α连环素和β连环素在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

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1、α连环素和β连环素在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义【关键词】肺肿瘤；α连环素；β连环素；免疫组织化学ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheexpressionsofαcatenin(αcat)andβcatenin(βcat)andtheirrelationentandprognosisofnonsmallcelllungcancer(NSCLC).MethodsExpressionsofαcatandβcatmunohistochemicallystudiedin43specimensofNSCLCand7cases

2、ofnormallungtissues.ResultsOfthe43NSCLCcases,theabnormalrateofαcatandβcatexpressionphnodeinvolvementhadasignificantlypositivecorrelationalexpressionofαcatorβcat(P<0.05).Thesurvivaltimealexpressionthaninthosealαcatorβcatexpression.βcatcouldserveasanindependentprognosisfactor(P<

3、;0.05).ConclusionTheexpressionsofαcatandβcatarecloselycorrelatedentandprognosisofNSCLC.αcatandβcatmaybeusedasindicatorsfordevelopmentandprognosisofNSCLC.KEY)：Ⅰ期10例，Ⅱ期17例，Ⅲ期16例。29例伴有区域淋巴结转移。正常对照取7例正常肺组织，男性5例，女性2例。1.2试剂及方法αcat和βcat单克隆抗体购于北京中山生物技术有限公司，PV6000PicTureTM通用型试剂盒为美国Zymed公司产品。

4、本实验采用免疫组化PicTureTM通用型二歩法，石蜡标本常规切片，脱蜡至水，30mL/L甲醇双氧水阻断内源性过氧化物酶活性，微波炉修复抗原，每张切片滴加1∶70鼠抗人αcat或βcat第一抗体80μL，置湿盒中室温下孵育120min，PBS液洗涤后滴加即用型PV6000PicTureTM通用型试剂，室温下孵育30min，DAB液中显色，苏木素复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明后封片。阳性对照采用已知的表达αcat、βcat的正常支气管黏膜切片，空白对照采用PBS代替一抗。1.3结果判定标准免疫组化阳性反应为棕黄色或黄色细颗粒状着色。αcat和βcat正常染色均定

5、位于细胞膜，表现为细胞膜呈均匀线性棕黄色染色，无胞质及胞核染色(图1)。异常染色表现为细胞膜染色减少和(或)细胞质、胞核染色(图1)。依阳性细胞百分比和染色分布综合判断分析。每例切片在400倍光镜下随机找5～10个视野，数100～200个细胞，共1000个癌细胞，记录阳性细胞的百分数和染色特征。如果≥90%的肿瘤细胞染色为正常染色时为正常表达；如果正常染色的肿瘤细胞数<90%为异常表达[3]。　　1.4统计学处理所有统计学分析采用SPSS10.0统计软件包完成。αcat和βcat的表达采用卡方检验和Fisher精确概率法；组间相关性用Kendallstaub

6、秩相关检验；各因素对生存的影响采用LogRank检验，生存期按KaplanMeier方法制作累计生存曲线；影响预后的多因素分析采用Cox比例风险模型。结果均以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1αcat和βcat在正常肺组织及NSCLC中的表达αcat及βcat在正常肺组织中无异常表达。43例NSCLC中αcat及βcat异常表达率分别为72.1%(31/43)和65.1%(28/43)。两种蛋白异常表达率在正常肺组织和NSCLC间经统计有统计学意义(P<0.05，Fisher精确概率法)。2.2αcat和βcat在NSCLC中的

7、表达与临床参数的关系在病理分级Ⅰ、Ⅱ级分组中αcat和βcat的异常表达率分别为58.3%和50.0%，Ⅲ级分组中αcat和βcat的异常表达率分别为89.5%和84.2%，不同的病理分级分组间两种蛋白的异常表达率均有显著性差异。αcat和βcat在伴有区域淋巴结转移组的异常表达率明显高于无淋巴结转移组(表1)。表1αcat和βcat在NSCLC中的表达与临床参数的关系2.3αcat和βcat的表达与NSCLC预后的关系αcat正常表达者和异常表达者的中位生存时间分别为35个月和19个月，结合Kaplan