磁性纳米铁治疗大鼠胶质瘤的实验研究

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1、磁性纳米铁治疗大鼠胶质瘤的实验研究【摘要】　　目的：研究局部使用磁性纳米铁热疗对大鼠胶质瘤的治疗效果。方法:将传代培养的C6细胞立体定向接种于SD大鼠的尾状核,14d后肿瘤生长至直径0.5～1.0cm时随机分成对照组和3、5、8mg磁性纳米铁热疗组,分别立体定向注入等体积的生理盐水及3、5、8mg的磁性纳米铁,于交变磁场中连续热疗3次,每次30min,观察大鼠的生存时间及肿瘤体积变化。免疫组织化学SP法检测bcl2和bax蛋白表达。结果：肿瘤热疗3次后3、5、8mg磁性纳米铁热疗组大鼠的生存时间分别为(19.60±1.43)、(18.90±1.75)、(20.40±2.26)d,明显长

2、于对照组［(13.30±1.69)d，P＜0.05］,各剂量磁性纳米铁热疗组bax蛋白表达亦明显强于对照组,差异有统计学意义(均P＜0.05)；各剂量磁性纳米铁热疗组间bax蛋白表达、bcl2蛋白表达及生存时间比较差异无统计学意义(均P＞0.05)。结论:磁性纳米铁热疗能有效地促进大鼠胶质瘤细胞凋亡,抑制肿瘤增殖,延长荷瘤鼠的生存期。磁性纳米铁热疗能促进bax蛋白的表达,对bcl2蛋白表达影响不明显。【关键词】胶质瘤；纳米铁；热疗；凋亡　　[Abstract]Objective:Toexploretheefficacyofmagicnanoironhyperthermiaonrat

3、glioma.Methods:C6cellseansofsubcultureofstereotacticinoculation.After14daysahadgroindiameter,theratslyandthenthemagicnanoiron(3,5,8mg)oranequalvolumeofphysicologicalsalineagicnanoirontreatmentforthreetimesinalternatingmagicfieldandkeeping30minforeachtime,thesurvivaltimeofratsandthechangeoftumo

4、rvolumeethodofimmunohistochemistrySP.Results:Thesurvivaltimeofratsinthemaghetianoiron3,5,8mggroupsaghetianoirongroupseamongthetreatmentgroupshadnotdifference(allP＞0.05).Conclusions:Magicnanoironhyperthermiacaneffecttivelypromotecellapoptosisinratglioma,inhibittumorproliferationandprolongthesur

5、vivaltimeoftumorbearingrat.Magicnanoironhyperthermiacanpromotetheexpressionofbaxprotein,butthebcl2expressionofproteinisnotobvious．　　[Keya；nanoiron；hyperthermia；apoptosis　　胶质瘤(glioma)起源于神经外胚层,是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤(平均占44.69%)［1］。由于生长位置特殊、恶性程度高以及血脑屏障的存在,临床上胶质瘤治疗效果极差。近来研究发现,胶质瘤对热疗敏感。在建立大鼠胶质瘤脑内模型的基础上,通过立

6、体定位向肿瘤内注入不同剂量的磁性纳米铁进行热疗,并与对照组进行比较,探讨磁性纳米铁热疗是否可以使肿瘤缩小、延长荷瘤鼠的生存期以及磁性纳米铁热疗是否能够影响bax、bcl2蛋白表达、促进肿瘤细胞凋亡。　　1材料与方法　　1.1材料　　SD健康大鼠80只,体重280～300g,雌雄不限,购于东南大学动物实验中心。大鼠C6胶质瘤细胞株购于中国科学院上海生物研究所，大鼠bax、bcl2蛋白单克隆抗体为美国SantaCruz产品，交变磁场机器及磁性纳米铁颗粒(15nm)由东南大学生物医学工程系提供。　　1.2方法　　1.2.1C6胶质瘤细胞培养　　细胞分装于底面积为50cm2的培养瓶中,加入适

7、量体积分数为2.5%胎牛血清、15%马血清的F12K培养液,置于温度为37℃、体积分数为5%的CO2恒温恒湿培养箱中,单层培养法传代培养生长至所需的细胞数,在细胞对数生长期培养瓶大约满85%时,以0.25%胰酶消化(不含EDTA),收集消化液,离心后去除上清液,F12k液洗2次后制成细胞悬液,调节细胞浓度为［1×107·(10μl)-1～1×108·(10μl)-1］,置于37℃恒温摇床待接种；苔盼蓝排斥实验检测显示细胞活力＞9