同批次绵茵陈药材均购于广州市药材公司、广州清平药材市场、广州致信药业有限公司，其产地分别为江西（市售1）、山西（市售2）、山东（市售3）、安徽（市售4）、河南（市售5）、山西（市售6）、陕西（市售7）、山东（市售8）、宁夏（市售9）、安徽（市售10）。根据《中国药典》2005版一部茵陈［性状］项下的规定，与《中华人民共和国药典中药彩色图谱集》、《新编中药志》中照片与描述，经广东药学院中药鉴定教研室刘基柱老师鉴定为菊科植物

5、滨蒿ArtemisiascopariaisiacapillariesThunb春季采收的干燥幼苗。　　2.2供试品溶液的制备　　取本品粉末约0.5g，精密称定，加入体积分数为80％的乙醇100mL，置水浴上加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣用体积分数为80％的乙醇溶解，置25mL棕色量瓶中，加体积分数为80％的乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。　　2.3对照品溶液的制备　　取绿原酸对照品适量，精密称定,置棕色量瓶中，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，即得。　　2.4色谱条件　　KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，流动相采用二元体系

6、，流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.2％的磷酸水溶液，梯度洗脱程序：0min（5％A）,10min（10%A），45min（25％A）；柱温35℃，流速1.0mL·min-1，检测波长327nm。　　2.5指纹图谱试验的方法学验证　　2.5.1绿原酸标准曲线的制备取绿原酸对照品溶液（40.8μg/mL），分别进样2、4、6、8、10、16、20μL，按照上述色谱条件进行测定，以绿原酸质量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程为：Y=2553.1X+2.8847,（r=0.9999），表明绿原酸在0.0816～0.816μg范围内线性关系良好。　　2.5.2稳定性试验取

7、同一份供试品溶液，分别在0、1、2、4、8和12h进行检测，直观指纹图谱全貌无明显变化，经中药色谱指纹图谱相似度评价软件（国家药典委员会2004A，以下同）计算，与对照图谱比较，相似度均大于0.9，各共有峰相对峰面积和相对保留时间的RSD分别为1.41％、1.22％，表明在12h内供试品溶液具有良好的稳定性。　　2.5.3精密度试验取同一份供试品溶液，连续进样6次，进行检测，直观指纹图谱全貌无明显变化，经相似度评价，相似度均大于0.9，各共有峰相对峰面积和相对保留时间的RSD分别为0.42％、0.31％，表明该方法精密度良好。