流式细胞术cd45-ssc设门在急性白血病免疫分型中的应用

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1、流式细胞术CD45/SSC设门在急性白血病免疫分型中的应用作者：张玮，程小丽，杨玉琮，陈葳，王翔，周萍，尤元义【摘要】目的探讨流式细胞术CD45/SSC设门在急性白血病免疫分型中的应用。方法选用三色荧光抗体直接标记初诊急性白血病患者骨髓，应用流式细胞术CD45/SSC设门进行免疫分型。结果49例急性白血病患者分为三型，其中系列专一型25例，占51.2%；系列非专一型21例，占42.8%；裸型3例，占6.0%。结论流式细胞术CD45/SSC设门，容易将原始/幼稚细胞与正常成熟细胞群区分开，使白血病分型结果更准确、可靠。【关键词】流式细胞术；CD45；

2、急性白血病；免疫分型　　ApplicationofCD45/SSCgatinginacuteleukemiaimmunophenotyping　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheapplicationofCD45/SSCgatinginacuteleukemiaimmunophenotype.MethodsThreecolormonoclonalantibodiesarkthemarroiapatients,andCD45/SSCgatinginfloetrymunofluorescence.ResultsTh

3、e49casesofacuteleukemiaimmunophenotypeinatematureleukemiacellsfromnormalcells,thusrenderingmorereliableandpreciseimmunophenotyperesults.　　KEYia;immunophenotype　　应用流式细胞术CD45/SSC设门进行急性白血病免疫分型已成为诊断急性白血病免疫分型的重要工具。传统的FSC/SSC设门分析最大缺点是不能将原始/幼稚细胞与正常成熟细胞群完全分开。现今国际上多采用CD45/SSC设门，利用造血系统细

4、胞CD45表达量与细胞分化程度的高度相关性，很容易将原始/幼稚细胞与正常成熟细胞群完全分开，大大增加了白血病免疫分型的准确性。我院从2001年开始使用该方法，现将近几年内来自本院和外院的初诊49例急性白血病患者的免疫分型结果总结报告如下。　　1材料与方法　　1.1病例选择按照　　图1FSC/SSC设门，分群模糊，只能看到一群细胞（略）　　Fig.1FSC/SSCgatingtechnique,Hiveoffinatethematureleukemiacellsfromnormalcells　　采用CD45/SSC设门，三色荧光抗体直接标记法，将49

5、例急性白血病患者分为三型：系列专一型25例，占51.2%，其中髓系表型(M)19例、B淋巴细胞表型(B)5例、T淋巴细胞表型(T)1例；系列非专一型21例，占42.8%，其中T淋巴细胞表型/髓系表型(T/M)6例、B淋巴细胞表型/髓系表型(B/M)10例、T淋巴细胞表型/B淋巴细胞表型/(T/B)2例、T淋巴细胞表型/B淋巴细胞表型/髓系表型(T/B/M)3例；裸型3例，占6.0%(表1)。　　表149例急性白血病患者的免疫分型（略）　　Table149casesofacuteleukemiaimmunophenotype　　3讨论　　急性白血病是

6、一类常见的造血系统肿瘤。骨髓中的原始/幼稚细胞无限制地增殖，且分泌成熟受阻，导致白血病细胞迅速累积，引起正常造血功能的抑制和衰竭。白血病治疗方法很多，主要取决于白血病的类型，因此对白血病进行正确的分型至关重要。采用传统的FSC/SSC设门，部分原始/幼稚细胞被正常的淋巴细胞和单核细胞覆盖，使原始/幼稚细胞比例偏高，易出现假阳性或假阴性结果。现今国际上多采用CD45/SSC设门。CD45是人白细胞共同抗原，原始/幼稚细胞表达量比正常成熟细胞低，幼红细胞有少量表达，可特异地分析原始/幼稚细胞的免疫表型而不受正常成熟细胞的干扰。在CD45/SSC细胞点状

7、图上，可根据不同细胞CD45表达的荧光强度和细胞内颗粒的密度将原始/幼稚细胞(低荧光强度，低或高SSC)、淋巴细胞(高荧光强度，低SSC)、单核细胞(高荧光强度，中等SSC)、中性粒细胞(低荧光强度，高SSC)、有核红细胞(极低荧光强度，低或高SSC)和细胞碎片(最低荧光强度，最低SSC)区分开[25]，经过对各群逐一分析，确立原始/幼稚细胞群，通过二维表型图谱，分析其抗原表达情况。原始/幼稚细胞少时，在CD45/SSC细胞点状图上能清晰显示[6]。　　本室选用多种荧光抗体包括T淋巴细胞(CD2、CD7)、B淋巴细胞(CD10、CD19、CD20

8、)、髓系细胞(CD13、CD33)、系列非特异性(CD34、CD38、HLADR)，均为白血病首选抗体。多种荧光抗体同时