氟对小鼠釉原蛋白基因表达的影响

《氟对小鼠釉原蛋白基因表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、氟对小鼠釉原蛋白基因表达的影响：陶洪，王琳，侯铁舟，张珑，王雪绒【摘要】目的探讨氟对小鼠釉原蛋白基因表达的影响。方法在建立小鼠中度及重度氟斑牙模型的基础上，应用原位杂交技术检测对照组(饮用去离子水)、低氟组(饮水F-浓度为50mg/L)、高氟组(饮水F-浓度为150mg/L)小鼠下切牙发育过程中釉原蛋白mRNA在成釉细胞增殖分化期﹑分泌期﹑成熟期的表达情况。结果小鼠釉原蛋白mRNA在成釉细胞增殖分化期表达为阴性，分泌初期细胞内及新生釉基质中开始出现弱阳性表达;至分泌期，细胞内及新生釉基质中均呈强阳性表达;成熟釉质中无釉原蛋白mRNA的阳性表达。低氟组釉原蛋白mRNA在新生釉基质表面呈强弱交替的

2、不均匀表达;高氟组釉原蛋白mRNA在新生釉基质表面及矿化釉质中均呈阳性表达;在成釉细胞分泌期，其表达多次中断。结论氟影响釉原蛋白mRNA在成釉细胞、釉基质中的表达，过高浓度的氟周期性抑制成釉细胞分泌釉基质的功能，从而导致釉质的矿化不全、矿化不均及局灶性缺损。【关键词】氟;秞原蛋白;原位杂交　ABSTRACT:ObjectiveTostudytheeffectoffluorineontheamelogeningeneexpressionofmusmusculusincisors.MethodsOnthebasisofestablishingamodelformedium-andhigh-leve

3、ldentalfluorosisofmusmusculus,thisresearchanalyzedthespace-timeexpressionofamelogeninininferiorincisorgrousmusculusbyusinginsituhybridization.ResultsAmelogeninmRNAicroscopeintheameloblastproliferationdifferentiationperiod,anditshoelmatrixattheinitialsecretionstagebutitshoelmatrixetosecretionphase.Th

4、ereelogeninmRNAatthematurestage.Inlog/L),amelogeninmRNAshoelmatrixunderthemicroscope.Inhigh-fluorinegroup(theconcentrationofF-indrinkingg/L),amelogeninmRNAshoeljunctionofneelmatrixandmineralizedenamelunderthemicroscope.ConclusionOverdosefluorinecanaffecttheexpressionofamelogeninmRNAofameloblastanden

5、amelmatrix,anditcanintermittentlyinfluencetheexudationofenamelmatrixatthesametime.Then,itineralizationofenamel,unsymmetricalmineralizationandfocaldamnification.　　KEYelogenin;insituhybridization　　氟牙症发病机制的研究已取得了相当程度的进展，但氟对釉质蛋白基因表达的研究才刚刚起步。尽管釉基质蛋白潴留可以解释釉质矿化不良，但却无法解释釉质不均匀的矿化不全以及牙齿表面局灶性釉质发育不全、牙齿窝沟变浅、牙本质钙

6、化不良等现象。如果能够证实氟使得牙胚成釉细胞出现不均匀的分化、增殖和釉质蛋白基因表达功能异常，将有助于对上述问题的解释。因此，本实验采用原位杂交技术，研究过量氟对牙釉质发育过程中起关键作用的釉原蛋白基因时空表达的影响，旨在从分子水平上进一步探讨氟牙症的发病机理，为氟牙症的预防提供新的理论依据。　　1材料与方法　　1.1小鼠氟牙症动物模型的建立　　1.1.1实验动物及分组30只ICR雄性小鼠，体重18～22g，购于西安交通大学医学院实验动物中心。动物随机分为对照组、低氟组、高氟组，每组10只。　　1.1.2动物饲养及处理动物适应性饲养1周。1周后，对照组、低氟组、高氟组小鼠饲以常规饲料;对照组饮

7、用去离子水，低氟组饮水投50mg/L氟(F-)，高氟组饮水投150mg/LF-，饲养42d。饲养期间每天观察大鼠的一般状态及牙齿变化，每10d称重;至第42天存活小鼠28只(高氟组死亡2只)。脱颈处死所有小鼠，解剖分离下颌切牙及其牙胚组织，置于40g/L多聚甲醛(含1mL/LDEPC)中固定24h。　　1.2标本制备参照侯铁舟[1]氟牙症10类分级标准，选取小鼠氟牙症4～5级(轻度)，9～10级(